XAGE-1b腺病毒表达载体的构建及其功能研究

XAGE是通过生物信息学方法发现的新一类睾丸-肿瘤抗原(cancer/testis antigen,CT抗原)基因,XAGE-1是其主要成员.当前已获得了XAGE-1在多种肿瘤组织中较为详细的表达谱,并初步揭示了XAGE-1与病理进程及肿瘤亚型的关系,但关于其功能及表达调控机制的研究尚刚刚起步.构建了高效表达XAGE-1b的重组腺病毒载体Adv-1b;在细胞增殖、集落形成实验中,感染Adv-1b后的细胞增殖能力更强(P<0.01,student t检验),形成的单克隆集落更大;软琼脂集落形成实验中,感染Adv-1b后的细胞集落形成率更高(P<0.01,卡方检验).研究结果初步证实:XAGE-1b对涎腺腺样囊性癌细胞的增殖及转移能力有一定的促进作用,为进一步深入研究XAGE-1b的功能和致癌机制打下了良好基础.     

人巨细胞病毒包膜糖蛋白B的B细胞抗原表位预测

目的:通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒包膜糖蛋白B(gB)的三级结构并预测其线性B细胞抗原表位.方法:根据人巨细胞病毒gB蛋白的胞外域序列,利用DNAStar软件分析其二级结构和表面特性,联合在线B细胞表位预测程序BcePred,通过其理化特性来综合预测该蛋白可能的线性B细胞抗原表位;利用SWISSMODEL服务器的同源建模方法构建gB蛋白的三级结构模型,对在生理三聚体条件下该蛋白各预测表位进行验证.结果:成功预测出人巨细胞病毒gB蛋白的多个线性B细胞抗原表位区段,其中预测出的5个表位区段不属于任何已发现的抗原区域,为后续验证其优势中和表位,研制安全、高效的表位疫苗奠定了理论基础.     

除虫菊酯人工抗原的合成及鉴定

通过在除虫菊酯6种单体的五元环酮基上引入羧基的方法制备半抗原,再用碳二亚胺法偶联到牛血清白蛋白(BSA)上制得完全抗原.经紫外光谱测定,6种完全抗原的分子偶联比为6:1(除虫菊酯Ⅰ:BSA)、13:1(除虫菊酯Ⅱ:BSA)、9:1(瓜叶菊酯Ⅰ:BSA)、11:1(瓜叶菊酯Ⅱ:BSA)、7:1(茉酮菊酯Ⅰ:BSA)和9:1(茉酮菊酯Ⅱ:BSA).以完全抗原免疫BALB/c小鼠制抗血清,采用间接酶联检测抗体效价均达到105以上,再用饱和硫酸铵沉淀得到除虫菊酯的多克隆抗体.该结果为除虫菊酯的酶联抗体检测及免疫分析技术奠定了基础.     

黄色肉芽肿性胆囊炎与胆囊癌的病理及免疫组化分析

目的 探讨黄色肉芽肿性胆囊炎(XGC)与胆囊癌的病理特点，胆囊粘膜上皮增生、上皮不典型增生和胆囊癌的免疫组化特点．方法 用免疫组化技术(SP法)对6例胆囊上皮不典型增生、8例胆囊癌以及从16例XGC中选出有胆囊粘膜上皮增生者9例，进行PCNA、Ki-67、p53检测．结果 9例XGC中PCNA，Ki-67和p53标记均为阴性；6例上皮不典型增生中Ki-67和p53为阴性，PCNA4例阳性；8例胆囊癌中6例PCNA阳性，5例Ki-67阳性，7例p53阳性．结论 胆囊粘膜上皮增生、不典型增生和胆囊癌的鉴别主要依据组织学特征，PCNA，Ki-67和p53标记对三者的诊断和鉴别诊断有一定的帮助．     

抗原进化免疫算法的动目标预测

根据免疫学研究中抗原与抗体同时进化的特性，通过对动目标预测系统特点的分析，提出一种改进的免疫算法．算法以目标当前运动时刻的拟合信息为初始抗原，下一时刻信息的改变为抗原进化，进行参数优化搜索．并进一步使用所得最佳参数对预测模型进行拟合得出结果．仿真结果表明，该算法可以满足动目标预测系统的高实时性要求．     

运城盐湖卤虫Artemia sinica饵料分析

Artemia Sinica为山西运城盐湖特有种．我们于1991年5月在运城盐化局一工段涝取成虫，立即用4％的福尔马林溶液浸制．将成虫50条取其消化遭，挤出内容物，客于100毫升蒸馏水并搅匀，取其中的水溶液做成50目装片，全部在显微镜下镜检．镜检结果如下：1．50目装片中所包括的种类：原生动物3种，藻类4种和有机质碎屑．2.50目装片中有机质碎屑最多，其次为绿色杜氏藻和盐生杜氏藻．隐杆藻属和原生动物则较少.在实验室人工饲养以盐生杜氏藻作为饵料效果最佳．     

人丙型肝炎病毒核心抗原基因的表达和纯化

人丙型肝炎病毒Ⅰ型核心抗原编码区ｃＤＮＡ，全长５７３ｂｐ，编码１９１个氨基酸，被克隆到一种新的表达质粒ｐＥＳＥＴＨｉｓＢ中，转化大肠菌ＢＬ２１菌株，在１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１ＩＰＴＧ诱导３７℃培养５ｈ，核心抗原表达水平达到高峰，表达出分子量２６×１０＾３的融全蛋白，并在钠形成微小晶体。     

痢疾杆菌膜表面抗原分析

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ＃胶电泳和免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）对痢疾杆菌膜表面抗原进行了分析，测定了主要蛋白的分子量。依电泳凝胶染色和免疫印迹图谱，分析了痢疾菌４个群的主要抗原及福氏菌的群特异性抗原和两个型的型特异性抗原，并比较了志贺氏菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）实验选用菌株的抗原蛋白。同时，对几种菌的生长曲线进行了测定。     

松香人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用脱氢松香胺(DHAM)为半抗原合成了松香的完全抗原、并通过免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体。首先DHAM与琥珀酸酐(SUC)反应合成琥珀酸单酰脱氢松香胺(DHAM-SUC),然后再与牛血清蛋白(BSA)和钥孔血蓝蛋白(KLH)进行偶联,合成了松香的完全抗原DHAM-SUC-BSA和DHAM-SUC-KLH,偶联比分别为12和35。以DHAM-SUC-KLH为免疫原对新西兰大白兔进行免疫,制备了抗血清,效价达1.28×10⁵,脱氢松香酸(DHA)和松香酸(AA)的50%抑制浓度(IC₅₀)分别为25.1μg/L和36.4μg/L。研究合成的松香人工抗原具有理想的免疫原性,获得的多克隆抗体具有较好的灵敏度,可为建立畜禽肉制品中松香残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法打下基础。