38kD抗原特异TCR基因修饰T细胞的抗结核抗原活性研究

抗原特异T细胞受体(Tcell receptor,TCR)基因修饰T细胞已被应用于肿瘤、病毒感染过继免疫治疗研究,取得了鼓舞人心的结果,但在结核上未见报道.本研究利用结核分枝杆菌38kD抗原刺激人CD4+,CD8+T细胞,通过分析刺激前后T细胞TCR互补决定区3(complementarity determining region 3,CDR3)谱型,从CD4+,CD8+T细胞中分别筛选出38kD抗原特异的TCR Vα11,Vβ8和Vα3,Vβ8基因家族T细胞,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增获得其α,β链全长基因并插入逆转录病毒载体,构建重组载体pMX-β8-IRES-α11-GFP(pβ8α11)和pMX-β8-IRES-α3-GFP(pβ8α3),分别转染初始CD4+,CD8+T细胞,检测其体外抗结核抗原活性.结果显示,TCR基因修饰的CD4+,CD8+T细胞均表达外源性TCR,不仅能特异性识别抗原,且介导免疫效应功能,表明结核抗原特异TCR基因修饰的T细胞具有应用于多药耐药结核患者过继细胞免疫治疗的可能.     

牦牛肝片吸虫四种抗原交叉免疫印迹分析

用牦牛肝片吸虫四种抗原分别制备四种抗血清，其ＥＳＩＳＡ效价 １：８００，１：１６００，１：３２００和１：８００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳区带组分分别为２５，２４，１８和９条带；免疫印迹结果，各种抗清与相庆抗原作用的主要抗原成份分别为５，１０，７和３；四种抗原中存在的共同抗原为１７．２ｋＤ；特征抗原ＨＡ为２９．９ｋＤ，ＳＡ为２７．２ｋＤ的２４．３ｋＤ；正常兔血清与各个抗原间均未出现免疫反应。     

两种不同示踪剂用于蛋白质与抗原分子微阵列信号检测的对比研究

以氧化型琼脂糖凝胶膜为基片，制作蛋白质与抗原分子微阵列，建立了检测固相人IgG,游离IgG和自身抗体分子的免疫学测定模式，分别以辣根过氧化物酶－二氨基联苯胺一双氧水（HRPDAB－H2O2）和胶体金－硝酸银－对苯二酚2种示踪系统作为蛋白质与抗原分子微阵列信号显示剂，并对其作用的原理与特点进行讨论，检测结果发现基于胶体金的免疫金银染色法（IGSS）比固相酶免疫测定法（EIA）敏感，2种示踪系统对固相人IgG的最低检出量分别为0．05ng和0．5ng；而对血清游离IgG的最低检出量IGSS法比EIA法至少高出10倍，两法用于自身抗体的测定亦表现出较好的重复性，在14例HCV感染者中，自身抗体的总体检出率分别为38．6％和31．4％，结果具有显著的同步性，故同时辅以2种示踪剂并用于阵列芯片的联合测试，有助于提高自身抗体的总体检出水平。     

琼脂微球偶联氨基化合物及其效果分析

琼脂微球表面偶联了氨基这一易被氧化的亲和性基团,制备了对口蹄疫病毒抗原的亲和作用。以琼脂微球为基质,通过正交试验筛选、凯氏定氮法测定,选取最优偶联条件下的琼脂微球介质,用其亲和吸附口蹄疫病毒灭活抗原,检测其亲和吸附效果。结果显示:琼脂微球15g,环氧氯丙烷15mL,3 M NaOH 30mL,40℃活化反应3.5h;6mL苯乙胺,2M NaOH 20mL,50℃偶联反应2.5h。该条件偶联后的含氮量是0.4486%,得到的该介质对口蹄疫灭活病毒抗原的层析效果和某生产疫苗的药厂的分离纯化效果相似,表明该自制介质对分离纯化口蹄疫灭活病毒抗原具有一定的应用潜力。     

SECM的产生收集模式检测小鼠免疫球蛋白IgG

基于扫描电化学显微镜(SECM)产生收集模式,开展小鼠免疫球蛋白IgG(作为抗原)检测研究.利用分子自组装的方式,以硫辛酸为媒介,利用金与硫的键合作用以及羧基与氨基的化学反应将羊抗鼠抗体修饰在金电极上,辣根过氧化氢酶(HRP)标记的小鼠抗原与未标记的小鼠抗原再通过竞争与有限的抗体位点结合,完成小鼠抗原检测平台的搭建.HRP与过氧化氢(H_2O_2)的催化反应使得对苯二酚(H_2Q)被氧化为对苯醌(BQ),BQ在探针上被还原.利用逼近曲线,通过记录加入不同浓度比的小鼠抗原混合液时探针上还原电流的变化来进行待测物(小鼠抗原)的检测,结果表明,小鼠免疫球蛋白IgG在1～1 000 pg·mL~(-1)浓度范围内,探针电流与浓度的变化呈线性关系,检测限为0.1 pg·mL~(-1).     

椭圆偏振光谱法研究固——液界面上抗原体反应

用气相沉各法将Ｎ－β（氨乙基）ｒ－氨丙基三甲氧基硅烷沉积在单晶硅表面上，并用戊二醛将正常兔ＩｇＧ抗原固定在硅烷化后的单晶硅表面上，然后用椭圆偏振光谱法固－液界面上的正常兔ＩｇＧ抗原与羊－抗兔抗体反应进行了研究，结果表明该方法能直接研究抗原抗体反应，具有较高的特异性和灵敏性，克服了现代了免疫学研究中的需要第二特征为指针的缺陷。     

介壳虫的防治技术

介壳虫是花卉、林果上常见的害虫,种类多,繁殖能力强,一年发生数代,常以受精的雌成虫、卵或若虫在叶片、枝干或果实上越冬.第1代介壳虫大多在4～5月产卵,5～6月孵化.介壳虫外被有一般药剂难透过蜡质层,化学防治困难.因此,应采取综合防治的方法.     

R0(SS-A)抗原的纯化

本文以猪脾细胞浆为原料,采用制备电泳方法纯化了RO抗原。纯化的样品在PAGE上呈现单条区带,通过凝胶过渡测定分子量约为80KD,在SDS-PAGE上主要表现为60KD多肽带,Western blotting证明此60KD即为RO抗原的活性多肽。     

免疫响应中抗体抗原间数量关系的分析

用关于抗体和抗原的微分方程描述了生物系统中简化的免疫响应，并通过方程稳定性的分析讨论了方程的一些特性，用动力学解释了生物系统中的一些免疫现象     

云南怒族稀有血型MNSs系统--(Mur)抗原抽样调查分析

目的 :了解云南怒族稀有血型MNSs系统—(Mur)抗原布分情况 ,为解决临床寻找稀有血型提供理论依据。方法 :在怒族自然村采用随机抽样调查128人 ,进行血清学检测定型的方法。结果 :云南怒族稀有血型MNSs系统—(Mur)抗原阳性率特别高为22 65%(29/128)与上海汉族阳性率为0 66%(6/900)相比 ,怒族Mur抗原分布明显高于汉族Mur抗原。结论 :怒、汉两民族的Mur抗原阳性率有高度显著性差异(x2=158 14 ,P<0 005)