Differential gene expression profile in ischemic myocardium of Wistar rats with acute myocardial infarction

To determine the differential genes in ischemic myocardium of Wistar rats with acute myocardial infarction （AMI）, we constructed two differential gene expression profiles. AMI model was generated by Iigation of the left anterior descending coronary artery in Wistar rats. Total RNA was extracted from the normal and the ischemic heart tissues under the IigaUon point at the 8th day after the operation. Differential gene expression profiles of the two samples were constructed by using long serial analysis of gene expression （LongSAGE）. Real time fluorescence quantitative PCR （Q-PCR） was used to confirm the expression changes of partial target genes. The main results were as follows： a total of 15966 tags were screened from the normal and the ischemic LongSAGE maps, and 9646 tags in the normal tissue and 9563 tags in the ischemic tissue were obtained. Among them, 7665 novel tags were identified by NCBI BLAST search. In the ischemic tissue, 142 genes significantly changed compared to those in the normal tissue （P〈0.05）. These differentially expressed genes may play important roles in the pathways of oxidation and phosphorylation, ATP synthesis and glycolysis and so on. Partial genes identified by the LongSAGE were confirmed by Q-PCR. The results show that AMI causes a series of gene expression changes in the regulation of the pathways related to energy metabolism.     

Cytotoxicity and Apoptotic Effect of Phytoceramide IV Containing Liposomes on Murine Mastocytoma Cell P815

The cytotoxicity and apoptotic effect of phytoceramide IV （N-palmitoyl-phytospingosine） were investigated by preparaing the ceramide containing liposomes using cholesteryl hemisuccinate （CHEMS） and methoxypolyethylene glycol （2000） cholesteryl succinate （PEGCHS）. The ceramide-containing liposomes prepared using ultrasonication contained CHEMS and the phytoceramide IV at a molar ratio of 1：1. Gel chromatography and high performance liquid chromatography equipped with an evaporative light-scattering detection （HPLC-ELSD） were used to analyze the liposomes. The results show that the ceramide entrapment efficiency is over 90% and the molar ratio of phytoceramide IV to CHEMS is 1：1.4. The ratio of ceramide to CHEMS as well as the ultrasonication duration affects the liposome properties. The phytoceramide Ⅳ encapsulated in the liposomes reduces the cellular activity of the murine mastocytoma cell line P815 in a dose-dependent manner and the reduction of cellular activity is due to cell apoptosis. 4. 6-diamidino- 2-phenylindole dihydrochloride （DAPI） staining further supports this result. The encapsulation of highly hydrophobic ceramides into liposomal formulations could become a potential candidate for enhanced apoptosis.     

大豆总皂甙对运动力竭大鼠心肌抗氧化能力影响的实验研究

目的：研究大豆总皂甙（TS）对运动力竭大鼠心肌抗氧化能力的影响。方法：采用跑台一次力竭急性实验造模。分为四组：安静组,安静加药组,力竭组,力竭加药组。跑台速度30m/min,运动至力竭后立即取材,分光光度法测试心肌组织SOD（超氧化物歧化酶）,CAT（过氧化氢酶）,MDA（丙二醛）,GSH-Px（谷胱甘肽过氧化物酶）,GR（谷胱甘肽还原酶）,GSH（还原型谷胱甘肽）,T-AOC（总抗氧化能力）等指标。结果：与安静组相比,安静加药组SOD、GSH-Px活性显著增强（P〈0.05）,CAT和GR极显著增强（P〈0.01）,力竭组GR极显著升高（P〈0.01）;与力竭组相比,力竭加药组SOD活性、T-AOC显著增强,而MDA显著降低,均具有统计学意义（P〈0.05）,GSH-Px极显著升高（P〈0.01）;与力竭加药组相比,安静加药组GR极显著升高（P〈0.01）。结论：TS能显著的提高运动大鼠心肌组织抗氧化能力,降低MDA生成,延长其力竭运动时间,延缓运动疲劳的发生。     

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠心肌ATP酶和抗氧化能力的影响

目的探讨油橄榄叶提取物(OLE)对铅中毒小鼠心肌ATP酶和抗氧化能力的影响.方法 选健康小鼠,每日灌胃醋酸铅溶液的同时灌胃不同剂量的OLE进行治疗,连续用药30 d,检测ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性和丙二醛(MDA)含量.结果 与模型对照组相比,小鼠灌胃OLE后心肌ATP、SOD和GSH-PX的活性升高,MDA含量降低.结论OLE对铅中毒小鼠有一定疗效,能影响心肌ATP酶的活性和抗氧化能力,拮抗铅对心肌的毒性.     

白藜芦醇对胰岛素抵抗小鼠糖脂代谢的影响及心肌的保护作用

为研究白藜芦醇(RES)对胰岛素抵抗小鼠的糖脂代谢影响及心肌的保护作用。将雄性c57bl/6小鼠随机分对照组(NC)、高脂组(H)、高脂+溶媒(C)、高脂+溶媒+RES干预组(R),分别给予相应饲料喂养14周后给予相应灌胃干预处理。8周后检测小鼠血脂、血糖、血清脂肪因子;检测心肌羟脯氨酸;采用蛋白质印迹法(western blotting,WB)检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的蛋白表达;实时荧光定量PCR、WB检测小鼠的心肌PPARγ(过氧化物酶增殖物激活受体γ)、ADPN(脂联素)、TNF-α(肿瘤坏死因子α)的mRNA及蛋白表达情况。结果表明:与NC组相比,H组与C组总胆固醇(total cholesteral,TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)升高(P0.01);血清瘦素、抵抗素水平升高;心肌中羟脯氨酸、胶原、TNF-α升高(P0.01或P0.05);PPARγ、ADPN表达下降(P0.01);而R组较H组TC、LDL降低(P0.05);血清瘦素、抵抗素水平下降;心肌中胶原、TNF-α降低(P0.01或P0.05);PPARγ、ADPN的表达升高(P0.01)。RES可能是通过激动PPARγ调节ADPN、TNF-α改善胰岛素抵抗小鼠糖脂代谢紊乱、心肌肥厚、纤维化。     

ATGL生化功能调节及与心肌肥厚的关系

脂肪甘油三酯脂肪酶是脂肪分解代谢限速酶,ATGL广泛表达于全身各组织,尤其高表达于脂肪组织、肝脏和心脏等.ATGL敲除显示动物因大量甘油三酯堆积而产生严重肥胖,心脏受累尤其严重.主要介绍ATGL功能调节及其功能失调与心肌肥厚的关系     

黄芪甲苷下调托样受体4抑制心肌梗死心肌组织损伤的作用

分析黄芪甲苷调控托样受体4（Toll-like receptor 4 (TLR4), ）抑制心肌梗死心肌组织损伤的作用并探讨其作用机制。将Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、二甲基亚砜（DMSO）组、模型（Model）组和黄芪甲苷治疗（AS-IV）组,每组均为10只。Model组采用经典的左冠状动脉结扎术复制心肌梗死模型,Sham组手术处理但没有进行结扎处理。AS-IV组将AS-IV溶于1%的DMSO中,20 mg·(kg·d)-1腹腔注射。Sham组和Model组给予等量的生理盐水,DMSO组给予等量含1%DMSO的生理盐水。给药方式均为腹腔注射,每日1次,连续14 d。采用HE染色法分析心肌组织病理变化,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡程度。逆转录PCR（RT-PCR）检测心肌细胞TLR4 mRNA的表达,免疫印迹法和免疫组化法检测心肌心肌细胞TLR4蛋白的表达。结果表明：AS-IV治疗可显著减轻心梗大鼠心肌组织的坏死程度,降低炎症细胞的数量,减少疤痕组织的增生,显著减轻心肌细胞的凋亡,下调心肌组织中TLR4 mRNA和蛋白的表达。可见AS-IV通过下调心梗大鼠心肌组织中TLR4样受体的表达而对抗心梗后心肌组织的损伤。     

人心肌肌钙蛋白I和C亚基的基因工程表达及两者的结合实验

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是检测心肌损伤的理想标志物,具有很高的特异性,在病人体内可停留较长时间．以人心肌cDNA为模板,通过PCR方法克隆了人的cTnI和cTnC基因,将cTnI和cTnC基因插入到原核表达载体pBV220中,转化E．coli DH5α菌株并诱导表达,经SDS-PAGE分析,分别发现分子质量为28ku和18ku的特异性蛋白条带．cTnI经Western blotting检测,结果与天然蛋白一致．将纯化得到的cTnI免疫小鼠后,用人天然标准抗原检测小鼠的抗血清效价在1：16000以上,并且呈高度特异性,与cTnC无交叉反应．而表达的cTnC可以在一定条件下和cTnI结合,证明2种基因工程蛋白是具有天然构象和结合功能的．cTnI和cTnC的表达及2种蛋白结合试验的研究结果为进一步研发免疫诊断试剂奠定了良好的基础．     

龙芽楤木皂苷诱导心肌预适应对缺血再灌注后离体心脏血流动力学变化影响的研究

目的研究龙芽楤木皂苷诱导心肌预适应对缺血/再灌注后离体心脏血流动力学变化的影响.方法成年雄性Wistar大鼠40只,随机分成空白对照组(Co组)、心肌缺血预适应组(IPC组)、单纯缺血组(IC组)、龙芽楤木皂苷给药组(As组),每组10只,各组动物预处理后,行Langendorff离体心脏灌流.观察再灌注后10,20,30 min时间段左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、室内压最大上升速率( dp/dt)、室内压最大下降速率(-dp/dt)、主动脉流量(AF)及心率(HR),同时记录Ⅱ导联心电图并观察心率(HR)及心律失常发生情况.结果观察大鼠Langendorff离体灌流心脏在缺血/再灌注后血流动力学的变化,发现AS组与IC组相比:其各项心功指标恢复较好(P<0.05,P<0.01),5 min之内室颤(VF)发生率较低,心律失常评分较低(P<0.01).而与IPC组相比:其二者各项心功指标恢复均较好,除20,30 min的LVSP有较小差别外(P<0.05),其他指标无显著性差异(P>0.05);其二者5 min之内室颤发生率均较低,心律失常评分均较低,且无显著性差异(P>0.05).结论龙芽楤木皂苷能够诱导心肌预适应,对离体大鼠心脏缺血/再灌注期的心室收缩与舒张功能障碍有显著的改善作用,也有较好的抑制心律失常发生的作用.因此,有待对龙芽楤木皂苷进行更深入的研究,以探讨其在心血管方面的作用及在心血管病高危人群中的应用.     

山葡萄多酚对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护作用

目的 观察山葡萄多酚(PVAR)对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护作用.方法 结扎Wistar大鼠冠状动脉30min再灌注20min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)和SOD活性,膜磷脂及MDA含量.结果 与模型组比较,PVAR(200,400mg/kg )组SDH,CCO,SOD活性明显升高(P＜0.05),膜磷脂含量增加(P＜0.05),MDA含量降低(P＜0.05).结论 PVAR对缺血再灌注损伤的心肌线粒体功能具有保护作用.