扩增引进限制性酶切位点技术检测CYP2C9基因的多态性

建立了一种简便、快速、准确的检测CYP2C9基因Arg144Cys位点和Ile359Leu位点多态性的新方法.该方法采用与模板具有1个碱基错配的引物通过PCR在扩增产物中引进限制性酶切位点,即扩增引进限制性酶切位点(amp lification-created restriction sites,ACRS),其中通过上游引物在扩增Arg144Cys位点的片断中引入AvaⅡ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*2的PCR产物中分别含有2个和1个AvaⅡ切点;通过下游引物在扩增Ile359Leu位点的片断中引入MvaⅠ切点,使得野生型基因CYP2C9*1和突变型基因CYP2C9*3的PCR产物中分别含有1个和2个MvaⅠ切点.将来自Arg144Cys位点和Ile359Leu位点的PCR产物各取一份测序,表明错配碱基成功引入PCR产物中.将包含Arg144Cys位点的PCR产物用AvaⅡ消化,将包含Ile359Leu位点的PCR产物用MvaⅠ消化,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染进行基因分型.由于野生型基因和突变型基因的PCR产物中都至少含有1个酶切位点,能完全避免因限制性核酸内切酶失活或酶切不完全而导致的基因分型错误.     

CRISPR/Cas工具的开发和应用

CRISPR/Cas系统是细菌、古菌抵抗外源DNA或RNA入侵的免疫系统,细菌和古菌通过crRNA和Cas蛋白识别靶标DNA或RNA,并切割这些外源入侵核酸.目前, CRISPR/Cas系统已广泛应用于基因编辑领域,多种Cas蛋白的发现扩宽了CRISPR/Cas编辑基因的范围.如Cas9和Cas12可在基因组上靶向插入或删除DNA序列; Cas13和RCas9可靶向切割RNA.另外,多种Cas衍生工具的开发让CRISPR/Cas系统发挥更多的功能.如基因编辑方面,通过base editor可进行DNA单碱基编辑,通过prime editor可进行DNA单碱基编辑和小片段插入缺失;如基因表达调控方面,通过CRISPRa和CRISPRi可以激活或抑制基因RNA表达.同时, CRISPR/Cas系统还广泛应用于功能基因遗传筛选、基因检测、活体成像、细胞谱系示踪等多个领域.随着CRISPR/Cas基因编辑工具的不断开发,将不断促进科学研究进展,并有望通过CRISPR/Cas介导的基因治疗为患者带来福音.     

聚集对餐饮企业经营影响的实证研究

餐饮业与其他城市服务业一样也表现出了在工业和制造业同样的聚集效应.餐饮企业在一定空间的聚集对企业的经营到底有何影响,少有文献对此进行深入的实证研究.本文通过对成都市149家餐饮企业的经营数据进行问卷调查和统计分析得出结论:聚集虽然能够提高大多数餐饮企业的租金水平,延长其经营时间,但是对企业的经营档次和规模并没有显著的影响.这一结论可为餐饮企业的选址决策提供理论和决策的指导.     

基于CCD的智能车控制策略研究

本文提出了一种使用面阵CCD进行赛道参数检测的方法,系统以MC9S12单片机为主控制器,实现了对CCD输出的黑白视频信号的实时采集处理,通过边沿提取算法获得路径信息,并给出对舵机和驱动电机的控制策略,使得智能车行驶快速流畅。     

国内资讯·企业信息

<正>1.5月24,兖州煤业发布公告称,拟与兖矿集团、陕西延长石油集团共同出资设立陕西未来能源化工有限公司。三方已于2011年1月24日签署了《合资合同》。2.5月26日,河南粮食产业投资担保有限公司、河南省畜牧业投资担保有限公司和河南汇财投资担保有限公司成立。3.5月27日,上海圣华物流股份有限公司在上海股交中心E版正式挂牌,成为上海嘉定区首家在上海股交中心E版成功挂牌的民营企     

浅析水工金属结构的防腐处理

<正>水库工程和大型渠道上,常见的金属结构长期曝晒、阴暗潮湿、干潮交替、常蚀水下、高速水流的冲刷、水生物的腐蚀、泥沙、冰凌及其它漂浮物的冲磨等恶劣环境下工作,极易     

陕北地区三叠系延长组长10段油藏原油特征及其来源

在陕北地区三叠系延长组与侏罗系延安组原油特征分析的基础上,对原油的类型进行了划分,重点对长10段原油的来源进行了分析。长10段油藏的原油具有低密度、低粘度和高含蜡的特征,族组分相对含量由高到低的顺序为饱和烃、芳香烃与非烃+沥青质,与其它层段原油特征明显不同。根据甾、萜烷生标物组成特征,陕北地区中生界原油可分为A和B两种类型,其中,B类原油为长10段原油,A类原油为其它层段原油。A类原油的17α(H)-重排藿烷<17α(H),21β(H)-30-降藿烷<17α(H),21β(H)-藿烷,并且17α(H)-重排藿烷的含量很低,Ts和Tm接近,三环萜类含量较低,主要来自长7段油页岩;B类原油的17α(H)-重排藿烷含量相对较高,有时可超过17α(H),21β(H)-30-降藿烷,Ts比Tm的含量高很多,三环萜类含量相对较高,与长9段烃源岩亲缘关系较近,长10段暗色泥岩也应有一定贡献。     

美国在阿富汗：打不赢，跑不了

在美国及全世界纪念9．11死难者的时候，塔利班针锋相对地发动特大规模袭击，旨在彰显自身实力，刺激美国国内反战情绪，给奥巴马施加更大的撤军压力，向美国挑战的意味非常明显。     

Aquaporin1～9 mRNA在成人大肠黏膜中的表达

明确Aquaporin基因各亚型(aqps)mRNA在成人大肠黏膜的表达,探讨aqps 在正常大肠生理中的作用.以RT-PCR方法分别检测左半结肠、右半结肠黏膜各10例标本中1～9共9个亚型mRNA的表达情况.结果示aqp6在左、右半结肠均未见有表达,1、2、3、4、5、7、8、9mRNA在左右半结肠黏膜均有表达,aqp9在左半结肠表达更丰富.结论:成人大肠黏膜中多种水通道蛋白的表达提示aqps尤其aqp9与大肠的水分吸收、黏液分泌等有密切关系.     

富县地区延长组原油地球化学特征

通过对原油样品的族组成、饱和烃色谱、质谱分析,详细描述了鄂尔多斯盆地南部富县地区延长组主要含油层长6段和长2段原油地球化学特征,进行了油—油对比研究。研究结果表明,富县地区延长组长6段和长2段含油层原油地球化学特征基本相近,原油为成熟石蜡型原油,有机母质来源于细菌和藻类,形成还原陆相淡水湖泊环境,应来源于本区延长组长7段烃源岩。