蛋白质组技术的研究进展

基因组学的研究已从结构基因组学转移到功能基因组学上来。以大规模分析蛋白质作为其主要内容的蛋白质组是功能基因组学研究的一个主要内容。综述了蛋白质组研究所使用的主要技术，包括：二维凝胶电泳技术、质谱技术、蛋白质芯片技术、蛋白质复合物纯化技术、酵母双杂交技术、嗜菌体显示技术。     

酵母双杂交技术的发展

自酵母双杂交系统创建以来，已经成为研究蛋白质相互作用的重要手段，被广泛用于各个生物学研究领域，揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用。近年，在经典的酵母双杂交系统基础上，针对其局限性，相继提出许多新的研究方法，如：双（多）筛选法，SOS富集系统，哺乳动物细胞双杂交系统，三杂交系统，单杂交系统，逆向双杂交系统，等等。本将对上述方法进行详细叙述。酵母双杂交及其衍生系统已经成功地运用于蛋白质之间，蛋白质与DNA、PNA、配体之间的相互作用的研究。     

里氏木霉和酵母菌混合发酵玉米秸杆的研究

对里氏木霉和酵母菌混合发酵秸杆提高其粗蛋白含量的发酵工艺进行了研究。结果表明其发酵最优工艺条件 :以尿素作为氮源 ,里氏木霉接种 2 4 h后接种假丝酵母 ,接种量比例为 1∶ 4 (酵母∶里氏木霉 ) ,于 p H3.0 ,30℃下培养 4 d。粗蛋白含量可达 30 .5 5 % ,粗纤维转化率可达 33.5 %。     

抗菌肽AD基因的改造及在毕赤酵母中的表达

采用PCR技术改造抗菌肽AD基因，将其C末端改造为Asn编码，改造后的抗菌肽Cecropin AD基因克隆到pPICZα－A载体上，构建成酵母重组分泌型表达载体，转化毕赤酵母（Pichia pastoris)受体菌GS115中，采用zerocin抗性标记筛选重组转化子，经摇瓶发酵，浓缩发酵液进行酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和抑菌活性检测。结果表明，改造后的Cecropin AD基因在毕赤酵母中获得了表达，表达产物经α－Factor信号肽引导分泌到胞外，具有较强的杀菌活性。     

酵母系统用于外源蛋白的商业性生产

酵母是进行外源蛋白生产的很有吸引力的寄主。与原核系统不同,酵母具有真核亚细胞组织,能完成译后的各种折叠、加工和修饰过程,通过这些过程才能产生出“真实的”、有生物活性的哺乳动物蛋白。另外,它们还具有单细胞微生物的生长快速和遗传操作简便的优点。酵母表达工作的极大部分集中在已经充分研究过的酿酒酵母(Sacharomyes cerevisae)上。然而,随着DNA转化技术的发展,越来越多的非酿酒酵母正在成为生产重组多肽的宿主,其中包括:多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)、乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、西方许旺酵母(Schwanniomyces Occidentalis)和解脂亚罗酵母(Yarrowia lipolytica)。本文将综述以上替代酿酒酵母的酵母表达系统的性能,并讨论其优缺点。     

人αB干扰素基因在PGK1启动子和α因子前导序列控制下在酵母中的表达和分泌

借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.     

GYR和GYP对酵母发酵液中RNA和蛋白质的影响

测定酵母发酵液中核糖核酸和蛋白质的含量表明，在ＧＹＲ培养基中的发酵液核糖核酸的蛋白质的含量比在ＧＹＰ发酵液中的含量高，且随着培养天数的延长而逐渐增多，培养４ｄ后，ＧＹＲ中发酵液的核糖核酸和蛋白质含量分别是ＧＹＰ含量的３．７３倍和１．５３倍，这说明两种不同培养基对酵母发酵液中的核糖核酸和蛋白质有明显的影响。     

克鲁维酵母y—85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试

克鲁维酵母（Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶，其细胞和胞外和炙粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的７６％和２４％，试验中以酶发液酶液，该酶的Ｓ／Ｉ值为１５．２酶液在５０，５５与６０℃下保温１ｈ，活力分别残留１００％，９６％和６５％，在８℃下放置７ｄ１４ｄ酶活力分别残留９８％和９６％，在ｐＨ３．６～７．０内，酶活性十发稳定，５ｍｍｏｌＬ－半胱氨酸和Ｆｅ＾＋２分别可使     

间歇发酵过程动力学模型参数估计的Fuzzy方法

提出一种间歇发酵动力学参数估计的Ｆｕｚｚｙ方法，并以锌酵母发酵过程为例，运用本文提出的方法，对动力学模型参数进行了估计，获得了满意的结果。     

固定化酵母制备枣酒的条件探讨

本文主要介绍在枣酒酿制中,利用固定化细胞技术,以海藻酸钙为包埋剂,通过添如吐温、甾醇、油酸、棕搁酸提高酵母活性,加快发酵速度,缩短发酵周期。如果胶粒再用明胶与戊二醛交联,可提高胶粒的机械强度,使细胞泄漏减少。连续使用五次,胶粒无开裂现象。