vMIP-II肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达

目的 :构建病毒趋化因子 (vMIP -II)基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP -II重组肽 .方法 :用PCR法获得vMIP -II基因片断 ,将其插入表达载体pQE ,构建重组表达载体pEh -vMIP .表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5α ,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆 .结果 :阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP -II重组肽 ,蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符 (约 8× 10 3)的诱导表达条带 ,其表达量约占菌体总蛋白的 2 0 % .分析表明 ,vMIP -II重组肽主要以可溶性形式表达 .结论 :用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量vMIP -II的成功 ,为进一步研究vMIP -II的功能及应用奠定基础 ,也为同类小分子、易降解的肽类物提供基因工程表达方法     

亲环素A抗原表位在三维结构中的初步定位

以抗人亲环素A单克隆抗体D4作捕获抗体，用噬菌体展示库鉴定出亲环素A模拟抗原表位的氨基酸序列为WSLQSFL，在亲环素A的一级结构中没有相同的序列，提示亲环素A抗原表位为构象型的，亲环素A的三维空间结构已测定，利用RasMol等蛋白质三维结构观察软件，可以初步确定亲环素A的抗原表位的时间位置，此抗原表位与环孢素的结合位点有重叠。     

酶介导肽键形成的最佳化

早在1898年,J.H.van't Hoff提出通过逆转质量作用,酶促肽合成应该是可能的.1938年,贝格曼(Bergman)和弗伦克尔康拉特(Fraenkel Conrat)首次用蛋白酶催化合成了所限定的肽.酶介导肽合成法与常规的方法相比有几项改进,如没有消旋作用、底     

亚临床甲状腺功能减退患者TSH与B型尿钠肽原水平的相关性研究——以天水市秦州区人民医院病案为例

目的:探讨亚临床甲状腺功能减退(甲减)患者血清促甲状腺激素(TSH)水平与B型利钠肽原水平的关系.方法:回顾分析本院心内科住院患者96例,空腹测定肝功、心肌酶谱、甲状腺功能和B型利钠肽原水平等指标,TT4、TT3、FT4、FT3浓度数值均在正常范围内.根据TSH水平在0.55TSH4.78 um/L范围为甲功正常组;以血清TSH浓度在TSH≥4.78 um/L范围为亚临床甲减为观察组,并进行统计比较和相关分析研究.结果:正常组和观察组在男女性中分别发病和血脂、心肌酶方面有显著性差异(P0.01);两组之间游离甲状腺素原(FT4)和B型尿钠肽水平之间有显著性差异(P0.05);正常组TSH水平与甲状腺功能和B型尿钠肽水平无相关性,观察组TSH水平与TT4、TT3、FT4之间呈负相关(相关系数,γ=-0.758,-0.637,-0.781,P=0.00);与B型尿钠肽水平也无相关性(相关系数,γ=0.005,P0.05).结论:亚甲减患者出现血脂、心肌酶和B型尿钠肽原的改变,并没有通过TSH甲状腺激素调节轴改变心功能指标B型尿钠肽原水平的高低.通过甲状腺激素水平来调节心肌代谢活动,未发现内分泌性腺轴对心脏内分泌的影响.     

新型TRK激酶小分子抑制剂的筛选与验证

原肌球蛋白相关激酶(Tropomyosin-Related Kinase,TRK)属于受体酪氨酸激酶家族,具有调节细胞增殖、分化、凋亡、代谢等作用.在多种肿瘤细胞中发现TRK激酶编码基因NTRK的融合现象,TRK蛋白过表达或激酶活性组成性激活促进了肿瘤的发生发展.以TRK激酶为靶标的小分子抑制剂正处于研发之中,如Entrectinib等.本研究以Entrectinib为阳性对照,从小分子化合物库中筛选得到Crizotinib、LY2874455等7个新颖的TRK激酶小分子抑制剂,结构计算提示Dovitinib等4个化合物均属于ATP竞争性抑制剂.在NTRK1基因融合的KM12细胞体外增殖实验中,全部的TRK激酶抑制剂均能抑制细胞增殖,且LY2874455最为显著.在细胞的联合用药实验中,发现Crizotinib与Entrectinib的联用具有协同作用.     

CsPbBr3/C8-BTBT复合薄膜的制备和光学性能研究

文章采用热注入法制备CsPbBr3量子点,使用X射线衍射仪(X-ray diffraction,XRD)分析量子点的晶相结构,通过吸收光谱和循环伏安法表征量子点的能带结构。实验制备的量子点禁带宽度为2.52eV,半峰宽仅为25nm,可与小分子有机半导体C8-BTBT共同溶解于有机溶剂中,形成稳定的胶体分散体系。通过滴注和浸渍提拉法制备了CsPbBr3/C8-BTBT复合薄膜,分别采用365nm的紫外光和470nm的蓝光LED作为激发光源,表征了量子点薄膜及复合薄膜的光致发光性能。实验结果表明,纯CsPbBr3量子点薄膜的转换效率可达90%,以有机半导体C8-BTBT作为复合基质的薄膜在紫外光激发下光致转换效率提高了44%。     

细胞选择性穿膜肽的穿膜效果研究

细胞穿膜肽是一类能够穿透细胞膜并且不损坏细胞膜结构的小分子多肽,该多肽一般由不多于30个氨基酸组成.针对FITC标记的具有肺癌或肝癌细胞选择性的两种穿膜肽,设置不同浓度梯度,分别处理多种肿瘤细胞,荧光显微镜下观察不同作用浓度下细胞中绿色荧光的强弱,并通过流式细胞仪检测含有荧光的细胞数.结果表明:两种细胞穿膜肽具有不同的细胞选择性. CPP33在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于50%,CPP44在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于60%.并且随着作用浓度的增加,两种细胞中含有荧光的细胞数不断上升.因此这种针对肿瘤细胞的选择性穿膜肽可能为小分子药物在体内的精确递送提供一种新的方法.     

金黄色葡萄球菌核酸酶去C—末端肽段在E.co…

报道了７个金黄色葡萄球菌核酸酶（ＳＮａｓｅ）Ｃ－末端缺失变体在Ｅ．ｃｏｌｉ细胞中的高效表达，其表达量可卤细胞总蛋白量的１６．９０％～５７．７％。即使仅由５２个残基组成的小肽段，也能在细胞中稳定积累，然而，ＳＮａｓｅ的Ｃ－末端缺失明显地影响到肽段的分泌表达水平乃至越膜分泌，实验指出，７个肽段都能同抗ＳＮａｓｅ多克隆抗体呈特异性免疫反应，较长的肽段仍保留着不同程度为ＳＮａｓｅ的催化活性。     

中国：尿中提取物治疗肿瘤

中国自古就有童子尿治病的方法，如今，一种用尿中提取物治疗肿瘤的抗癌新药——尿多酸肽注射液在安徽问世。此项成果日前已得到国家食品药品监督管理局批准上市。