叶片山海绵水溶性活性产物的大孔吸附树脂分离及其抗肿瘤活性

海绵拥有丰富的生物活性产物,以叶片山海绵(Mycale phyllophila)为材料,建立了以DA201-C大孔吸附树脂为核心的从水提液中提取活性产物的方法.以Lowry法跟踪得率,此方法对小分子肽类的回收率约为57%;粗提物的主要成分为肽类,约占89%.细胞活性检测表明粗提物对C6神经胶质瘤细胞、A2780-CP卵巢癌顺铂耐药细胞和HepG2肝癌细胞具有明显的抑制作用.本工作为深入研究叶片山海绵水溶性活性产物中的抗肿瘤组分奠定了基础.     

绘制人类代谢组图

1998年，当“代谢组学”（metabolomics）这一新术语出现时，并没有引起研究者的广泛注意。然而最近，在分析化学研究的支持下，这一领域（“代谢组学”）——侧重于细胞、组织或生物体中整套的小分子代谢物——明确了新的定位：2008年有500余篇论文提到“代谢组学”一词。随着光谱数据、浓度、化学结构及更多信息大量增长．     

应用RNAⅢ抑制肽防治大鼠皮下内植物葡萄球菌感染的实验研究

研究RIP防治内植物葡萄球菌感染的效果,将32只Wistar大鼠随机分为空白组、RIP组、左氧氟沙星组(左氧组)、左氧氟沙星+RIP组(联合组).将在金葡菌菌液浸泡过的涤纶材料植入到大鼠皮下囊内,观察各组动物的生命体征和存活情况.7 d后处死各组存活动物,取出内植物,对其表面附着的细菌进行计数分析.术后7 d,空白材料表面有大量细菌存活,并形成生物被膜;而RIP组和左氧组涤纶表面细菌明显低于对照组,结果有显著性差异(P＜0.01);但RIP组和左氧组之间无差别;联合用药组只检测出极少量细菌,明显低于其余三组(P＜0.001).说明RIP与抗生素联用可有效降低模型动物的死亡率,抑制金葡菌引起的内植物感染.     

胸导管结扎对胰淀肽沉积及胰岛激素和糖代谢的影响

采用腹部结扎大鼠胸导管,建立胰淋巴瘀滞动物模型,观察实验动物胰组织结构的变化和胰淀肽沉积情况,探讨胰淋巴瘀滞对胰岛激素和糖代谢的影响.30只10月龄SD大鼠随机分为实验组和对照组;造模后6个月取胰组织标本,经石蜡包埋和切片,常规HE和刚果红染色,冰冻切片胰淀肽免疫组织化学染色后光镜观察;在胸导管结扎前、后及实验动物处死前,分别取静脉血测血糖、胰岛素和C-肽.结果显示:1)实验组动物胰组织切片的HE和刚果红染色光镜观察显示,胰腺小叶和胰岛的组织间隙明显增宽,而且胰岛普遍表现为朱红色刚果红着色现象;2)胰淀肽免疫组织化学染色切片的光镜观察表明,在实验组动物的胰岛及其周围,普遍呈现胰淀肽免疫反应强阳性棕褐色着色反应;3)实验组大鼠术后血糖明显升高,血清胰岛素水平下降,与对照组相比差异显著,然而C-肽水平的变化不明显.胰组织结构的变化提示,结扎胸导管可导致胰淋巴引流障碍、胰腺内脂肪堆积、胰岛及其周围胰淀肽沉积、胰岛细胞功能受损、血中胰岛素浓度下降和血糖水平升高.     

高效毛细管电泳同时分离6种酪啡肽

采用毛细管电泳紫外检测法分离检测6种酪啡肽,详细考察样品的最大吸收波长,缓冲液的类型、pH值、浓度,分离电压,进样时间等对样品分离和检测的影响.在最优化条件下,以pH=11.0,30mmol·L(-1)的磷酸盐缓冲液,成功地分离并测定6种酪啡肽.6个样品可以在9min内得到较好分离,样品检测限为0.34～1.09μmo...     

棉花抗逆性状表达调控相关的小分子RNA功能分析及利用

棉花是我国重要的经济作物和纺织工业原料,但是我国有1／3以上的棉花需要进口,为了保证棉花供应主体上依靠自给,确保粮食安全的前提下,必须利用干旱一半干旱地区、盐碱地等耕地资源,在不适于粮食种植的地区扩大棉花生产。由此,获得棉花优良基因,培育耐旱、     

表达长喙田菁SrPCS4烟草的获得及Cd抗性研究

植物螯合肽(phytochelatins,PCs)在植物解除重金属的毒性方面具有重要作用,是以谷胱甘肽为底物,在植物螯肽合成酶(phytochelatin synthase,PCS)催化下合成的.作者已经克隆得到的长喙田菁(Sesba-nia rostrata)植物螯合肽合成酶SrPCS4 cDNA长为1035 bp,其ORF编码177个氨基酸,以pHANNIBAL及pART27为基础,构建了CaMV35S启动子驱动的SrPCS4基因植物表达载体pAM25,采用电击转化方法将pAM25导入根癌农杆菌EHA105,并通过改良叶盘转化方法用该菌株对烟草进行了转化,对转基因烟草进行了PCR与northern-blot检测,研究结果表明得到了表达该基因的烟草,但表达该基因的烟草不能够提高对Cd的抗性.     

人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达

为大量获取人胰高血糖素样肽-1,利用基因串联的方法构建了人胰高血糖素样肽-1的一组串联体.将化学合成的人胰高血糖素样肽-1（human glucagon like peptide-1, hGLP-1）cDNA基因插入质粒载体pET-32a(⁺)中,构建成硫氧还蛋白（thioredoxin）及六聚组氨酸（hexahistidine）与rhGLP-1的融合表达载体pET32-GLP-1.在此基础上将该融合基因序列进行同向串联,获得二串和三串的表达载体pET32-GLP-1-2 和pET32-GLP-1-3.将该三种表达载体转化大肠杆菌BLR(DE3)后获得相应的基因工程菌.结果表明：三种基因工程菌经发酵和IPTG诱导后均正确表达目的蛋白,目的蛋白表达量随着基因串数的增加而得到一定提高,重组蛋白经分离纯化后进行生物学活性测试具有明显的降低血糖浓度作用.     

丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸三肽吸附低密度脂蛋白的机理的探讨

以聚丙烯酰胺(PAM)微球为载体,丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸(SDE)三肽为配体,通过两种方法将配体偶联到载体上制成吸附剂。采用体外静态吸附法检测吸附剂的吸附效果,考察SDE三肽仿生吸附剂对低密度脂蛋白(LDL)的吸附并探讨其机理。结果表明:两种方法制备的吸附剂对LDL都有一定的亲和吸附能力,Ca2 可通过桥接LDL所含磷脂极性头部的磷酸基团和吸附微珠配体上的羧基及交联相邻LDL磷脂间的磷酸基团,增大LDL吸附到吸附微珠上的机率,进而提高其吸附率。用戊二醛固定化配体制成的吸附剂因表面含有更多能与LDL相互作用的基团(COOH),更有利于LDL的吸附。     

肽酰转移酶催化肽键形成机理的理论计算研究

蛋白质合成过程关键的一步,由肽酰转移酶参与的肽键形成机理是一个基础的被长期讨论的生物分子学问题．早在三十几年前,就已经知道肽酰转移酶对肽键的合成起至关重要的作用．并且也知道肽酰转移酶是一个大的核蛋白,即包括很多蛋白质和RNA的大分子．但是一直以来科学家都认为,这个反应机理应该和丝氨酸水解酶水解蛋白质一样,是一个基于蛋白质催化的过程．