Tm值差异型不对称PCR方法的建立及其在分子诊断中的应用

多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性(SNP)的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成(5′-端引入错配或加入锁核苷酸(locked nucleic acid,LNA)),使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件(添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序)后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR(Tm difference asymmetric PCR,TDA-PCR)可有效提高单链DNA分子产率,降低引物设计难度,也扩大了模板序列的适用范围.此外,还针对禽流感病毒H5N1的血凝素(haemagglutinin)HA基因保守序列进行不对称扩增,用获得的单链DNA为模板进行焦磷酸测序检测,所得结果与参考序列一致且无明显干扰信号.因此,采用Tm值差异型不对称PCR可使焦磷酸测序等分子诊断流程更为简便,成本更低,效率更高,具有很好的通用性和实用性.     

光致变色分子和AIE单元共掺杂纳米胶束:光控、可逆荧光调变

利用嵌段共聚物聚苯乙烯-b-聚丙烯酸(PS-b-PAA)封装二噻吩乙烯光致变色分子(BTO)和染料分子(ED)制备了纳米胶束BTO@Nm、ED@Nm和BTO-ED@Nm,胶束尺寸分布窄(63~201 nm),在水溶液中具有高度的稳定性和分散性.封装作用诱导ED产生明显的聚集诱导荧光增强效应(AIE),可使ED@Nm和BTO-ED@Nm在500~700 nm范围呈现出明显的荧光.与单体BTO类似,纳米胶束BTO@Nm和BTO-ED@Nm仍然保持从无色(λmax=308 nm)到深蓝色(λ_(max)=595 nm)可逆光致变色性能,且至少可逆转变5次以上抗疲劳性能.利用BTO及其变环体(c-BTO)与ED之间的能量转移作用,在紫外光和可见光的交替照射下,实现对BTO-ED@Nm荧光(565 nm)定量可逆调控,且至少可调控5次以上.     

一种组氨酸修饰的芘类Hg2+荧光探针

〖JP2〗以组氨酸和芘甲酸为原料，设计合成了一种荧光化合物芘甲酰组氨酸甲酯，通过核磁、质谱表征其结构. 荧光测试结果表明，在水溶液中该化合物能够对Hg2+表现出荧光猝灭响应，而相同条件下其他金属离子对该化合物几乎没有类似的荧光识别现象，因此该荧光化合物对Hg2+具有专一荧光识别作用，是一种有效的Hg2+荧光探针.〖JP〗     

超分子化合物{Cd(H_2dtca)(bipy)}的构筑及表征

利用1,3-二(2',4'-二羧酸苯基)苯、2,2'-联吡啶和氧化镉在水热条件下反应制备了一种新型超分子化合物{Cd(H2dtca)(bipy)}[H2dtca=1,3-二(2',4'-二羧酸苯基)苯,bipy=2,2'-联吡啶].通过X-射线单晶衍射测定了化合物的晶体结构,并利用元素分析、红外光谱等技术对其进行表征.结构研究发现该晶体属于单斜晶系P21/n空间群,a=1.604 06(7)nm,b=1.037 30(4)nm,c=1.720 97(7)nm;β=101.803 0(10)°;Z=4,wR1=0.034 2,wR2=0.079 5.晶体结构分析表明2个镉在1个1,3-二(2',4'-二羧酸苯基)苯的连接下形成了一个双核结构,再在氢键作用下,形成3维超分子结构.此外,还研究了配合物的固态荧光性质.     

电子商务环境下的会计报告

分析了电子商务时会计报告内容和时效性的影响,介绍了电子商务环境下的会计报告模式,阐述了事项法实时报告系统的会计处理流程以及实时报告系统的实现方式.     

电火花线切割加工中放电间隙状态的实时检测

通过对电火花放电状态的分析,提出了基于数字电路的电火花线切割(WEDM)放电间隙的实时检测方法。采用对单位时间内放电状态的统计,得到电火花线切割过程中各种状态的概率,为电火花线切割的智能控制提供控制依据。试验表明,该方法能有效检测WEDM加工中放电间隙的状态,为进一步研究WEDM智能加工控制系统提供了可靠的控制依据。     

Negatively and positively charged bacterial aerosol concentration and diversity in natural environments

Bioaerosol charge information is of vital importance for their electrostatic collection. Here, electrostatic means and molecular tools were applied to studying bioaerosol charge dynamics. Positively or negatively charged bioaerosols were collected using an electrostatic sampler operated with a field strength of 1.1 kV cm 1 at a flow rate of 3 L min 1 for 40 min. Those with fewer or no charges bypassing the sampler were also collected using a filter at the downstream of the electrostatic sampler in one environment. The experiments were independently conducted three times in three different environments. The collected bacterial aerosols were cultured directly on agar plates at 26°C, and the colony forming units (CFU) were manually counted. In addition, the CFUs were washed off from the agar plates, and further subjected to polymerase chain reaction (PCR) and denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) for culturable diversity analysis. The results revealed remarkable differences in positively and negatively charged culturable bacterial aerosol concentration and diversity among the studied environments. In the office environment, negatively charged culturable bacterial aerosols appeared to dominate (P = 0.0489), while in outdoor and hotel environments both polarities had similar concentration levels (P = 0.078, P = 0.88, respectively). DGGE patterns for positively charged culturable bacterial aerosols were shown strikingly different from those of negatively charged regardless of the sampling environments. In addition, for each of the environments positively charged culturable bacterial aerosols collected were found to have more band pattern similarity with those positively charged for respective regions of agar plates than those negatively charged, and vice versa. The information developed here is useful for developing efficient electrostatic sampling protocols for bioaerosols.     

RTK技术在大比例尺地形图控制测量中的应用

随着社会经济的发展,人们的生活水平不断提高,各个城市、乡镇等对大比例尺地形图的需求日益增加,这就要求测绘科学技术能够很好的运用到大比例尺地形图中,按照准确、逼真、清晰的原则,保证成图的质量。本文就介绍了全球定位系统实时动态测量（RTK）技术在大比例尺地形图控制测量中的应用,因其精度高、实时性和高效性,使其在大比例尺地形图测绘中的应用越来越广。     

地震观测中的Cacti开源软件应用

近年来,随着地震观测技术迅速发展,地震台站数据的网络信息化管理成为地震观测体系的重中之重。如何实现对网络和服务器性能的实时监测、切实保障网络服务质量？上海地震局通过Cacti开源软件对地震观测数据进行实时、图形化监测的实践经验,或将为人们带来一些启发。     

二氧化硅荧光纳米颗粒的性质及应用

二氧化硅壳核型荧光纳米颗粒有良好的水溶性,易于制备、分离和表面修饰,具有无法比拟的特性,己经在生物分析的很多领域得到了广泛的应用,具有广泛的应用前景。