通过部分水解法制备聚丙烯酰胺多肽固相合成载体

Merrifield在60年代初开创的固相多肽合成法,极大地提高了多肽合成的效率。固相法常用的载体为低交联聚苯乙烯,该载体合成容易、价廉、机械性能好和易功能基化。但由于聚苯乙烯骨架与多肽链相溶性不良,因而某些多肽合成采用聚苯乙烯载体缩合率和产率都较     

人参多肽最低构象能计算分析

本文采用黄金分割法优化初始构象,运行ECEPP/2程序计算得到人参十四肽最低构象能为467.582KJ/mol;根据计算的原子坐标绘制的分子结构图表明最低构象能下的人参十四肽构象由β—折叠肽段及α—螺旋肽段构成.     

纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤组织株K562的…

应用固相多肽合成技术，人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽ＧＲＧＤＳＳ。用高效液相层析进行纯度鉴定，并观察六肽对骨髓瘤细胞株Ｋ５６２的体外抑制作用，实验结果表明，六肽在７２ｈ内对骨髓瘤细胞的抑制率为３１％，多肽的结构对功能有一定的影响，根据竞争抑制原理，设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。     

重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定

人脑钠素(hBNP,humanbrainnatriureticpeptide)是心室分泌的由32个氨基酸组成的多肽激素.临床研究表明,hBNP是治疗充血型心衰竭的一种安全有效的多肽药物.化学合成脑钠素全基因,以pET32a为表达载体,构建了硫氧还蛋白-脑钠素(thioredoxin＿hBNP)融合蛋白表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白的表达量占全菌蛋白量的25%以上.融合蛋白经肠激酶裂解、Zn＿Sepharose亲和层析和C4反相高效液相层析,从每升培养液中可获取4mgrhBNP,纯度达到95%.经质谱测定,rhBNP样品的分子量为3464Da.体外活性测定结果表明,rhBNP样品对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应,其ED50为(2.24±0 58)×10-6mg/mL.     

Immunogenicity of recombinant fowl-pox virus co-expressing structural protein precursor P1-2A and proteinase 3C of FMDV

Two recombinant plasmids, pUTA2P1 and pUTAL3CP1, were constructed by inserting structural protein precursor P1-2A and proteinase 3C of foot-and-mouth disease virus (FMDV) into fowl-pox virus (FPV) recombinant vectors pUTA-2 and pUTA-16-LacZ respectively, and two recombinant FPVs (vUTA2P1 and vUTAL3CP1) screened by the RT-PCR, IFA assay and Western blotting assay were obtained successfully. Mice injected respectively with rFPVs were induced high level specific anti-FMDV antibodies, increasing of T subtypes, and higher cytotoxicities of splenocytes than those of control groups. These results indicated that a new method was used to construct a potential candidate vaccine of FMDV.     

两种盐对质粒DNA提取的影响

随着基因治疗及基因疫苗的不断发展,质粒的需求量迅速增加。通过以pcDNA3为目的产物,考察了在其提取过程中硫酸铵和氯化钙的加入对pcDNA3收率的影响和对杂质的去除效果。实验发现:硫酸铵和氯化钙的加入都可以明显降低质粒提取液中蛋白质、RNA杂质的含量;但是氯化钙在降低蛋白质和RNA含量的同时也降低了质粒DNA的收率。硫酸铵是去除蛋白质、RNA杂质的良好试剂,同时能够保持较高的质粒DNA收率。当质粒提取液中硫酸铵浓度加入到2.5M时,质粒的纯化因子可达到10.2,而收率在90%以上。     

艾滋病疫苗试验再败

9月18日．全球公认为最有希望的艾滋病疫苗——Ad5载体疫苗的临床Ⅱb期试验宣告失败。21日，这项试验被叫停，给整个艾滋病疫苗研究领域造成极大震撼。[第一段]     

伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究

本试验研究伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株D1、D2和D3的免疫原性．对4周龄仔猪按不同剂量分别肌注接种D1、D2、D3后,于7、14d后采血：14d后用10^7pFU强毒株PRVFa滴鼻攻毒所有试验猪,攻毒7d后检查PRV在猪体内器官的分布．基因缺失毒株接种后试验组仔猪体温略有升高,接种部位未发生炎性反应,不向外散毒．PRVFa攻毒后试验组的仔猪体温稍有升高但不超过40℃,对照接毒组连续4d均超过40℃、有1头出现明显神经症状并死亡．强毒攻毒后,各剂量免疫组散毒均为2～3d,而对照组、同居猪散毒均为5d．对照组10个器官组织（大脑、小脑、三叉神经、心、肺、肝、肾、淋巴结、脾和扁桃体）均检测出PRV;D1组除大脑、小脑、肺脏外均检测出PRV;D2、D3组除大脑、小脑外,其它均检出PRV．免疫组的保护率均为100％,对照组为75％．试验结果表明D1、D2和D3能对接种猪提供充分的保护;攻毒后疫苗接种猪都向外排毒,但散毒天数均远低于对照组且未从同居感染猪中分离出病毒;D1、D2和D3是具有高度免疫原性且接种安全的基因缺失疫苗株．