钙调素对植物热激转录因子的DNA结合活性的影响

热刺激能诱导植物热激转录因子（HSF）与热激元件（HSAE）在体外结合。在玉米幼苗全细胞提取液中加入钙调素（CaM)抗血清，抑制热诱导的HSF的DNA结合活性，而向此提取液中回加CaM则可恢复HSF的DNA结合能力。另外，在非热激条件下，直接加入CaM也可诱导HSF与HSE在体外结合，而BSA无此作用，以小麦和番茄为材料也得到相似的结果，该实验提供了CaM调节HSF活性的直接证据。     

转基因动物研究进展及应用

阐述了转基因动物的研究进展，分析了存在的问题，并介绍了其应用价值，最后对其前景予以展望。     

亮氨酸拉链结构蛋白在大肠杆菌重组子中的表达

酵母转录因子GCN4是通过亮氨酸拉链(bZIP)结构结合DNA的蛋白质之一，当GCN4二聚体与DNA结合时，亮氨酸拉链区的2个单体结合为平行的卷曲螺旋结构，而其基区由无规线团结构变为α螺旋．为探讨亮氨酸拉链蛋白与DNA的结合机理，设计了含有GCN4亮氨酸拉链蛋白基区结合DNA的必需氨基酸的折叠片段，并将其克隆到Escherichia coli BL21，讨论了此亮氨酸拉链蛋白的表达条件．在蛋白质的小量表达试验中，重组子Escherichia coli BL21于5mL含有50μg／mL氨节青霉素和34μg／mL氯霉素的LB液体培养基中培养至对数期，加入不同浓度的IPTG，继续培养以诱导蛋白质的表达，在不同的时间(如：诱导前，诱导2，4，6，8h)取样100μL到1．5mL离心管中、离心收集沉淀，将沉淀悬浮于样品缓冲液中，用10％SDS-PAGE检测；在10L含氨苄青霉素和氯霉素的LB液体培养基中进行了大量表达，根据小量表达的试验结果确定了IPTG的浓度和诱导时间．结果表明：含有这种拉链蛋白质的重组子Escherichia coli BL21在37℃下小量培养时，0．1-0．8mmol的IPTG均可在2-10h内诱导该蛋白质表达；而大量培养时，0．2mmol和0．4mmol的IPTG在37℃均不可能诱导表达，只在28℃时才表达；小量培养和大量培养的最佳诱导时间为4-6h，诱导剂IPTG的浓度为0．2mmol，大量表达的温度为28℃而不是37℃．     

核纤层蛋白及其基因的研究

核纤层是细胞核内极其重要的结构.近年来有关核纤层蛋白及其基因的研究取得了较大进展.文中就国际上有关该领域研究的新进展并结合作者所在实验室近年来的有关研究结果,从核纤层蛋白成分及功能、核纤层蛋白基因及其起源分化等方面进行了较系统的介绍和探讨,并提出了一些值得深入研究的新问题.     

表达HCV核心蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服免疫小鼠的研究

构建了丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白原核表达质粒pQE-HCV,转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL7207中,SDS-PAGE和Western blot检测到该重组菌能表达3种分子量的HCV核心蛋白.以该重组菌作为口服型活疫苗灌胃接种BALB/c小鼠,检测到小鼠产生的抗HCV核心蛋白IgG及迟发型超敏反应、T细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞反应.结果表明该重组菌能有效诱导免疫应答,尤其能高效诱导细胞免疫应答,这为研制高效免疫、成本低廉、接种方便的HCV疫苗提供了一个新的可行途径.     

髓母细胞瘤中P53、bcl-2及Ki-67的表达及其意义

用免疫组化S P法检测 2 5例髓母细胞瘤中Ki 6 7、P53 及bcl 2基因的表达。结果表明 ,在 2 5例髓母细胞瘤中 ,bcl 2和P53 蛋白的阳性表达率分别为 72 % (18/ 2 5 )和 16 % (4/ 2 5 )。Ki 6 7阳性率平均为 (33.34± 4 .98) % ,其表达与组织学分型有关。说明在髓母细胞瘤中bcl 2蛋白与P53 蛋白可能参与调控细胞的凋亡     

朊蛋白构象变化机制的初步探讨

PrP^c的二级结构发生变化导致部分α－螺旋转变为β－折叠而产生PrP^sc，是导致神经退行性疾病的主要原因。蛋白质多肽链被氧化损伤为自由基，其二级结构发生变化，我们通过量子化学方法b3lyp/6-3lg^**计算出抽氢反应的焓变，以此确定氧化损伤的位点和构象的变化。计算发现，Cα-H键的断裂焓（BDE）较小，易抽氢，且形成的Cα－H自由基导致二面角Φ和Ψ发生明显的变化。这对于解释朊病毒的致病机理和错误折叠很有意义。     

阿尔茨海默氏症研究进展

阿尔茨海默氏症（AD）是因扰老年人的神经系统疾病之一,然而其病因还不十分明确.最近一些与AD相关的致病因素的确定使我们对AD的发病机理、诊断、治疗提供了新线索.     

生物技术在水产食品加工上之应用--利用生物技术生产鱼肉蛋白降解抑制剂

鲭鱼 (Scomberaustralasicus)、鳕鱼 (Merlucciusproductus)、鲑鱼 (Oncorhynchusketa)、大西洋产鳕鱼或比目鱼等鱼浆在冷冻贮藏过程中极易因CathepsinsB、H、I等之残存而造成品质下降 ,而且于制造鱼浆加工品时 ,常会在加热过程发生鱼浆解胶 (thermaldegradation)之品质劣变问题 .由过去之研究结果显示 ,CathepsinB、L等硫氢蛋白酶均会影响鱼浆蛋白的冷冻安定性及热凝胶特性 .由于从农、畜、水产原料中分离与制备蛋白酶抑制剂极不经济 ,且产量也受限 ,因此 ,本研究室将鸡肺的cystatincDNA序列利用pET - 2 3a(+)表现载体表现 ,并转送到大肠杆菌AD4 94 (DE3)pLysS细胞内 ,经由isopropyl- β -D -thiogalactopyranoside(IPTG)诱导 ,可在大肠杆菌细胞质内表现出高量具有正确蛋白分子内双硫键及活性之recombinantcystatin .基于安全及工业上量产之考量 ,本研究室亦将此cystatin的cDNA序列 ,接到PGAPZαC表现载体上并将此载体转送入酵母菌PichiapastorisX - 33细胞中 ,令cystatincDNA整合到此酵母菌核内之染色体DNA上 ,经由此载体上之GAPpromoter的调控及α -factorprepros equence之引导可以于培养液中大量的表现出具有正确蛋白结构及活性之胞外分泌型recombinantcystatin .以上两蛋白质均经由分离纯化及生化     

甜蛋白Monellin在巴斯德毕赤氏酵母中的胞内表达

将PCR扩增得到的Monellin基因片段插入Pichia pastoris胞内表达质粒Ppic3.5k‘，然后转入Pichia pastoris SMD 1168受体菌中，用G418筛选高拷贝菌株，并进一步对其进行PCR鉴定，获得的阳性克隆菌株经甲醇诱导60h，SDS-PAGE结果显示菌株破壁液中含有表达的Monellin，其大小约为11ku，并具有甜度。