利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞

采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用。选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96—104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞。选取正常志愿者外周血单核细胞,筛选其中HLA-A2+者,利用HLA-A2/survivin短肽有效诱导特异性细胞毒性T细胞。Pentamer实验检测特异性细胞毒性T细胞比率。Elispot实验检测细胞毒性T细胞IFN-γ分泌能力。选取胃癌细胞系MKN28、SGC7901及KATO Ⅲ,检测其HLA-A2和survivin表达情况。检测特异性细胞毒性T细胞对三种细胞系的杀伤效果。Pentamer实验结果显示,HLA-A2/survivin短肽刺激之前短肽/HLA Pentamer和CD8双阳性细胞仅为0.06%,接受刺激后双阳性细胞增加到27.5%。Elispot实验结果显示HLA-A2/survivin短肽刺激后IFN-γ分泌细胞比率明显强于阴性对照组。PCR结果显示,KATO Ⅲ为HLA-A2+,MKN28和SGC7901为HLA-A2-。Western Blotting结果显示KATO III和SGC7901为survivin阳性,MKN28为survivin阴性。特异性细胞毒性T细胞杀伤结果显示,细胞能有效杀伤KATO III细胞,但对其他两种细胞杀伤效果不明显。p<0.01。经修饰的survivin短肽能够有效诱导特异性细胞毒性T细胞,并对胃癌细胞系有HLA-A2/survivin限制性杀伤。     

大鼠外周血单个核细胞保存方法研究

通过观察大鼠外周血单个核细胞（PBMCs）的形态,了解不同保存方法和不同保存时期对PBMCs活性和细胞周期分布的影响,建立其短期保存方法．用密度梯度离心法获得大鼠外周血单个核细胞,分别在RPMI1640培养液中4℃保存和冷冻保护剂中－80℃保存,并分别在第1－4天和第7天,14天,21天,28天,35天用台盼蓝染色法测定细胞活力,用流式细胞仪检测细胞周期．结果分离获得的PBMCs成活率为97．69％±1．59％,基本处于G0／G1期．PBMCs置4℃保存4d后,存活率在60．84％±2．75％;置－80℃保存35d后,存活率在78．54％±2．97％,PBMCs基本处于G0／G1期．最后得出－80℃低温保存方法对PBMCs活性和细胞周期检测有一定影响,但其活性率接近80％,是一种简便易行短期保存PBMCs的方法的结论．     

人血淋巴细胞彗星试验检测南京市水源水的遗传毒性

采用人外周血淋巴细胞彗星试验,对N市多个自来水厂水源水中的有机浓集物进行了毒性检测.结果表明,各水样浓集物均能引起不同程度的DNA损伤,与对照组相比均有显著性差异(P<0.05,P<0.01).以每管100mL剂量组进行多重比较发现,不同水厂源水间的遗传毒性存在较大差异,镇级水厂>市级水厂.试验结果与环保部门对各水厂水源水水质检测结果基本一致,证实了彗星试验作为一种简便、快速和灵敏的遗传毒性检测方法可以引入环境监测,能有效检测饮用水源有机浓集物的遗传毒性.     

几种有机锡化合物对小鼠外周血T和B淋巴细胞的影响

从免疫毒理学角度研究了氯化三丁基锡（ＴＢＴＣｌ）、氯化二丁基锡（ＤＢＴＣｌ）和氯化一丁基锡（ＭＢＴＣｌ）对小鼠免疫系统的影响。采用外周血液淋巴细胞酸性α－醋酸萘脂酶（ＡＮＡＥ）检测法和溶血分光光度测定法，对小鼠腹腔注射０．０１～０．１０μｇ／ｋｇＴＢＴＣＬ可增加Ｔ－淋巴细胞数量和诱导抗体的产生。而高于此剂量范围作用７ｄ，各指标则呈现不同程度的下降趋势，０．０１μｇ／ｋｇＤＢＴＣＬ对小鼠免疫系统无明     

慢性乙肝病毒感染者外周血单个核细胞染色体遭受病毒损害的见证

用Ｓｏｕｔｈｅｍ　ｂｌｏｔ分子杂交技术，检测９９例ＨＢＶＭ阳性的慢性ＨＢＶ感染者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）内ＨＢＶＤＮＡ的存在状态，其中７１例同时用ＢｒｄＵ标记法检测细胞中姊妹染色体交换（ＳＣＥ）率，观察ＨＢＶ对宿主单个核细胞染色体的损害情况。结果发现４２例被检者（４２．４２％）的ＰＢＭＣｓ中存在ＨＢＶＤＮＡ（游离型或整合型，有的还见到游离的复制中间体），正常对照组则无１例检出ＨＢＶＤＮＡ。被检者ＰＢＭＣｓ的平均ＳＣＥ率明显高于对照组，其中ＨＢＶＤＮＡ（＋）组又显著高于ＨＢＶＤＮＡ（－）组。证明ＨＢＶ的入侵与ＳＣＥ率升高之间有密切关系，提示ＨＢＶ对单个核细胞染色体形成了损害。这一现象可能是慢性乙肝病毒感染者免疫功能紊乱和ＨＢＶ长期不能清除等系列表现的原因之一。     

PHA对MDS患者中性粒细胞功能的影响

PHA在体外能显著提高MDS患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性及吞墨能力。两者阳性百分率和积分的增加均与PHA的用量呈正相关，表明PHA能促进MDS患者的中性粒细胞进一步分化成熟。     

人参茎叶总皂甙对长春新碱诱发淋巴细胞姊妹染色单体互换的拮抗作用

以人外周血淋巴细胞姊妹染色单体互换（ＳＣＥ）为指标，长春新碱（ＶＣＲ）为阳性对照，探讨人参茎叶总皂甙（ＧＮＳ）对ＶＣＲ诱发人外周血淋巴细胞ＳＣＥ互换的拮抗作用。实验结果表明：ＶＣＲ可使人外周血淋巴细胞ＳＣＥ的互换率增高，并存在着明显的剂量－效应关系．     

丙肝患者PBMC mIL-2R及T细胞亚群检测

为了探讨丙型病毒性肝炎( 丙肝)患者膜白介素- 2 受体( mIL- 2R) 和 T 细胞亚群的表达水平及其在丙肝发病机理中的作用,用生物素- 链霉亲和素法对 203 例抗- HCV 阳性患者外周血单个核细胞进行 T 细胞亚群及植物血凝素( PHA) 诱导前后mIL- 2R 的检测. 总体结果显示丙肝患者外周血单个核细胞( PBMC) mIL- 2R 和 T 细胞亚群表达水平降低,与正常对照组相比,差异显著( P < 0. 01) .其中, 在静息状态和在 PHA 诱导状态,其 mIL- 2R 表达水平与正常对照组相比均低下( P < 0. 01) , 但急慢性丙肝患者中T 细胞亚群及 mIL- 2R 表达水平类似( P > 0. 05) . 急慢性丙肝患者与正常对照组相比,外周血 CD⁺₃ , CD⁺₄ 百分率降低, CD⁺₈ 百分率增高, CD⁺₄ / CD⁺₈ 比值下降( 从 P < 0. 05 降至 P< 0. 01) .说明丙肝患者体内存在明显的细胞免疫功能紊乱, T细胞活化障碍, 并与肝病的慢性化有关.     

烷基酚类化合物对人外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

烷基酚类化合物是一类污染十分广泛 ,且具有诱发某些肿瘤的环境内分泌干扰物 .应用单细胞凝胶电泳技术 ,研究了烷基酚类化合物对人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用 .实验结果表明 ,9种烷基酚类化合物均能引起不同程度的DNA损伤 ,并呈现出剂量效应关系 .其高剂量组与对照组相比 ,均有极显著性差异 (p <0 .0 1) .实验结果亦表明 ,DNA的损伤程度与化学结构有一定的关系