类硫氧还蛋白hTRXLⅠ cDNA的克隆和原核表达

从人18周胎脑中抽提mRNA,建立cDNA文库,通过大规模测序克隆出一条人类基因,该基因全长1644bp,开放阅读框1146bp,编码一个含372个氨基酸的蛋白,预测分子质量约为46.8ku.经与蛋白数据库比较,发现具有人硫氧还蛋白结构,命名为人的类硫氧还蛋白基因Ⅰ(human Thioredoxin like geneⅠ,hTRXLⅠ).多组织膜Northern blot结果显示在心脏、脑、胎盘、肝、骨骼肌、肾、胰腺等各个组织中均有表达,肺中表达不明显.通过Unigene染色体定位,将hTRXLⅠ定位于11q11,把hTRXLⅠ的读框克隆入经改造的PBV220质粒中,在E.coli中诱导后获得表达.     

美发现提高小鼠胰岛素敏感性新法

新华社华盛顿2011年11月14日电,美国研究人员日前报告说,去除实验鼠体内的一种关键调控蛋白,可显著提高其对胰岛素的敏感性。这项研究为糖尿病治疗和药物研发提供了新途径。美国加州大学圣迭戈分校的研究人员在美国《细胞》杂志网站上报告说,他们培育了体内脂肪细胞缺少     

高盐胁迫渗透对SBD2重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的影响

在基因工程的操作中, 包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点. 本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶 (CGTase) 的淀粉粒结合域 (SBD) 基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接 (SBD2) 后, 克隆到大肠杆菌表达载体pTrcHis B上, 得到的pTrcHis B/SBD2质粒转化大肠杆菌Top10, 研究了不同培养基、不同诱导温度和时间对SBD2蛋白表达的影响. 结果表明, 利用相容性溶质山梨醇和甜菜碱等, 在高盐胁迫下, 实现了SBD2重组蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达, 这一结果为在体外研究SBD2蛋白的功能奠定了基础.     

丝素蛋白/聚乙二醇薄膜结构性质和药物释放研究

以溶液浇注法制备丝素蛋白/聚乙二醇(PEG)混合薄膜,利用傅里叶红外光谱(FT-IR)和差示扫描量热(DSC)分析薄膜材料结构的变化及对其力学性能和溶解性的影响,并以罗丹明B为模型药物构建药物缓释体系,分析罗丹明B从混合薄膜中释放的动力学,探讨利用PEG调节丝素蛋白材料的药物释放性能的可能性。结果显示,PEG与丝素蛋白具有良好的相容性,在作为增塑剂的同时引起丝素蛋白由无规卷曲向β-折叠结构的转变,可以在不同程度上调节混合薄膜的力学性能、耐水性和药物缓释性能。随着PEG含量的增加,丝素蛋白/PEG混合薄膜的拉伸强度和断裂延长率先增加后减小,分别于CPEG为10%和20%附近达到最大值,而在水中的溶失率的变化规律与拉伸强度刚好相反,在CPEG为10%附近达到最小值。与纯丝素蛋白薄膜相比,添加PEG极大延缓了药物模型分子罗丹明B的释放。罗丹明B的释放属于非典型Fickian扩散机理,混合薄膜中丝素的silkⅡ结晶和非结晶区域具有不同的药物释放特征,增加PEG添加量造成罗丹明B释放常数k的下降和扩散指数n的增加。     

火球菌复制蛋白A的表达纯化和活性研究

将火球菌(Pyrococcus furiosus)的3个复制蛋白A相关基因pfuRPA41(PF2020),pfuRPA32(PF2018),pfuRPA14(PF2019)克隆到pDEST17质粒,并在E.coli Rosetta(DE3)表达菌株中成功表达,最终通过固定化镍离子亲和层析分别得到纯度较高的三个复制蛋白A相关蛋白,对它们的单链DNA结合活性进行了详细测试.其中单独的pfuRPA41能结合单链DNA,而单独的pfuRPA32以及pfuRPA14不能结合单链DNA;然而pfuRPA32能够促进pfuRPA41的单链DNA结合能力.同时单链DNA长度对pfuRPA41结合单链DNA的能力有显著影响;在一定长度范围内,pfuRPA41结合单链DNA能力与单链DNA长度成正比.     

Balb/C小鼠金属硫蛋白-1 cDNA的克隆及序列分析

以 RNA一步提取法 ,采用 RT-PCR技术成功地将 Balb/ C小鼠金属硫蛋白 -1 c DNA基因片段克隆于质粒 p UC-1 9上 ,并对克隆片段 c DNA进行核苷酸序列测定     

人参液泡膜水孔蛋白基因PgTIP1的克隆和应用

水孔蛋白是一种承担水分跨膜运输的功能性通道蛋白，植物细胞的生长、发育与细胞内的水分状况密切相关。在生长发育过程呈不同水孔蛋白在时空上的特异表达表明，它们参与了植物生理活动的方方面面。     

国外科技期刊亮点

未探明天然气储量北极占全球1／3；培育出可复制人类疾病的荧光猴；SARS蛋白水解酶研究新进展；缺乏特殊基因导致脱发；脂肪细胞分化调节研究。     

benztropine类多巴胺转运蛋白配体的QSAR研究

利用Hansch方法，研究了37种benztropine类化合物diphenylmethoxy部位苯环取代基结构与其活性的定量关系，结果表明：苯环取代基的电性和体积等均是影响该类化合物与多巴胺转运蛋白亲和力的重要因素，所得到的benztropine类化合物diphenylmethoxy部位取代基的综合结构效应，对进一步研究该部位与多巴胺转运蛋白相互作用的电性和立体性质及设计新的多巴胺转运蛋白配体具有指导意义。     

转牛酪蛋白基因(α_(s1)—CaseinB)cDNA花生后代的种子蛋白质及叶片Gus酶活性检测

对花生转牛酪蛋白基因cDNA子二代 ,1 4株种子胚和子叶全蛋白的SDS—PAGE电泳分析表明 ,与对照比较 7株子二代中均有一条新的蛋白质带 ,并在子叶和胚中大量表达 .对 3株子二代及对照花生幼苗叶片的Gus酶活性检测表明 :1株 ( 2 0 1 1 )Gus酶活性较强