Generation of VP5 deficient mutant of infectious bursal disease virus strain HZ2

Infectious bursal disease virus (IBDV) is one of the most significant viral pathogens in chickens[1]. It causes high mortality in young chickens and establishes an immunosuppression state by destroying the precursorsInfectious bursal disease virus (IBDV) …     

水稻白叶枯病菌hrp调节基因hrpG的鉴定及其变异分析

根据水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)hrp基因的序列设计引物,通过PCR方法从水稻白叶枯病菌JXOⅢ和PXO99A菌株中扩增得到核苷酸序列完全一致的hrpG基因.以该基因为探针与JXOⅢ/pUFR034基因组文库中含有hrpX克隆pUHRX245(36.8 kb)的4个亚克隆进行southern blot分子杂交,确定在亚克隆pB1中1.3 kb大小的片段和AE4(3.0 kb)片段中存在hrpG同源序列.测序结果表明,在pB1中有586个碱基序列,在AE4中有206个碱基,共同构成完整的hrpG基因,且与已知的hrpX基因是毗邻的.以同样方法从水稻白叶枯病菌PXO99A菌株的hrp-突变体M16中扩增得到hrpG基因对应位置的同源突变序列.序列分析表明其有意义突变为541位的C→T的突变,从而导致亮氨酸变为苯丙氨酸(Leu→Phe).将hrpG基因和突变序列分别导入突变体M16中,转移结合子M16/hrpG(PXO99A)恢复了其在烟草上的过敏反应和在水稻上的致病性,而突变序列的结合子M16/hrpG(M16)则不能使其恢复功能,从而确定M16是由于单个碱基的突变所引起的功能突变.经过对基因及其产物的比对发现,对于第Ⅱ组hrp调节基因hrpG的变异,种间变化明显高于种内不同致病变种的变化.     

黄曲霉毒素高污染区肝细胞癌P53基因高频率定点突变

用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性（ＰＣＲ＿ＲＦＬＰ）分析技术，对广西黄曲霉毒素高污染２例肝细胞癌（ＨＣＣ）进行分析，检查Ｐ５３基因第７外显子的２４９密码子的突变频率。结果发现３６／５２例ＨＣＣ中２４８密码子有集中的点突变，频率为６９．２％。Ｐ５３基因突变热点与乙型肝炎病毒感染无关。提示黄曲霉毒素Ｂ１是突变热点的主要原因。     

人新型肿瘤坏死因子在E.coli中的高效表达、纯化及诱导凋亡活性

采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因，在153位氨基酸处引入突变，使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中，SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后,hTNF基因获得大量表达，通过Ni金属螯合层析柱亲和层析获得到纯化的hTNF融合蛋白，Western blot结果表明hTNF蛋白可与抗TNF的抗血清知识性发生特异性反应，荧光染色实验检测了hTNF蛋白诱导细胞发生凋亡的活性。     

Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation of the phytopathogenic fungus Penicillium digitatum

Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation （ATMT） system was assessed for conducting insertional mutagenesis in Penicillium digitatum, a major fungal pathogen infecting post-harvest citrus fruits. A transformation efficiency of up to 60 transformants per 106 conidia was achieved by this system. The integration of the hph gene into the fungal genome was verified by polymerase chain reaction （PCR） amplification and sequencing. These transformants tested were also shown to be mitotically stable. Southern blot analysis of 14 randomly selected transformants showed that the hph gene was randomly integrated as single copy into the fungal genome of P. digitatum. Thus, we conclude that ATMT of P. digitatum could be used as an alternatively practical genetic tool for conducting insertional mutagenesis in P. digitatum to study functional genomics.     

慢性粒细胞白血病急变与bcr／abl，p53,p16基因相关性研究

应用RT-PCR、PCR-SSCP方法对33例慢性粒细胞白血病（Chronic myeloid leukemia,CML）进行了bcr/abl,p53,p16基因检测，发现33例CML中32例bcr/abl基因阳性（97.0%）。22例慢性期无p53基因突变，而11例急变组中一例外显子5和一例外显子7发生p53基因突变，且均发生于急粒变组，2例出现p16基因纯合缺失，且均发生在急淋变组，33例CML均未见p16基因突变，结果提示：bcr/abl基因与CML发生有关，而p53基因突变可能与CML急粒变有关，p16纯合缺失可能与CML急淋变有关。     

基因疗法为患者改良病毒

<正>据国外媒体报道,所谓基因疗法,就是利用正常基因填补或替代基因疾病中某些病变或缺失的基因的治疗方法。近年来,英国牛津和美国费城的一些研究人员宣布,他们对因患有罕见基因疾病而影响视力的病人们进行了治疗,成功使他们的视力获得改善。意大利的科学家们也宣布,他们使患有另外两种基因疾病的病人病情得到了减轻。这些研究结果以及web of Science网站上记录的引文统计,都着眼于基因疗法中的一个类别——而它从诞生伊始,就可谓是备受阻挠。     

我国南方少数民族地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症及基因突变研究进展

本文对近年来有关我国西南及华南少数民族地区红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏状况调查及基因突变研究等方面的文献进行整理,为少数民族地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的防治提供理论依据,也为进一步研究该症在各民族之间的分布及基因突变差异作基础。     

白血病的治疗现状

所有的癌症都是在身体里发动战争,而白血病——一般称为血癌——相比之下是其中攻击力最低的了。大部分的恶性肿瘤都与许多基因突变联系在一起,这意味着人们不可能知道,到底是哪个突变导致细胞进入错误途径,从而难以确定治疗所要针对的目标基因。白血病看起来就简单多了:其中一种病,慢性粒细胞性白血病(CML)是由单个基因融合引起的。科学家们开发了针对错误基因的靶向药物伊马替尼,将CML患者5年存活率提高到超过95%。很多急性淋巴细胞白血病(ALL)的患儿也因此受益。尽管如此,但是正如我们在这次的专题中所提到的,新闻中的统计数字掩饰了大部分     

Y染色体遗传学证据支持现代中国人起源于非洲

在包括中国大陆在内的东亚地区出土的人类化石形态上的连续性,一直被认为是支持现代人类多地区起源假说的有力依据,为研究该地区现代人类独立起源的可能性,对来自中国各地的9988例男性随机样本进行了M89,M130和YAP3个Y染色体单倍型的基因分型。这些位于Y染色体非重组区的突变型M89T,M130T和YAP^ 均来自另一Y染色体单倍型M168T,M168是除非洲以外所有现代人及部分非洲人共同具有的一种古老的突变型,在除非洲以外地区没有发现一例个体具有比M168更古老的突变型。在M168突变基础上产生的M89^ ,M130^-和YAP^ 3种Y染色体单倍型在中国人群中的基因频率分别为93．4％,3．7％和2．9％,结果显示近万份样品无一例外具有这3种突变型之一,因此认为Y染色体的证据并不支持独立起源假说。这也是目前支持现代中国人非洲起源假说最新的遗传学证据。