转化脂介导甘蓝转化获得转基因植株

如何将外源基因高效地导人植物原生质体是转化技术中的一个关键问题.除了常用的PEG法和电激法外,由于脂质体(Liposome)在作为植物细胞工程载体时具有人造性、稳定性、广宿主性和超载性等特点,脂质体介导法已越来越为人们所重视。目前,在采用不同方法的基础上,通过脂质体介导已对水稻、芜菁、野胡萝卜、烟草等材料进行了不同基因的转化,得到了令人较为满意的结果。     

避免不可实施组合的正交表存在的充要条件

在有关试验设计的文献中有许多正交表,但当试验者选择正交表时,仍常常会遇到这样的情况:现有的任何一个正交表都含有不合适的水平组合.例如进行某个化学试验,当某些因子水平搭配时(如高温、高压)可能导致爆炸.可是用现成的正交表都避免不了这些组合.这样,如果用现成的正交表来安排试验而不做这些组合的试验时,要造成数据的缺损.当有数据丢失时,则不能发挥正交试验的优越性.因此有必要给出一种灵活构造所需要正交表的方法.文献[1]首先研究了这一问题,给出了避免两个因子水平组合正交表的存在性和构造方法.本文对此作进一步的讨论,给出当具有多个要避免的因子水平组合时正交表存在的充要条件.在两水平因子试验中,分别以-1和1表示诸因子的低高水平.设有n个因子,以大写英文字母表示,并以小写字母加水平上标表示处理组合,另外以(1)表示所有因子都处于低水平的处理组合.例如在2~5设计中,以A,B,C,D,E表示5个因子,而a~1b~(-1)c~(-1)d~(-1)e~1表示因子A,E处于高水平,因子B,C,D处于低水平的处理组合.把要避免的水平组合称作不可实施水平组合.实际中,一般不是所有的n个因子的某一个或几个处理组合不可实施,而可能是其中的某k(k≤n)个因子的特定搭配不可实施,比如F_1,…,F_k的某些水平的搭配构成的组合f_1~(x_1)     

“基因敲除”研究进展

本文概述了基因敲除技术的原理及研究进展,尤其对条件性基因敲除进行了系统性的详细介绍,并简述了其在动物发育和基因表达机制研究中的重要意义.     

基因图的导向

基因图的导向ＢｅｎＨａｒｄｉｎ著梁宪实译许国平校随着世界上第一张牛和猪的基因构造图谱的公布，人们期望性畜育种技术将发生巨大的进展，进入一个崭新的时代。自从１９９４年４月第一阶段交互式基因组数据库进入计算机网络，美国农业研究署的化学家ＣｒａｉｇＷ．Ｂｅ...     

基于并行基因算法的语音识别方法

提出一种基于并行基因算法的孤立字识别时间规正算法，该算法是在［３］的基础上提出，可解决动态时间规划（ＤＴＷ）难以解决的一些问题：①使距离归一化因子Ｍ与实际路径相关；②以自然方式提供多条最佳规划路径；③语音端点检测正确性对识别率的影响得到一定程度的改善。建立了试验数据库，根据试验数据建立了模板距离遵循正态分布的算法性能分析模型。比较了并行基因算法，串行基因算法［３］和动态时间规划算法的性能。试验结果表明：基因算法比动态时间规划能得到更高的识别率，在单ＣＰＵ情形下，虽然并行基因算法的性能比串行基因算法略微提高，但至少可节约三分之一的ＣＰＵ时间     

BYDV CP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性意伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病毒基因（ＢＹＤＶＣＹｇｅｎｅ）的质粒Ｐｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒严ＰＢｌＡｃｔＳＮ导入融合细胞中．经抗性筛选获得抗潮霉素（Ｈｍ）的阳性克隆并再生植株．对再生植株作ＰＣＲ检测表明，ＣＰ基因已整合到转化植株的基因组中并稳定表达．     

非胰岛素依赖型糖尿病与胰岛素基因改变的实验研究

用分子生物学的实验方法对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）进行胰岛素基因检测。从ＮＩＤＤＭ患者外周血的白细胞中提取ＤＮＡ，以胰岛素基因５′－末端上游的某一ＤＮＡ序列为引物，对特定的靶序列进行体外扩增，即ＴａｑＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰＣＲ），将其扩增产物进行电泳分离，在紫外分析仪下观察结果并与正常人对照，发现１６例ＮＩＤＤＭ患者胰岛素基因有所改变，提示此型糖尿病患者的胰岛素基因改变可能与ＮＩＤＤＭ的发生有关。进一步说明遗传因素在此型糖尿病中的作用。     

研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重…

本文将聚ＡＤＰ核糖聚合酶基因１．４ｋｂ部分序列反向插入真核表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ和ｐＳＭＧ中，同时１２位密码子突变的活化ｒａｓ癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－ａｒＴ２４，及ｐＳＭＧ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，上述质粒的构建成功为研究聚ＡＤＰ核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型。     

马铃薯PGBSS—GUS融合基因在块茎中专一性表达的初步研究

从ＧＢＳＳ基因克隆上，酶切得到５上游区１．２ｋｂ的序列，与ＧＵＳ报告基基因融合，构建了ＰＧＢＳＳ１．２表达载体，通过农杆菌介导的方式，将ＰＧＢＳＳ１．２转和马铃薯品种Ｄｅｓｉｒｅｅ，卡那霉素筛选获得抗性再生植和微薯，利用ＰＣＲ特异性扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ的方法证明了融合基因在马铃薯基因组中的整合，Ｘ－Ｇｌｕｅ活体染色表明，微薯切片具有高ＧＵＳ酶活性，而茎段中ＧＵＳ活性相对较低，初     

用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马…

利用马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）复制酶基因３＇端长约６００ｂｐ的ｃＤＮＡ，用缺口平移方法进行＾３２Ｐ同位素标记，制备成ｃＤＮＡ探针，通过核酸斑点杂交，对提纯的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）、病毒ＲＮＡ、ＰＬＲＶ感染的马铃薯汁液，表达ＰＬＲＶ ＣＰ基因的马铃薯叶片及块茎芽进行了检测。结果表明，＾３２Ｐ标记的复制酶基因ｃＤＮＡ探针特异性强、灵敏度高。可测得提纯病毒的最低含量为４０８ｎｇ／ｍｌ，病毒ＲＮＡ最低