突变野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的整合表达

用定向进化的一种新方法,对野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)的α-淀粉酶基因(XAMY)进行PCR体外诱变后获得了一个编码的酶活性提高的突变基因,将其克隆到由rDNA序列介导的酵母整合型表达载体pHBM368上,得到重组质粒pHBM368XA.将pHBM368XA转化酿酒酵母S.cerevisiae INVScⅠ,获得了整合型分泌表达α-淀粉酶的酵母重组菌株XA01.对选择的3个工程菌α-淀粉酶表达的稳定性进行了检测,结果表明在完全培养基中连续培养80代,淀粉酶的酶活性仍然保持稳定.在淀粉酶自身信号肽引导下,胞外分泌效率可达50%.     

激光诱变株啤酒酿造酵母JY2-2的选育及其中试

用He-Ne激光辐照诱变啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XB05,分离抗双乙酰的菌株,通过三角瓶发酵筛选,得到几株优良的菌株,其中菌株JY2-2用500 mL三角瓶装300 mL 12.5°Bx麦芽汁在12℃下发酵8 d,发酵液的发酵度为66%,双乙酰、乙醛和总高级醇的含量分别为0.079 0、7.43和87.22 mg/L.以12°Bx麦芽汁为培养基用500 L发酵罐发酵,发酵7 d发酵液的发酵度为68.8%,双乙酰、乙醛和总高级醇的含量分别为0.034 4、5.12和70.6 mg/L.啤酒口感纯正清爽,突变株JY2-2的主要发酵特性稳定,具有很好的应用前景.     

啤酒酵母原生质体融合株HN31-6的啤酒酿造中试研究

为了考察啤酒酵母融合株HN31-6的啤酒酿造生产性能,以12.5°Bx麦芽汁为培养基,用500 L发酵罐在12℃下发酵,发酵期间每天取样测定发酵液的发酵度和酒精度以及发酵液的双乙酰、乙醛、高级醇和酯类等挥发性物质的含量.结果表明:在上述条件下,发酵14 d,发酵液的发酵度和酒精度分别为69.9%和4.46%;双乙酰和乙醛的含量分别为0.036 4 mg/L和4.53 mg/L;异戊醇、异丁醇和正丙醇的含量分别为46.47、8.34和9.82 mg/L,总高级醇的含量为64.6mg/L;甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯和己酸乙酯的含量分别为0.132、21.92、0.037、2.22和0.293 mg/L,总酯为24.6 mg/L;该菌株的发酵度以及发酵液的酒精、双乙酰、乙醛、总高级醇和一些酯类等的含量均达到国家优质啤酒的标准,啤酒口感良好.该融合株在啤酒酿造生产中具有很好的应用前景.     

低产双乙酰的啤酒酵母菌株ZT21-9-2的筛选及其ILV2基因的分析

为了获得低产双乙酰的菌株,从保藏的啤酒工业酵母菌种中分离甲磺隆(SM)抗性自发突变株,经低温发酵测定发酵液的发酵度和双乙酰等啤酒风味物质的含量,结果得到ZT21-9-2等5株优良的SM抗性株.其中SM抗性株ZT21-9-2用500 L发酵罐发酵8 d,发酵液的发酵度为68.4%,发酵液的双乙酰、总高级醇和乙酸的含量分别为0.036 3、79.53和74.90 mg/L,该菌株具有很好的应用前景.为了探讨致使乙酰乳酸合成酶(ALS)编码基因ILV2突变而使ALS结构改变的关键碱基,为构建低产双乙酰的啤酒酵母工程菌提供依据,作者比较了SM抗性株ZT21-9-2及其亲株EY2-1的ILV2基因的DNA序列,结果发现SM抗性株ZT21-9-2共有6个碱基发生了转换,1个碱基发生了颠换.     

啤酒酵母泥中蛋白质的提取

从啤酒酵母泥中提取有益物质,不仅可以提高啤酒厂的经济效益,而且降低啤酒废酵母的污染负荷。研究了啤酒酵母蛋白的提取工艺,确定了主要工艺路线。实验中采用1 moL/L的Tween20作为表面活性剂和180分钟的超声破碎,啤酒酵母细胞的破壁率达到了68.67%,提取物酵母蛋白的产率为0.106 mg/mL。     

啤酒酵母的通透性对ATP生产活性的影响

利用甲苯、超声波和气流干燥等方法,对用于ＡＴＰ生产的啤酒酵母进行处理,考察了酵母细胞的通透性对其ＡＴＰ生产活性的影响,结果表明,腺苷（Ａｄｏ）转化率低于２０％好气培养细胞（Ａ－细胞）经处理后,转化率提高到３０％－１００％;Ａｄｏ转化率高的氧限制培养细胞（Ｍ－细胞）通透处理后,ＡＴＰ合成反应的时间缩短１－２ｈ。经通透化处理的酵母细胞能更有效地释放胞内物质和表面出较高的乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、己糖激酶（