钝齿棒状杆菌二氢吡啶二羧酸合成酶的初步研究

本工作对钝齿棒状杆菌AS1.542及其产赖氨酸诱变株253(AEC),365-25P-3(AEC,Hosor~-)赖氨酸分枝途径的第一个酶DDP Sase进行初步纯化,研究天门冬系氨基酸对该酶活性的影响,对钝齿棒状杆菌AS1.542的赖氨酸生物合成调节机制进行初步探讨,发现钝齿棒状杆菌AS1.542赖氨酸分枝途径的第一个酶DDP Sase受末端产物赖氨酸的反馈抑制,在诱变株253(AEC),365-25P-3(AEC,Hoser~-)菌中,赖氨酸对DDP Sase的反馈抑制被部分解除,因而有利于产生大量赖氨酸。     

中国人磷酸核糖焦磷酸合成酶-1假基因的克隆与测序

自从第一个假基因被鉴定以后[1] ,有关假基因的性质与发生正在被阐明 .假基因基本上分为两类 :非加工的假基因和被加工的假基因 .被加工的假基因通常与活跃基因序列比较同源性高达 90 %～ 99% ,不含内含子 ,具有ｐｏｌｙ (Ａ)尾巴 ,可以转录 ,但由于在它们内部有许多终止子、插     

转基因番茄的研究现状及其产业化

正番茄(Solanum lycopersicum)是一种世界性蔬菜,在蔬菜生产中占有举足轻重的地位,也是基础生物学研究中的重要对象和模式植物,在所有蔬菜作物中番茄的研究文献居于首位。由于番茄研究深入,而且易于转化,转基因番茄研究与应用得到了迅速的发展。随着转基因技术的成熟与发展,越来越多的转基因番茄已被研制成功,并逐步走向产业化阶段。本文就目前转基因番茄的研究以及产业化情况进行概述,为进一步进行转基因番茄研究工作     

糖多孢红霉菌酮还原酶域在羰基还原中的应用

为研究糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶域,催化羰基还原的底物特异性和立体选择性,PCR扩增了该酶域的编码基因(eryKR1),并将其克隆到表达载体pET-28a,得到重组质粒pET-eryKR1,转化到Escherichia coli BL21(DE3)后,获得了重组菌株E.coli BL21(pET-eryKR1).将E.coli BL21(pET-eryKR1)和异源表达枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的重组大肠杆菌E.coli BL21(pET-gdh1)进行双重组菌耦合,对4-氯乙酰乙酸乙酯、苯乙酮、2-辛酮和环己酮4种底物进行转化还原,利用气相色谱分析转化液,结果显示E.coli BL21(pET-eryKR1)对环己酮的还原效果较好,产物环己醇的得率最高可达93.24%,而对其他3种底物几乎没有还原能力.利用E.coli BL21(pET-eryKR1)2催化2-甲基环己酮不对称还原,产物主要为顺式-2-甲基环己醇,产率可达41.87%,产物的对映体过量值为74.81%.     

小麦atpC基因植物超量表达载体的构建

线粒体ATP合成酶是氧化磷酸化过程中ATP合成起关键作用的多亚基复合体,但近来发现它们在植物应对非生物胁迫反应中起着十分重要的作用。因此,对ATP合成酶的各亚基基因功能的研究有助于阐释其在植物逆境条件下的调节机制,并为研究植物抗逆和防卫反应提供新的途径。线粒体ATP合成酶是能量代谢的关键酶,参与氧化磷酸化反应。atpC基因所编码的线粒体ATP合成酶γ亚基是线粒体ATP合成酶的功能亚基。为了进一步研究它在胁迫反应中的功能,以小麦cDNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出atpC基因。将该基因的cDNA编码序列连接到pCAMBIA1301中,成功构建了小麦pCAMBIA-atpC植物超量表达载体,为后续的转基因研究奠定了基础。     

一株嗜热菌的分离、鉴定及海藻糖合成酶基因的克隆

从广西贺州市80℃热泉分离了一株嗜热菌TTH,生长温度范围在55℃～85℃,最适生长温度70℃左右,最高生长温度85℃,G+C物质的量分数为67.6％.对菌株TTH从形态、培养条件、16S rRNA基因序列和系统发育分析方面进行了研究,表明该菌株与3株嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)的同源性达到9...     

麻疯树P5CS基因的克隆及原核表达

使用RACE技术,从麻疯树叶片中克隆了Δ1吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因,命名为JcP5CS. JcP5CS的cDNA全长2675 bp,包含一个2148 bp的开放阅读框,一个117 bp的5’-非翻译区以及一个410 bp的3’-非翻译区.开放阅读框编码716个氨基酸多肽链,分子量为77.54 kD,预测等电点为6.11.通过与其它物种的P5CS氨基酸序列比对,结果显示,与其他高等植物的P5CS氨基酸序列有很高的同源性.包含谷氨酸激酶和谷氨酸-γ-半醛脱氢酶两个结构域以及ATP及NAD (P     

产谷氨酰胺合成酶发酵条件的研究

谷氨酰胺合成酶是应用广泛的生物酶类,以LNU 0165，LNU 0066和LNU 0254为实验出发菌株，对不同pH、温度条件下产谷氨酰胺合成酶的最佳发酵条件进行了研究，通过测定谷氨酰胺合成酶，并进行比较选择高产菌株，LNU 0165产酶活最高，其GS酶的最适温度为60℃，最适pH为7．5左右。     

一条新的人类组织氨酰tRNA合成酶类似物全长cDNA的克隆及表达谱分析

从人胎脑文库中克隆到一条长为1219bp的cDNA，它编码23．4ku的肽链，该肽链与葡萄球菌组氨酰tRNA合成酶N端同源58％，利用human genomic blast可将其定位于20p11.Northern杂交显示胎脑中有一约1．5kb的单一条带，基因芯片杂交分析表明，其在肺癌和前列腺癌组织中表达较高，绿荧光蛋白亚细胞定位技术显示该蛋白存在于COS7细胞的细胞质中。     

一条新的人类组氨酰tRNA合成酶类似物全长cDNA的克隆及表达谱分析

从人胎脑文库中克隆到一条长为 12 19bp的cDNA ,它编码 2 3.4ku的肽链 .该肽链与葡萄球菌组氨酰tRNA合成酶N端同源 5 8% .利用humangenomicblast可将其定位于 2 0p11.Northern杂交显示胎脑中有一约1.5kb的单一条带 .基因芯片杂交分析表明 ,其在肺癌和前列腺癌组织中表达较高 .绿荧光蛋白亚细胞定位技术显示该蛋白存在于COS7细胞的细胞质中