NDP-黄递酶组织化学方法用于植物组织NOS定位的初步研究

利用NDP-黄递酶组织化学方法鉴定了玉米、绿豆、菜豆胚根中NOS的存在,结果发现胚根 中显著的阳性反应,探究了该方法在植物体NOS研究中的应用前景.     

纤维微菌海藻糖合成酶基因克隆表达及酶学特性鉴定

【目的】开发适用于海藻糖生产的新型海藻糖合成酶。【方法】通过反向PCR技术,从一株纤维微菌的基因组DNA中获知海藻糖合成酶基因完整ORF序列,进而克隆得到纤维微菌海藻糖合成酶基因(CCTreS),将其与表达载体pSE380构建重组质粒后转入大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,通过镍柱亲和层析纯化得到纯酶并进行酶学性质测定。【结果】从纤维微菌中克隆并在大肠杆菌中成功表达海藻糖合成酶基因(CCTreS)。经纯化获得的重组酶(CCTreS)在以麦芽糖为底物生成海藻糖时,最适反应pH值为7.0,最适反应温度为45℃,40℃保温1h仍具有80%以上的相对酶活力,在pH值5.5~8.5保存24h,相对酶活力仍保留80%以上。Cu~(2+)对其有明显抑制作用。【结论】该重组酶具有很好的热稳定性和pH稳定性,具有一定的研究价值和潜在的工业应用价值。     

何首乌复方结合运动对大鼠FAS活性的影响

用中草药何首乌复方结合90 min游泳运动干预高脂饮食大鼠,观察其对大鼠FAS活性及FFA的变化.结果表明:药物组、运动药物组对FAS活性抑制作用极显著(P<0.01),运动药物组对FFA降低趋势明显;何首乌复方能降低高脂饲料喂养的大鼠体重,有防止体重增加的作用;结合90 min游泳运动能降低大鼠皮褶厚度,左侧附睾脂肪垫、肾周脂肪垫的重量,有减脂肪的作用;有降低血清FFA的趋势,与90 min游泳运动协同作用,趋势更加明显;能显著降低高脂饮食大鼠FAS活性的水平.     

海藻糖TPS／TPP生物合成途径的进化研究

海藻糖是生物体内一种典型的应激代谢物,在干旱、缺氧等逆境环境下对生物体蛋白质具有特殊的保护作用,大多数生物均采用TPS/TPP途径合成自身所需要的海藻糖。采用生物信息学的方法,对GenBank数据库中收录的TPS/TPP途径中所有TPS和TPP合成酶的蛋白序列进行进化研究,发现该合成途径中的两个海藻糖合成酶具有相当高的进化保守性。     

人工合成酶可“剪断”病毒DNA

日本研究人员日前报告说，他们新发现一种基因变异可导致先天性血小板减少症。先天性血小板减少症患者出生后止血功能就很差，容易出血。此前，研究人员已经弄清了几种致病基因，但是仍有半数患者的致病基因没有弄清。东京大学等机构的研究人员研究了13个患者家族基因，发现有6个家族中一个名为“ACTN1”的基因出现变异。     

环肽的分析方法与研究

环肽是一种较线性多肽更为稳定的具有多种生理功能和医药价值的环状多肽，在形成荷尔蒙、抗生素、离子载体系统、抗真菌素、癌制剂以及毒素等方面展现出丰富多样的生物活性，具有重大的应用价值。近年来随着生物技术以及生物学与化学领域的交叉发展，不断有新的环肽被分离并鉴定出来。本文综述了自然界存在的一些环肽及环肽的分离纯化、分析方法，并且对环肽的生物合成机制和化学合成进行了概述。     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶的可溶性表达

系统考察了pET可溶性表达系统对酵母来源的S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因的表达情况,结果显示:当采用含Nus.Tag融合标签的pET-44a为载体,trxB和gor双突变的Ori-gami为宿主时最适合目的蛋白的可溶性表达。进一步考察不同来源(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌)SAM合成酶的可溶性时,也得到了相似的结论;比较发现酵母来源的SAM合成酶可溶性表达的比活力最高达60.9U/mg。     

不同小麦品种叶片衰老过程中谷氨酰胺合成酶和蛋白水解…

五个不同的半矮杆小麦品种在叶片自然衰老过程中，蛋白水解酶活性，可溶性蛋白含量，全Ｎ含量等方面没有显著差异，而只有谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）活性过早的提高与秸杆Ｎ的残留量和产量有明显的负相关性。     

aroA基因的克隆和优化

除草剂草甘膦 (glyphosate ,N_phosphonomethylglycine )的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP (5_烯醇式丙酮酰莽草酸_3_磷酸 ,5_enolpyruvylshikimate_3_phosphate)合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合成酶基因为模板 ,通过随机结合 ,交错延伸的PCR扩增过程 ,克服定点突变的局限性 ,使基因获得多位点突变 ,并使之在大肠杆菌中得到表达。对纯化后的表达产物的酶动力学性质的测定结果表明 ,获得了与作为模板的野生型相比 ,具有高得多的酶活力 (降低的Km (PEP) )和大大增强的草甘膦抗性 (升高的Ki(glyphosate) )的突变基因