植物NAD-IDH基因克隆及体外表达酶活力分析

植物NAD⁺-依赖型异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)是一多功能酶. 以拟南芥生态型“Columbia gl1”及甘蓝型油菜三系“陕2A”, “陕2B”和“垦C1”的叶片为材料, 采用RT-PCR方法成功地从每种植物材料中分别克隆了3种NAD-IDH不同亚基基因. 同源性搜索发现, 来源于油菜的克隆基因是新基因. 将克隆基因的功能蛋白编码区整合到pMID1多克隆位点, 构建表达重组体, 均能在体外翻译系统中高效地表达出特异目的蛋白. 亚基0, 亚基1和亚基2基因转录本加入到含终浓度为36 μg/mL的二硫键异构酶的体外翻译系统, 体外表达产物中检测到NAD-IDH酶活力. 不同基因种类及转录本分子比的体外表达产物的酶比活力比较表明, NAD-IDH由3种亚基组成, 缺一不可, 缺少亚基0是致命的, 缺少亚基1或2中的任何一个对酶活力的损伤是严重的. 同时发现, 来源于陕2A和陕2B的亚基1基因转录本中存在碱基缺失现象, 从而发生移框突变或无义突变, 使突变亚基不表现正常亚基1功能, 导致油菜品系间叶片NAD-IDH酶比活力存在差异.     

柑桔内生拮抗细菌的发酵液对油菜菌核病的田间防治效果

从柑桔健康组织中分离得到两株内生拮抗细菌"重桔1号"和"元石45",制成细菌悬浮液, 25℃恒温水浴振荡培养72h, 喷雾于接有油菜菌核病菌的油菜成株叶片上,以喷灭菌水为对照. 结果表明,喷有"重桔1号"和"元石45"两株细菌的发酵液的叶片菌核病菌病斑比对照叶片病斑扩展明显减小,与对照相比其病斑面积平均少扩大值分别为9.75cm2和10.62cm2 , 两株细菌的发酵液对油菜菌核病的绝对防治效果分别为19.5%和47.5%.     

高压静电场处理油菜种子的品质影响及模型探讨

研究了高压静电场处理种子在大田生长条件下的长期效应 .结果表明 ,较低电压的处理可提高硫甙含量显著降低含油量 ,而较高电压的处理可降低硫甙含量 ,极显著降低芥酸含量 .采用平面类脂双层模型分析外加高压静电场对植物细胞跨膜电位的影响 ,并探讨其微观机理 ,一定程度上可以解释相关的实验结果     

基于苯乙酮的肟醚-酰胺类化合物的合成及生物活性研究

合成了10个新型的肟醚-酰胺类化合物，所合成的新化合物经^1H NMR、元素分析和MS进行了结构确证．初步的生物活性测定表明新化合物普筛时Nb对黄瓜灰霉病菌，Ni对油菜菌核病菌及粘虫有100％的抑制活性。     

干旱胁迫下甘蓝型油菜相关抗旱基因的表达分析

以抗旱性较强的甘蓝型油菜Holiday为材料,在开花初期对油菜进行干旱胁迫处理,采用RT-qPCR技术分析ABA2、BnSOS2、BnCS、CAM、CBF4、PIP1这6个油菜抗旱相关基因在干旱胁迫第1天、3天、5天、7天在根、茎、叶、花和青荚中的表达量.结果表明,干旱胁迫下,6个抗旱相关基因在油菜的不同器官中均出现了上调表达;在不同干旱胁迫下,各基因表达量呈现不同的变化趋势;在相同的器官中,各基因的表达量存在明显的不同,累积表达量表现为根中ABA2最大、CBF4最小,茎中CAM最大、CBF4最小,叶中PIP1最大、ABA2最小,花中CBF4最大、BnSOS2最小,青荚中BnCS最大,CBF4最小.说明植物在受到干旱胁迫时,不同的抗旱途径对干旱胁迫的响应程度是不同的;不同器官中各抗旱相关基因与胁迫时间的相关性分析表明,CAM基因在茎中的表达量、CBF4基因在花中的表达量与胁迫时间呈显著正相关.     

油菜茎象甲的识别与防治

本文阐述了油菜茎象甲的形态特征、为害特点、生活史及习性、防治方法，对认识此害虫、抓住关键时期进行防治提出了切实可行的措施，具有良好的应用价值。     

生物柴油:清洁的可再生能源

世界各国对新能源的研发越来越重视,各类新能源层出不穷.有的国家用油菜、大豆等生物质为原料制造生物柴油;有的国家用"地沟油"造柴油;也有的国家对塑料瓶、垃圾和废旧轮胎以及木屑进行处理,以获得生物柴油;更有人利用动物的尸体生产柴油.     

外源基因定向插入甘蓝型油菜C基因组

外源基因定向插入C基因组对于降低转基因甘蓝型油菜(Brassica napus, AACC)的生态环境风险具有十分重要的作用. 本研究利用农杆菌介导的遗传转化方法将抗除草剂bar基因转入到芥蓝(B. oleracea var. alboglabra, CC)中, 以转bar基因的芥蓝(C^bC^b)为父本, 非转基因的白菜(B. rapa, AA)为母本, 通过种间杂交、子房培养和染色体加倍, 获得bar基因定向插入C基因组的人工合成甘蓝型油菜株系67个. PCR结果表明, 人工合成的甘蓝型油菜bar基因为阳性的株系31个, 阴性的株系36个. Basta®喷施结果表明, 分子检测阳性的人工合成甘蓝型油菜高抗除草剂, 分子检测阴性人工合成甘蓝型油菜则不抗. Southern blotting分析结果表明, 外源bar基因已整合到人工合成甘蓝型油菜的基因组中.     

上饶油菜访花昆虫种类及中华蜜蜂访花行为研究

油菜是我国重要的油料作物,需要昆虫授粉,发现和利用不同地理分布的油菜访花昆虫,对提高油菜的传粉效果具有重要意义。江西上饶是油菜的重要种植区域,油菜花的花期在2～3月。选择广信区和信州区为观测点,调查了油菜访花昆虫种类,并对优势访花昆虫中华蜜蜂的行为及其与温度间的关系进行了研究。调查共发现油菜有45种访花昆虫,属于膜翅目、双翅目、鳞翅目、半翅目和鞘翅等。其中中华蜜蜂是优势访花昆虫,访花频率在13.70～21.24朵/分钟之间。中华蜜蜂的访花频率与环境的温度呈现显著正相关关系(r=0.871,P<0.01),温度升高访花频率也升高。     

甘蓝型油菜和Lesquerella fendleri fad2基因片段克隆及hpRNA植物表达载体的构建

首先利用PCR从甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和Lesquerella fendleri基因组DNA中分别扩增出Δ12-脂肪酸去饱和酶fad2基因片段,再以扩增出的片段为模板设计引物从一端扩增出相应的小片段,然后将同一基因的大小片段反向连接,插入到种子特异表达载体2300-nap多克隆位点的napin启动子和nos终止子之间,构建成可以在种子中转录表达发夹RNA(Hairpin RNA,hpRNA)结构的植物表达载体.