COX-2,MMP-9和bFGF在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨COX-2,MMP-9和bFGF在大肠癌发生、发展及浸润转移中的作用及相互关系.方法应用免疫组化染色(SP)法检测COX-2,MMP-9和bFGF在66例大肠癌及22例正常大肠组织的表达情况.结果大肠癌组织COX-2,MMP-9和bFGF阳性表达率分别为84.8%,75.8%,65.2%,与正常大肠组织的27.3%,9.1%和4.5%相比有显著性差异(P<0.01),COX-2表达与肿瘤组织的浸润深度和淋巴结转移显著相关(P<0.05);MMP-9表达与淋巴结转移显著相关(P<0.05);bFGF表达与肿瘤组织的浸润深度显著相关(P<0.05);spearman等级相关检验显示,COX-2的表达与MMP-9和bFGF的表达显著相关(P<0.05,P<0.01).结论COX-2,MMP-9和bFGF在大肠癌的发生、发展中发挥着重要作用,COX-2可能通过促进MMP-9和bFGF的表达,从而促进大肠癌的浸润和转移.     

表层沉积物中重金属形态与酶活性的相关性

利用改进的Tessier连续萃取法研究实验室模拟的表层 沉积物中重金属（Fe,Mn,Cu,Zn和Pb）在一定时间（45 d）内的形态分布特征, 同时考察了沉积物体系中pH值、 氧化还原电位(Eh)及其中酶（蛋白酶、 脱氢酶、 磷酸酶、 蔗糖酶）活性的变化规律. 结果表明, 在考察的时间范围内, 沉积物体系中Mn的形态主要由可交换态向碳酸盐结合态、 铁/锰氧化态转化（分别为10.2%和32.1%）, 可交换态的Zn向铁/锰氧化 态转化了11.5%, 而Pb的有机质结合态则增加了20.1%; pH值初期波动较大而后趋于平缓, Eh则呈现波动状态; 蛋白酶、 脱氢酶的活性分别增加了88.9%和71.4%. 沉积物体系中pH值与碳酸盐结合态的Fe,Cu呈显著正相关, 蛋白酶活性与Mn的碳酸盐结合态、 铁/锰氧化态, Zn的可交换态、 铁/锰氧化态以及Pb的有机质结合态之间显著相关（n=8, p=0.05）, 脱 氢酶活性与Pb的碳酸盐结合态也存在显著相关性（n=8, p=0.05）, 表明除pH值外, 酶活性是沉积物中重金属形态转化的一个重要影响因素.     

基质金属蛋白酶在肿瘤细胞侵袭和 迁移中的作用

基质金属蛋白酶是一类锌离子依赖的、能够降解细胞外基质的内肽酶,它通过降解细胞外基质促进肿瘤细胞的侵袭和转移;现就基质金属蛋白酶在肿瘤细胞侵袭和转移过程中的作用以及基质金属蛋白酶与临床恶性肿瘤的相关性进行简单综述。     

CK-MB、hs-CRP、脂蛋白a及同型半胱氨酸检测在冠心病中的应用

探讨血清脂蛋白a(Lp(a))、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、同型半胱氨酸(Hcy)水平在冠心病中的变化.经冠状动脉造影确诊的95例冠心病(CHD)分为三组,即稳定心绞痛(SAP)组25例、不稳定心绞痛(UAP)组34例、急性心肌梗死(AMI)组36例.以58例正常健康者为对照组(Con),空腹取静脉血,分别测Lp(a)、Hs-CRP、CK-MB和Hcy水平.结果显示冠心病血清中Lp(a)、Hcy、hs-CRP及CK-MB水平明显高于Con组(P<0.05),AMI组Lp(a)、Hcy、Hs-CRP及CK-MB水平和阳性率明显高于SAP组(P<0.05).上述研究表明CRP、Lp(a)和Hcy是CHD发病的独立危险因素,因此,联合检测Lp(a)、CRP、Hcy及CK-MB在CHD的早期诊断、临床分型及疗效判断中有重要的应用价值.     

时间及温度对腐乳毛霉生长及产蛋白酶的影响

研究了曲种培养时间、培养温度及培养基成分对腐乳毛霉菌丝生长及产蛋白酶的影响．结果表明,在25℃左右恒温培养36～48h,菌丝生长良好,孢子产生少,蛋白酶产量尤其是酸性蛋白酶产量较高;麦麸豆粉培养基比单纯麦麸培养基利于毛霉菌丝生长及产酶．合理选择培养时间、培养温度及培养基成分,对腐乳毛霉的生长及蛋白酶的适度产生有较好的效果．     

荔枝核提取物对HepG-2细胞生长抑制及凋亡诱导机制的探讨

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制.方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检测并分析Fas蛋白表达的变化.结果:L2.3对HepG-2细胞表现出时间及剂量依赖性增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制质量浓度为43.0 μg/mL;处理组细胞中出现致密浓染亮蓝色凋亡小体.较高质量浓度的L2.3处理细胞后,caspase-3、8、9的活性均呈时间依赖性增高(P<0.01),且Fas蛋白的表达也明显上调(P<0.05).结论:荔枝核提取物L2.3对HepG-2细胞有体外增殖抑制活性,并介导 caspase-3、caspase-8、caspase-9活性改变及Fas蛋白表达的上调,以此诱导细胞凋亡的发生.     

基于文化差分进化算法的最小二乘支持向量机及QSAR建模

针对最小二乘支持向量机最佳算法参数难以确定的缺陷,提出了基于文化差分进化算法的最小二乘支持向量机(Cultural Differential evolution Algorithm Least Square Support Vector Machine,CDE-LSSVM)。该算法通过新型的文化差分进化算法优化确定最小二乘支持向量机核宽度参数和惩罚系数,建立具有良好预测性能的模型。同时,针对药物定量构效关系(Quantitative Structure-Activity Relationships,QSAR)模型具有高度非线性、变量之间存在相关性的特征,采用CDE-LSSVM建立HIV-1蛋白酶抑制剂的药物定量构效关系模型。模型具有很好的拟合精度与预测精度,且优于最小二乘支持向量机、BP神经网络和径向基神经网络。     

组织蛋白酶L及其酶学特性研究

组织蛋白酶L很难通过常规的肌动球蛋白提取方法完全去除.由琼脂糖凝胶6B凝胶层析图谱显示,组织蛋白酶L的活性主峰明显偏离肌动球蛋白主峰,表明该酶是肌动球蛋白非结合型酶.凝胶柱层析后测定L型组织蛋白酶粗酶液(Lmix)的活性,结果表明Lmix的热稳定性与pH和温度密切相关,其最适pH为5.0,最适温度为45℃.在最适pH5.0时,Lmix的活性随NaCl浓度的增加而增大.专一性底物及酶激活剂、抑制剂影响研究表明,Lmix为内含巯基的半胱氨酸型组织蛋白酶.     

嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3蛋白酶基因的原核表达、纯化和性质表征

将来源于嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3的蛋白酶(PH1704)基因在大肠杆菌BLP-CodonPlus中高效表达.采用超声、热失活和HiTrap Q Sepharose柱层析等方法对产物进行分离纯化.通过SDS-PAGE,Native-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定,发现该重组酶以十二聚体为主的寡聚体形式存在,并具有SDS抗性.蛋白酶活力染色表明,其六聚体以上有活力.以azo-gelation为底物,对其酶学性质进行初步研究表明,其最适温度为85℃,最适pH=8.0,并且具有良好的热稳定性.     

与光系统Ⅱ颗粒结合的蛋白酶的进一步分析

依次用三种溶液抽提处理菠菜光系统Ⅱ颗粒，离心后分离得到主要含１８ｋＤ，２４ｋＤ和３３ｋＤ水溶性蛋白的三种抽提液，利用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到前两种抽提液中均含蛋白酶。抽提液分别温育时，１８ｋＤ蛋白被降解而产生１７．１ｋＤ，１６ｋｄ，１４．４Ｋｄ．１３．５ｋＤ和１２ｋＤ片段；２４ｋＤ蛋白被孜解成２２ｋＤ，２０ｋＤ和１８ｋＤ。