基质金属蛋白酶-2, -9及其组织抑制物TIMPs mRNA在大鼠黄体中的表达及调节

研究了大鼠卵巢黄体中基质金属蛋白酶-2，-9（MMP2-，-9）及其组织抑制物TIMP-1，-2，-3mRNA的表达及调节。给26日龄大鼠注射阴云马务清每只50IU，48h后每只注射人绒毛膜促性腺激素致成假孕。经检测，证实假孕第1天黄体中MMP-2，-9mRNA的表达水平均最高，第4天开始下降，以后逐渐降低，到第14天表达降低到最低水平；TIMP-1 mRNA的表达在假孕第1天最高，第4天开始下降，第8天降低到最低水平，而后在假孕第14天表达又增加：IMPP-2mRNA的表达在第1-14天的假孕过程中没有显著的变化；与TIMP-1，-2表达相比，TIMP-3 mRNA的表达在假孕第1天最低，第4天开始增加，第8天达到最高，且一直持续到第14天，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）可显著增加离体卵巢灌流假孕大鼠黄体中MMP-2，-9mRNA的表达，显著刺激TIMP-1 mRNA的表达，而对TIMP-2 mRAN的表达无明显的刺激或抑制作用，但可显著抑制TIMP-3 mRNA的表达。上述结果提示，MMP-2，-9及TIMPs可能通过它僮的基因表达变化共同参与调节黄体功能和维持黄体结构。TNF-α显著增加离体卵巢灌流假孕大鼠黄体中MMP-2，-9及TIMP-1 mRNA的表达可能是抑制黄体退化的机制之一。     

基质金属蛋白酶与肿瘤的侵袭和转移

肿瘤侵袭和转移是一个相当复杂的过程，现在的观点认为基质金属蛋白酶（matrix metallo proteinases,MMP)在此过程中起重要作用，就近年来的有关文献，对MMP与肿瘤侵袭和转移的关系以及相关药物最新进展进行综述。     

银杏根际的土壤酶活性研究

首次研究银杏根际土壤酶的活性及其与土壤农化特性、银杏产量的关系。结果表明，中、低产银杏根际土壤中酶活性显著低于高产的土壤。揭示银杏根际土壤酶活性的水平与垂直分布规律，为确定银杏施肥的最佳水平位置及深度提供了新的理论依据。     

深海适冷假交替单孢菌Pseudoaltermonas sp.SM9913产适冷蛋白酶的条件优化

对深海适冷假交替单孢菌Pseudoaltermonas sp．SM9913适冷蛋白酶的发酵产酶条件进行了优化．研究结果表明，在发酵培养基中添加一定量柠檬酸钠有利于提高产酶；较难分解利用的氮源，如豆粕、豆粉，能诱导适冷蛋白酶合成，而较易吸收利用的氮源，如豆粕水解液、蛋白胨、尿素、铵盐等，对产酶有抑制作用；添加表面活性剂吐温80和SDS能促进酶向胞外的分泌；钙、镁离子促进产酶，锌、铜、铁离子对产酶有抑制作用；发酵产酶是好氧过程，装液量较少对产酶比较有利；发酵培养基初始pH7．0～8．0利于产酶．在优化后的发酵条件下，Pseudoaltermonas sp．SM9913产适冷蛋白酶量较原来提高了约65％，为适冷蛋白酶向着工业化生产应用提供了基础数据．     

In situ localization of proteinase inhibitor mRNA in rice plant challenged by brown planthopper

Proteinase inhibitor (PI) mRNA was localized by in situ hybridization in tissue sections of root, stem and leaf of the resistant rice (B5) plant fed by brown planthopper nymphs. In the rice material without BPH feeding, PI gene was expressed in the root, stem and leaf, while the abundance of PI mRNA was low. In the rice material fed by BPH,PI gene was expressed substantially in the parenchyma of rice stem and leaf, but weakly in the root. The results indicated that the PI gene was up-regulated in the rice plant challenged by brown planthopper. For the first time, we reported the expression changes of proteinase inhibitor gene in plant which was infested by a piercing/sucking insect.     

膨化物料酶解特性的研究

使用两种不同的蛋白酶—胃蛋白酶和米曲霉蛋白酶对挤压膨化脱脂豆粕进行水解 ,并通过正交实验和方差分析 ,找出胃蛋白酶和米曲霉蛋白酶的最佳水解条件 ,即胃蛋白酶的最佳水解条件为m(料 )∶m(H2 O) =4∶4 8;反应pH =2 .0 ;酶用量为 1 0 0 0u ;反应温度为 4 0℃ ;米曲霉蛋白酶的最佳水解条件为m(料 )∶m(H2 O) =4∶6 4 ;反应pH =7.2 ;酶用量为 1 0 0 0u ;反应温度为 37℃ ;并通过对两种蛋白酶水解的平均水解率的比较 ,发现胃蛋白酶的水解效果要优于米曲霉蛋白酶     

端粒酶与食管癌、胃癌相关性的研究

端粒是染色体DNA端部的特化部分，由高度重复的短序列DNA一蛋白质组成的特殊结构，能维持染色体的稳定和完整．端粒酶是由RNA与蛋白质亚基组成的核糖核蛋白酶，能以自身RNA为模板，合成端粒序列，是一种非常特殊的逆转录酶．端粒的长度和端粒酶的活性与细胞永生化，细胞衰老和癌变密切相关，在肿瘤发生发展中，端粒酶成为一种重要的肿瘤生物学标志物，有望作为诊断和治疗肿瘤的新靶点．本对端粒酶的结构与功能，端粒酶与食管癌、胃癌相关性的研究新进展及端粒酶活性的检测方法做一简要综述．     

重组大肠杆菌催化合成谷胱甘肽的研究

利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHⅠ)及谷胱甘肽合成酶(GSHⅡ)的基因，并进行了部分序列分析，分别构建了表达质粒pTrc—gshI和pTrc—gshⅡ，它们在E．coliBL21中的稳定性很好。在E．coliBL21(pTrc—gshI)：E．coliBL21(pTrc—gshⅡ)-3：1的情况下，谷胱甘肽的合成达3．31g／L，高于工程菌E．coliBL21(pTrc—gsh)催化合成的谷胱甘肽的量(2．51g／L)。利用E．coliBL21(pTrc—gshI)与E．coliBL21(pTrc—gshⅡ)将γ-谷氨酰半胱氨酸的合成与谷胱甘肽的合成分步进行，谷胱甘肽的合成达3．78g／L，比利用E．coliBL21(pTrc—gsh)采用两步法合成的谷胱甘肽高42．1％，解决了GSH对GHI的反馈抑制，并降低了ADP对第二步反应的抑制程度。     

示波测定新方法的研究

报道了近期示波测定新方法的研究,包括酒中半胱氨酸含量直接测定、茜素红S(ARS)及Ca-ARS的示波特性及应用、头孢氨苄降解过程和检测大豆甙元清除活性氧自由基能力4方面的研究工作。建立了2次微分简易示波伏安法直接测定酒中半胱氨酸含量的新方法,线性范围3.0×10-6～5.0×10-5mol/L,检出限为1×10-4mol/L;研究了0.1 mol/L KOH底液中ARS及Ca-ARS的示波特性;测得配合物的配位数为Ca:ARS=1:2,配合物的条件稳定常数估测为1.5×109。结合极谱研究说明了该切口是由配合物中ARS还原产生的,该法可成功应用于含钙药物葡萄糖酸钙口服液及片剂中钙含量的测定;研究了头孢氨苄在1 mol/L NaOH溶液中的降解过程。反应速率方程式表明,降解过程为一级反应,降解反应速率常数k=0.056 min-1,半衰期t1/2为12.38 min。讨论了O2-·的产生及大豆甙元异黄酮化合物对O2-·的清除作用,表明大豆甙元是一种有效的自由基清除剂。     

焦点黏着激酶对胚泡黏附、扩展和基质金属蛋白酶的调节

细胞外基质-整合素相互作用能显著影响胚泡的黏附、扩展和分化, 并能增强胚泡中尿激酶型纤溶酶原激活因子的表达, 因而是胚泡植入的关键因素之一. 焦点黏着激酶(FAK)是细胞外基质-整合素信号转导通路的基础分子. 研究发现, 胚泡表达FAK, 在扩展的滋养层细胞中呈斑点状分布, 在内细胞团中呈弥散分布. FAK的反义寡聚脱氧核酸(ODN)以剂量依赖方式抑制胚泡中64 kD 基质金属蛋白酶-2的活性. 这两种酶活性随反义ODN浓度升高而急剧减弱. 胚泡黏附和扩展也受到FAK反义ODN的影响. 当反义ODN浓度低于20 μg/mL时, 其对胚泡黏附和扩展的抑制作用具有明显剂量依赖关系, 但浓度达到200 μg/mL 时, 胚泡黏附率和扩展率反而回升至正常水平. 研究结果说明, FAK可能通过胞内信号转导通路影响胚泡黏附、扩展和基质金属蛋白酶-2活性, 从黏附和侵入两方面调节胚泡植入.