新辅助化疗对子宫内膜癌患者血清VEGF及MMP-9的影响

目的探讨新辅助化疗对子宫内膜癌患者疗效及血清VEGF及MMP-9的影响.方法将84例子宫内膜癌患者随机分为两组,研究组患者术前使用新辅助化疗,术后常规化疗,对照组患者术后常规化疗.比较两组患者治疗前后血清VEGF、MMP-9、肿瘤标记物CA125及CA19-9的变化,观察手术时长和术中失血量、术后18个月内两组患者的复发及生存情况,进行比较分析.结果研究组治疗后血清VEGF,MMP-9及CA125的水平明显低于对照组(P0. 05).术后18个月,研究组复发率为11. 9%,对照组复发率为26. 1%,研究组复发率明显低于对照组(P0. 05),两组术后生存率均为100%.结论子宫内膜癌患者实施新辅助化疗后再行手术,血清VEGF及MMP-9水平降低更显著,术后复发率更低.     

尖吻蝮蛇毒不同蛋白酶水解物的制备及抗氧化活性研究

【目的】研究尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒的不同蛋白酶水解产物的制备及抗氧化活性。【方法】分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解尖吻蝮蛇毒,以水解物的水解度、清除自由基活性、金属离子螯合能力和总还原力作为抗氧化活性比较指标来选出最佳水解蛋白酶,并比较该蛋白酶水解物在超滤后得到的不同分子量组分的抗氧化活性大小。【结果】碱性蛋白酶水解物的清除DPPH自由基活性、亚铁离子螯合能力和总还原力均为最佳;该酶解物经超滤得到的3个组分中,分子量为3～10kDa的组分对DPPH自由基和羟基自由基清除能力最强,分子量大于10kDa的组分的亚铁离子螯合能力和总还原力最强。【结论】尖吻蝮蛇毒的不同蛋白酶水解物均具有抗氧化活性,其中用碱性蛋白酶水解物抗氧化活性较强。     

菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性研究

为了防止菠萝蛋白酶生产过程中失活,以菠萝果的提取液为对象,研究了温度及停留时间、pH值、金属离子种类和浓度,多元醇和糖等因素对浸提液中菠萝蛋白酶活性的影响．在实验范围内,温度超过50℃时浸提液中菠萝蛋白酶将明显失活,在浸提液原始pH条件下,浸提液中菠萝蛋白酶稳定性最好;Fe3＋、Fe2＋、Cu^2＋等金属离子都使浸提液中菠萝蛋白酶稳定性下降,Fe^2＋的影响最大;Ca^2＋含量在20～40mg·L^-1时,可提高浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性,甘油和葡萄糖可明显提高浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性．     

环亚酰胺水解酶在大肠杆菌中的重组表达与纯化

以重组质粒pEI为模板,PCR扩增环亚酰胺酶基因序列,插入pMAL-s表达载体中.重组质粒转入E.Coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导可溶性表达融合蛋白MBP-CIH,利用Amylose亲和柱一步纯化获得MBP-CIH,再经人鼻病毒3C蛋白酶切除亲和臂MBP,硫酸铵沉淀、Phenyl-Sepharose疏水层析获得电泳纯的CIH,纯化倍数为12.7,活力回收29%,比活为36.3 U/mg.重组环亚酰胺水解酶的最适pH为8.0～9.0,最适温度50 ℃,在温度低于55 ℃时酶的性质相对稳定.Ni2 、Co2 能显著提高酶活力,Mn2 、Ca2 和Mg2 对酶活没明显有影响,Cu2 、Zn2 、Cd2 、Fe2 以及金属螯合剂8-羟基喹啉、EDTA则对酶有不同程度的抑制作用.初步说明该酶是一个金属依赖性酶.     

短小芽孢杆菌sRNA Bpsr112的鉴定及功能研究

为了给短小芽孢杆菌的改造提供新思路,提高碱性蛋白酶产量,实验室前期对短小芽孢杆菌进行了转录组测序,预测了短小芽孢杆菌的sRNA.本研究通过生物信息学方法和Northern杂交鉴定了一个新的sRNA Bpsr112.然后构建了Bpsr112的敲除型菌株和过表达菌株,利用相关菌株进行了生长曲线、盐胁迫和蛋白酶活等实验,再利用SDS-PAGE检测胞外蛋白酶AprE的表达水平.结果表明,在发酵至60 h和72 h时,与对照菌株相比,敲除型菌株酶活显著降低（P<0.01）,过表达菌株酶活显著提高（P<0.01）;同时SDS-PAGE结果表明,AprE蛋白含量在敲除菌株中降低,在过表达菌株中提高,说明sRNA Bpsr112对短小芽孢杆菌蛋白酶活具有正调控.本研究鉴定了短小芽孢杆菌中的sRNA,并发现Bpsr112对蛋白酶活具有促进作用.     

抗结核化合物的设计与合成

针对日益突出的结核病(TB)药物耐药性问题,对抗结核药物进行了合理的修饰,以增强其结核病治疗的效果.以异烟肼(INH)为原料,与不同的异氰酸酯反应,成功制备了9种新型的不对称取代脲类化合物,这类脲桥结构对结核分枝杆菌(MTB)中的半胱氨酸合酶具有抑制作用,合成的产物经质谱(MS)、氢核磁共振谱(~1H NMR)等方法进行了分析表征.     

气相半胱氨酸分子与带电离子的低激发态特性

采用密度泛函理论(DFT)中的B3LYP方法, 在6-311++G(-d,p-)基组水平上, 对气相单体半胱氨酸(Cys)分子及离子的基态稳定几何构型进行优化, 并用含时密度泛函理论(TD-DFT)方法, 得到气相单体Cys分子和Cys^2-离子的低激发态特性. 结果表明： 随着分子捕获电子数目的增加, 体系的能量逐渐增加, S1激发态与基态能量的差值Δ E明显减小, 分子的荧光波长由239.35 nm增至1 895.82 nm, S7激发态的电子跃迁轨道数减少.     

木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解制备绿豆多肽

用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶顺序水解的方法制备绿豆多肽: 先对水解体系的pH值、 碱性蛋白酶与绿豆分离蛋白的质量比（E/S比）、 水解温度、 绿豆分离蛋白质量分数进行单因素实验; 再在单因素实验基础上, 采用4因素3水平正交实验设计优化碱性蛋白酶水解条件. 获得最佳水解条件为： 绿豆分离蛋白的质量分数为8%, 水解温度为55 ℃, E/S比为8%, pH=9.0. 在最佳顺序水解条件下, 绿豆分离蛋白的水解度达32.58%.     

异精激发彭泽鲫子代及其双亲消化器官蛋白酶活性的比较

主要研究海鲤(♂)、彭泽鲫(♀)及其异精雌核发育子代消化器官蛋白酶活性.结果表明:海鲤(♂)肝胰脏蛋白酶活性最高,为535.63.其前肠、中肠和后肠的蛋白酶活性分别为:139.47、499.36、126.28.彭泽鲫(♀)肝胰脏活性极低,基本检测不出活性,肠道蛋白酶活性由前肠到后肠依次为:60.21、18.09、4.78.异精雌核发育子代肝胰脏蛋白酶活性为367.69,前肠为101.16,中肠为297.06,后肠为25.97.子代消化器官的蛋白酶活性介于双亲之间,显著高于其母本蛋白酶活性而低于其父本的蛋白酶活性,且消化器官蛋白酶活性大小顺序与父本保持一致,均为:肝胰脏>中肠>前肠>后肠.由此可见,子代接受了父本的优良性状,为彭泽鲫雌核发育的“异精效应”提供了一定的证据.