半胱氨酸组成的二肽与锌络合的研究（部分一）：二肽和 …

制备了只由半胱氨酸组成的二肽,即Ｃ０保护的Ｈ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－ＯＥｔ（１）和未来保护的Ｈ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－ＯＨ（２）。     

马铃薯蛋白酶抑制因子特性的研究

本文研究了马铃薯蛋白酶抑制因子的稳定性及其对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制能力,结果表明：该抑制因子对胰蛋白酶活性的抑制作用较弱,最大抑制程度为６５％;对胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用较强,抑制程度最高可达９５％以上,并且,它对ｐＨ及温度的变化均具有较强的稳定性．     

产碱性蛋白酶地衣芽孢杆菌N16抗噬菌体菌株筛选及噬菌…

报道了噬菌体ＰＧ３对产碱性蛋白酶地衣芽孢杆菌Ｎ１６反复感染多次进行自然筛选，获得８株对噬菌体ＰＧ３具有稳定抗性的菌株，其产酶水平有的比出发菌株Ｎ１６高１０％左右。同时对噬菌体ＰＧ３的生物学特性进行了某些研究。     

果菠萝蛋白酶催化功能基团的研究

以菠萝果为材料,应用本实验室开发的工业生产法工艺制备粗酶制品,进一步经DEAE-纤维索(DE-52)和 Sephadex G-75柱层析纯化,获得圆盘电泳单一纯的果酶制剂,测定酶的分子量为29 800,含 19种不同氨基酸,总残基数为286个。化学修饰研究结果表明:巯基、氨基、Trp残基和唯一的His残基是酶活性必需基团,而Ser和羧基与酶活性无关。用邹氏作图法判断 Trp残基的必需基团数,表明酶分子中六个Trp残基仅有一个是酶活性所必需的。     

酶活性不可逆改变的底物保护动力学

根据邹氏的酶活性不可逆改变动力学理论,我们创建一种测定微观动力学参数方法判断底物对酶活力是否有保护作用,这对阐明酶的空间结构与功能、酶构象变化与活力变化的关系具有重要的科学意义,应用此法判断猕猴桃蛋白酶(Actinidin)在4mol/l盐酸胍和8mol/l脲的失活底物保护是否存在,实验结果表明:1)Actinidin在4mol/l盐酸胍失活过程受到底物一定程度的保护,2)Actindin在8mol/l脲失活过程底物对它完全保护.以上结果也提示了胍、脲作用机制不尽相同。     

酶解作用对豆浆乳化性能的影响

利用纤维素酶和蛋白酶处理豆浆,以乳化活性和乳化稳定性为主要指标,考察酶用量、酶解时间、蛋白酶种类对豆浆乳化性能的影响。结果表明:纤维素酶处理可增加豆浆中乳化性成分的含量,豆浆的乳化活性和稳定性都随之提高。纤维素酶用量达到0.09%后,酶处理时间达到45 min后,豆浆各指标变化趋于平稳。豆浆蛋白水解度随木瓜蛋白酶和中性蛋白酶用量和酶解时间的增加而增加。在相同酶用量和水解时间下,两种酶处理后的水解度基本相同,但在0.12%的蛋白酶用量下,木瓜蛋白酶处理30 min的豆浆具有更好的乳化活性和稳定性。与对照组相比,纤维素酶和木瓜蛋白酶处理均能提高豆浆乳化性。     

高产碱性蛋白酶工程菌的构建及鉴定

利用原生质体融合技术，使碱性蛋白酶生产菌2709与枯草杆菌BD105(含有碱性蛋白酶基因克隆载体pDW2)杂交，得到1株高产碱性蛋白酶的工程菌A16．A16的表型与生长特征与2709相似，相同条件下发酵酶活性比2709菌株高50％，摇瓶发酵的产酶水平最高可达30000u／mL。用菌落的原位杂交鉴定出该菌株携有双亲的遗传物质．     

模拟金属酶-铁(Ⅱ)酪氨酸配合物的合成及SOD样活性

合成了尚未见文献报道的铁(Ⅱ)-酪氨酸模拟超氧化物歧化酶。用差动热分析仪(DTA)，监测模拟物生成；分析了热稳定性。通过元素分析、红外光谱初步对配合物组成和结构进行了表征，确定了金属离子与氨基酸发生了配位反应；利用改进核黄素光还原氯化硝基四氮唑兰(NBT)法测定了模拟物催化歧化超氧阴离子自由基(O^-2)反应的活性。研究表明：合成配合物结构稳定，水溶液中具有一定的SOD样活性。     

高半胱氨酸SAM膜电极的制备及其电化学行为研究

研究了高半胱氨酸在金电极上形成单分子自组装膜的条件，并利用循环伏安法，交流阻抗谱研究了[Fe(CN)6]^3-/4-在高半胱氨酸SAM膜电极上于不同pH值溶液中的电化学行为。循环伏安结果表明，在pH大于高半胱氨酸等电点的溶液中，[Fe(CN)6]^3-/4-在膜电极上的循环伏安曲线峰电流明显降低，峰分离差增大，说明随pH值的增加，[Fe(CN)6]^3-/4-离子对在SAM膜电极上的可逆性变差；交流阻抗图谱显示，由于SAM膜电极表面带负电荷时，[Fe(CN)6]^3-/4-难以靠近电极表面，使其与电极表面的电子交换反应变得困难，在SAM膜电极上的电化学反应电阻Rct明显增加，并且随电解质溶液的pH增加而增加。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂可抑制昆虫细胞表达的蛋白质降解

干细胞因子是一种多功能细胞因子,能在多级造血水平与其他细胞因子协同作用促进造血干/祖细胞及各种血细胞的存活、增殖和分化.重组人二连体干细胞因子具有比干细胞因子单体更高的比活,可以避免副反应.重组人二连体干细胞因子在Sf9细胞和大肠杆菌中表达时,发现有特异性降解.片段缺失实验证实切割位点位于重组人二连体干细胞因子的145位到165位氨基酸之间.丝氨酸蛋白酶抑制剂aprotinin和PMSF能抑制这种特异性降解.试验了不同浓度的aprotinin和PMSF对Sf9细胞存活和重组人二连体干细胞因子产量的影响,显示当aprotinin的浓度为1.0μg/mL时,重组人二连体干细胞因子的产量是没有加aprotinin时产量的2倍,而且aprotinin可以完全抑制这种特异性降解.