ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达

利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/(ChIFN-α从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asmraginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α将重组质粒经IPTG诱导5 h.用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChlFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).     

罗曼蛋鸡血清蛋白多态性的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了６５只商品代罗曼蛋鸡血清中蛋白质和酶的遗传多态性．结果显示,血清碱性磷酸酶（ＡＫＰ）存在ＦＦ和ＦＳ两种表型,其基因频率分别为３０．７７％和６９．２３％．乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）可分为５条同工酶区带,即ＬＤＨ１～ＬＤＨ５,其相对含量分别为（３４．６±３．２）％、（２９．８±２．５）％、（２６．２±２．１）％、（６．３±１．３）％和（３．１±０．９）％．血清中转铁蛋白（Ｔｆ）、白蛋白（Ａｌｂ）和前白蛋白（Ｐａ）均呈单态．     

应用ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

应用ELISA试剂盒对西宁市及乐都县344份血清样品进行了鸡传染性支气管炎抗体水平检测,结果阳性率达97．96％,其中333份样品抗体滴度在500—15000之间;1份样品的抗体滴度小于500;3份样品滴度大于15000。     

警惕估算成“鸡肋”

课改前．小学数学教学基本上都是要求学生精确计算。课改后。虽然课程标准中明确提出要加强估算，教材中也添加了很多估算教学的内容．但由于教师精确计算的意识远远强于估算。教学时不能重视让学生感悟估算的意义、体验估算的价值．只是按教材程序让学生蜻蜒点水式讨论一下估算的方法和结果，很快就将主要精力放在了指导学生如何精确计算上，使估算成了“鸡肋”，教之无味，弃之不能。悟性高的学生或许能掌握估算的方法并能正确估算。而一大部分学生也就意识到只要估计的结果与精确计算的结果较接近就是估算。     

用PCR扩增和克隆鸡贫血病毒衣壳蛋白VP2基因

接种鸡贫血病毒（ＣＡＶ）Ｃｕｘ－１毒株于ＭＤＣＣ－ＲＰ１细胞中,并用经狄高辛标记的ＣＡＶ衣壳蛋白ＶＰ１基因克隆ＤＮＡ作为探针在斑点杂交中检测和比较了各代细胞中ＣＡＶ ＤＮＡ水平。通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）,从ＣＡＶ ＤＮＡ水平较高的ＭＤＣＣ－ＲＰ１细胞基因组ＤＮＡ中扩增出ＣＡＶ衣壳蛋白ＶＰ２基因片段约６５０ｂｐ的编码序列,将该ＰＣＲ扩增的产物于ＥｃｏＲＩ和ＫｐｎＩ位点克隆到ｐＵＣ１９质粒载体中,     

RNAiFect~(TM)和SuperFect转染试剂对4种细胞活性的影响

在RNA干涉中,转染试剂的用量与siRNAs的量成正相关关系,但因转染试剂对细胞有一定的毒性作用,超过一定用量可以引起细胞形状改变、脱落、甚至死亡,直接影响着干涉的效率,所以确定转染试剂的优化用量,是RNA干涉试验中的重要环节.将不同用量的RNA iFectTM和SuperFect两种转染试剂分别加入鸡胚成纤维(CEF)细胞、293细胞、PK细胞和MDCK细胞中,在4h和24h后观察细胞的活力情况,比较了不同转染试剂对不同细胞的影响.结果表明:相同用量的两种转染试剂对293细胞、PK细胞和MDCK细胞的生长的影响远远小于对CEF细胞的影响;两种转染试剂用于外源小分子转染时,建议在293细胞、PK细胞和MDCK细胞上的用量不超过3u l;两种转染试剂对CEF细胞的毒性较大,不适合用于转染.     

图片新闻

据英国媒体报道,困扰人类的世纪谜题“鸡生蛋还是蛋生鸡”终于有了答案。英国科学家称：先有鸡后有蛋。     

致弱I型MDV pp38基因同源物的克隆和序列分析

将致弱Ｉ型马立克病病毒（ＭＤＶ）感染的细胞基因组ＤＮＡ的ＥｃｏＲＩ酶切产物建于ｐＵＣ１８质粒载体文库中,以ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ标记的含有中毒ＧＡ株ＭＤＶｐｐ３８基因克隆片段作为探针,进行了原位杂交反应,初步筛选出阳性重组质粒,进一步用ＥｃＲＩ酶切分析筛选到含ｐｐ３８基因同源物的重组ｐＵＣ１８质粒,序列人析表明该ｐｐ３８基因同源物与ｐｐ３８基因有极高的同源性,仅有１个碱基突变并导致１个氨基酸的夫     

凉山岩鹰鸡三周龄脱温配套技术

凉山岩鹰鸡三周龄脱温配套技术是凉山岩鹰鸡生态养殖中的重要环节。本文从脱温室的修建、雏鸡运输和防疫、饮水和开食、合理的密度、养殖环境的调控等方面对岩鹰鸡脱温鸡苗生产技术进行了总结。