宫颈癌中CALCA基因甲基化与HPV16-E7致癌蛋白表达的依存关系

 选择HPV16 阳性宫颈癌细胞和RNAi 技术,研究CALCA 基因甲基化与HPV16-E7 致癌蛋白表达的依存关系。构建慢病毒siRNA 重组表达载体,建立稳定表达HPV16-E7-siRNA 的RNAi 细胞模型。以SiHa 细胞和RNAi 细胞模型的基因组DNA 为对象,选择CALCA 基因启动子区富含CpG 岛屿的目标片段,使用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）筛查分析,研究RNAi 抑制HPV16-E 7 表达后,CALCA 基因甲基化状态的可逆性程度。选出CALCA 基因启动子区富含CpG 位点的目标片段,其大小为365 bp,含有19 个CpG 岛屿,发现其中13 个CpG 位点的胞嘧啶在SiHa 细胞基因组DNA 中发生了甲基化（13/19）,而在表达HPV16-E7-siRNA 的RNAi 细胞模型中,所有CpG 位点的甲基化已发生逆转（0/19 位点）。本研究从细胞水平证明了宫颈癌细胞内的CALCA 基因启动子高甲基化对HPV16-E7 致癌蛋白表达有依赖性,为进一步研究E7 蛋白的作用及致癌机制奠定了重要的物质基础。     

构建T载体用于PCR克隆

通过克隆甘露聚糖酶基因到pMD-18T载体构建了质粒pMD-18Tman2XcmI,克隆的甘露聚糖酶基因两侧各引进了一个特定的XcmI酶切位点;用XcmI酶切质粒pMD-18Tman2XcmI可以制备T载体．因为甘露聚糖酶基因作为填充片段和筛选标记受半乳糖苷酶基因启动子的控制,甘露聚糖酶能够表达,从而水解甘露聚糖产生水解圈,指示转化了部分酶切质粒的背景菌落．此外,在甘露聚糖酶基因中存在第3个不同序列的XcmI酶切位点,因此残余的甘露聚糖酶基因引起的背景可以进一步降低．抽提大量质粒贮存,随时制备T载体使用,增加了克隆的稳定性．该T载体克服了一般T载体质量不稳定,费钱,克隆效率低,假阳性高的缺点．使用构建的T载体完成了10个基因的克隆,结果表明重组效率达到了90％～100％．     

胚胎发育过程中基因的调节与控制

在卵子发生和成熟过程中,核内基因的遗传信息控制着卵质内蛋白质的合成。通过“掩盖”的mRNA把核内信息转移到细胞质中,这种“掩盖”的mRNA又反过来控制以后的发育时期中核内遗传信息的表达。受精卵内这种核与质之间的矛盾,相互作用和相互制约,推动着发育过程的进行。     

SDS在HCV基因工程抗原包被中的应用研究

在间接ELISA法检测HCV抗体过程中,通过使用含有十二烷基硫酸钠（SDS）的包被液对HCV基因工程抗原固相化,发现使用SDS提高了HCV间接ELISA法诊断试剂检测的阳性标本和阴性标本的偏比,改善了反应模式,为改善HCV-ELISA法诊断试剂的质量提供了有效途径.     

植物节律性发育的分子基础

生物钟调节了多种物生的生理过程.本文主要阐述了植物生长的日变化以及季节变化的分子基础,并分析了生物钟在植物生长发育过程中的重要作用.     

Cloning and analysis of [NiFe]-hydrogenase genes from Arthrospira platensis FACHB341

0IntroductionHydrogenase(H2ase)has beeninvestigatedin a va-riety of bacterial groups since it was firstly reported in1931[1-3].Cyanobacteria contain two different types ofH2ase,uptake H2ase(EC1.12.7.2)and bidirectional orreversible H2ase(EC1.12.1.12).Uptake H2ase is in-duced under N2-fixing situation,mainly confinedin hete-rocysts.Bidirectional H2ase is constitutively synthesized,active in both heterocysts and vegetative cells present inboth N2-fixing and non-N2-fixing conditions.This en…     

Breeding double low super hybrids with dominant genic male sterility three lines in Brassica napus

A double low homozygous two-type sterile line ZY-2AB, its near-isogenic temporary maintainer line ZY-4, and the full sterile line ZY-3 derived from the cross of ZY-2A with ZY-4, were developed to breed three-line dominant GMS hybrid in Brassica napus. Three years data showed that the ratios of sterile and fertile plants fit the expected 1 ： 1 ratio in ZY-2AB, and the 1：0 ratio in ZY-3, respectively. Some double low super hybrid combinations were screened out when the full sterile line ZY-3 was used as female parent, among which the combination 01Z24 increased 36.88 percent more yield than control and the conbination 98Z131 has been passed through the Sichuan Provincial Regional Test and registered in Sichuan Province. Two years data showed that the agronomic performance of the two-line hybrids derived from crosses of ZY-2A with restorer lines versus that of the three-line hybrids produced by ZY-3 was not different for any of the nine most important agronomic characteristics, revealing that near-isogenic line of homozygous two-type line was used as temporary maintainer could effectively avoid the disadvantage of threeway cross hybrid in breeding three-line dominant GMS hybrid.     

阳离子脂质体在基因治疗中的应用

介绍了阳离子脂质体的组成和结构特点以及作为基因载体在基因治疗方面的应用．阳离子脂质体转基因的机理研究表明：阳离子脂质体／基因复合物进入细胞的方式依赖于细胞的内吞作用或通过细胞的膜融合作用．     

大麦紫黄素脱环氧化酶基因片段的克隆与分析

根据紫黄素脱环氧化酶基因(VDE)基因的保守序列设计引物,用RT-PCR的方法从大麦叶片总体RNA中克隆到VDE基因片段,测序结果显示其长度为 639bp,BLASTx比对显示与已发表的VDE基因有较高的同源性。Northern杂交表明VDE基因的表达水平成熟绿叶片中达到最高。     

幻想成真:科技让人类自身更完善

人类对于自身的完善充满了幻想。科幻小说中出现的各种本领非凡的机器人、生化人、基因改造人以及超人等,正是人类期盼获得超能力的理想在幻想世界中的体现。科幻小说家曾预言,21世纪的科学技术将会有惊人的飞跃。生活在21世纪的人,日常生活将会发生翻天覆地的变化,届时,科学技术给现实生活带来的奇迹有可能与科幻小说中的情景相去不远。现代社会里,科学技术的成果已经渗透到了日常生活的每一个角落。许多科技发明将向着与普通人日常生活息息相关的方向发展。科学家和研究工作者们利用仿生技术、