β-半乳糖苷酶（乳糖酶）开发及应用研究

本项目为食品应用型开发研究，所属行业为生物工程行业。采用突变育种技术和液体发酵技术，通过对4株酵母菌株：乳酒假丝酵母、乳酸克鲁维酵母、乳糖红酵母、马克斯克鲁维酵母马克斯变种进行菌种诱导、选择培养和筛选等，筛选出产酶活力较高的马克斯克鲁维酵母马克斯变种，作为出发菌株。采用紫外射线、化学诱变剂联合突变技术对出发菌株进行突变、筛选，     

信号肽对木聚糖酶在马克斯克鲁维酵母中分泌表达的影响

马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)是一种新型的非常规酵母,具有生长快、分泌能力强、安全性高等优势.在酵母表达系统中,分泌信号肽不仅介导了外源蛋白沿着正确途径分泌到胞外,也在蛋白质翻译后加工等方面发挥了重要作用.本文分别研究了酿酒酵母α-Factor信号肽和克鲁维酵母菊粉酶信号肽对耐热木聚糖酶在马克斯克鲁维酵母中的分泌表达影响.工程菌摇瓶发酵72h后,在含有菊粉酶信号肽和α-Factor信号肽的工程菌株的发酵上清中,木聚糖酶酶活分别为318.91U/mL和117.90U/mL,表明马克斯克鲁维酵母表达木聚糖酶时,菊粉酶信号肽介导的蛋白分泌表达效果优于α-Factor信号肽.重组表达木聚糖酶最适反应条件是pH5.5和65℃,在75℃处理1h后,该酶的剩余酶活保留73%以上.在5L发酵罐中,重组菌高密度发酵72h,木聚糖酶酶活高达157 757U/mL,结果表明,马克斯克鲁维酵母表达系统在工业酶领域中应用具有非常广阔的前景.     

伪装

红蓝两军正在进行军事演习,红军主帅托尼熊正在为一件事发愁。他对手下的将领说:“运送弹药的车队途中遇到公路塌方,不能及时赶到了。”哈维熊一听:“要是让蓝军知道我们弹药不足可就糟了,他们会提前发起攻击的!”托尼熊点点头,说:“请大家一起想想办法。”     

沙俄冒险家曾狂想殖民北美

<正>1981年以来,俄罗斯戏剧爱好者一直为歌剧《朱诺和阿沃斯》中扣人心弦的情节而疯狂。这出集《叶甫根尼·奥涅金》、《蝴蝶夫人》等优秀特质于一身的戏,以18世纪末的沙皇宠臣尼古拉·列萨诺夫为主人公,描述了他在北美大陆的冒险以及同女主角肯奇塔·阿奎洛浪漫的爱情。尽管剧中的许多情节是虚构的,但整体背景却是有史料可考。曾经著有《斯大林时代的孩子们》等作品的欧文·马修在其新书《荣耀却运气不佳的冒险:     

一种针对马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)的无痕基因组改造方法

马克斯克鲁维酵母位于酵母科克鲁维属,具有高分泌能力、高生长速率、多底物利用以及耐高温等特点,具有工业应用前景.因此,建立马克斯克鲁维酵母的基因工程改造技术十分重要.本文以马克斯克鲁维酵母URA3基因缺陷菌株为出发菌株,依据同源重组原理,选用KmURA3作为可循环使用的筛选标签基因,建立了一种针对马克斯克鲁维酵母的无残留多基因敲除技术,以满足其遗传工程改造的需求.本研究利用这种技术成功构建了Kmhis3Δ、Kmura3Δhis3Δ、Kmura3Δade2Δ、Kmura3Δhis3Δade2Δ、Kmhis3Δade2Δ等5株营养缺陷型菌株,为马克斯克鲁维酵母的分子遗传学研究以及工业应用研究提供了遗传材料.     

酵母菌原生质体形成与再生多因子综合效应分析

研究了酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂和预处理剂对酿酒酵母Ａ００１与克鲁维酵母Ｙ０３４原生质体形成时间与再生的综合效应．统计分析表明，在２％蜗牛酶，菌龄为对数生长期时，影响原生质体形成的主要因素是酶解时间、酶解温度，且两者存在交互作用．影响原生质体再生的主要因素是渗透压稳定剂．确立了实验菌株原生质体形成与再生的最佳匹配条件     

克鲁维酵母(K.hubeiensis)产菊粉酶的发酵参数研究

菊粉酶(inulinase)是一种降解菊糖B-2,1-D-果聚糖果糖苷键生成果糖或低聚果糖的水解酶.本研究在筛选菊粉酶高产菌株基础上,对产酶能力较强的l株湖北克鲁维酵母(Kluyvreromyces hubeiensis)的发酵产酶参数进行了优化;结果表明,该菌株在菊糖3%,蛋白胨3%,pH 5.0,30～37℃摇床培...     

基于FSVM的马克斯克鲁维酵母菌发酵过程的软测量

针对马克斯克鲁维酵母菌发酵过程存在高度的复杂性和非线性问题,提出采用模糊支持向量机建立马克斯克鲁维酵母菌的发酵预测模型,通过预测在不同温度、时间、PH值、培养基中葡萄糖含量等因素的影响下细胞生物量的含量,从而寻找该酵母菌最佳的生长发酵条件。Matlab仿真实验结果表明,该方法有效地缩短了训练时间,提高了预测精度和模型的抗噪性,其性能优于一般支持向景机预测模型。