人载脂蛋白基因apoAI在毕赤氏酵母中的表达

将化学法合成的apoAI基因插入分泌型载体pPIC9K．将重组的pPIC9K—apoAI用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子．转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导，上清液用SDS-PAGE检测，有明显的rApoAI表达．经Phenyl—sepharose 6(Fast Flow)疏水层析柱和Sephadex G-50(coarse)分子筛层析，得到rApoAI蛋白纯品．经Western blotting，N末端氮基酸顺序测定证明，毕赤氏酵母表达的rApoAI与人血浆提取的ApoAI基本一致．     

人载脂蛋白基因αpoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达

将PCR扩增得到的αpoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3．5K，重组的pPIC3．5K-αpoAⅠ用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子，再通过PCR鉴定证实口αpoAⅠ基因已整合到染色体上．其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导，收集细胞裂解后，用SDS-PAGE与Western blotting检测，证明胞内有明显的rApoAⅠ表达，其分子质量与人血浆提取的ApoAⅠ相同．     

求解两人博弈纳什平衡问题的定制临近点算法

针对一类不允许校正的两人轮流博弈纳什平衡问题,提出一种定制临近点分裂算法.该算法可用于模拟一种实际博弈活动:参与博弈的两个局中人轮流决策,且在一轮博弈中,每位局中人综合考虑对手上一轮与本轮所给出的决策,根据最优响应规则做出自己的相应决策.在一定假设条件下证明定制临近点算法全局地收敛到所考虑博弈的纳什平衡,数值算例验证了算法的有效性.     

人源程序性死亡配体PD-L2蛋白的原核表达与抗血清制备

利用原核表达系统获得包涵体表达形式的重组蛋白h PD-L220~123(Ig V结构域)和h PD-L220~208(Ig V结构域和Ig C结构域);将重组蛋白利用Ni-NTA柱亲和层析纯化与复性后,作为免疫原免疫Balb/c雌性小鼠制备鼠抗人的多抗血清,经ELISA法检测其效价均达到1∶106;Western-blot实验结果表明,制备的多抗血清均能特异性识别h PD-L2蛋白.以制备的多抗血清进行IHC实验评估与鉴定,结果显示:以h PD-L220~123重组蛋白为免疫原制备的多抗血清阳性较弱且定位模糊,以h PD-L220~208重组蛋白为免疫原制备的多抗血清具有很强的膜定位且背景清晰.     

基于自适应Radau伪谱法的再入段轨道设计算法

针对传统Radau伪谱法处理非光滑平面时精度不高和效率不足的缺点,提出了一种基于自适应Radau伪谱算法的再入段轨道设计算法。该算法可以根据状态方程的拟合精度对再入段轨道进行自适应调整。在轨道曲率较高的区域,通过增加区段数量提高计算精度;在轨道曲率较低的区域,通过提高插值多项式的阶次提高计算精度。仿真结果显示,该算法形成的配点分布更为合理,相对传统的Radau算法具有高精度、高效率等优点,求解效果优于传统的Radau伪谱法,可将其应用到再入段轨道优化的工程实际中。      

LC3真核表达载体构建及其在293T细胞中自噬诱导研究

【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle's盐平衡液(Balanced salt solution,EBSS)饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因,并将其插入pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒。将重组质粒转染至人胚肾细胞293T,显微镜观察、Western blot检测GFP-LC3融合蛋白表达情况。对转染细胞进行Earle's盐平衡液饥饿诱导,通过Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成。【结果】成功构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并在293T细胞中成功表达目的蛋白,在进行Earle's盐平衡液饥饿诱导后观察到自噬泡的形成,Western blot检测到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化。【结论】本实验为研究自噬在癌细胞病理进程中的机制提供了实验素材。     

南宋如何保障饮水卫生

正没有自来水的古代,饮用水多取自河流。当时没有重污染的工业,哪怕有一些染坊,在数量和污染的程度上,也极有限。但就算如此,也不表示饮用水可以高枕无忧。实际上,最大的隐患来自于家用的马桶。古代人的家里,马桶可是必要的配备。如何清洗呢?若是直接在无人处倒掉,一来当时的人口密度不低,你倒,我也倒,最后只能让居住区臭气熏天;二来,倒完后,也应该用水清洗,所以一般倒垃圾的地方并不具备这个     

外星地球,你在何方

美国宇航局网站今年4月18日宣布,借助开普勒空间望远镜,科学家首次发现了一颗地球大小,且位于母恒星宜居带中的行星——开普勒-186f。母恒星开普勒-186位于天鹅座,距地球约500光年,这是一颗红矮星,质量约为太阳之半。也许是地球人自觉太过孤单,渴望找到外星伙伴。要想科学地寻觅外星人,而不是寄托于虚无的科幻大片,必须先找到能使外星智慧生物得以诞生、进化和繁衍的栖居地——外星地球。     

来信

正@多家大小姐:在冰桶挑战这个事上,我倒是很关注美国渐冻人关怀协会,一个民间公益组织有这么大的力量组织一流的名人发起一个这么大的活动。最近写了一篇关于美国控枪的文章,看到"美国步枪协会",同样是民间组织,居然有能量左右美国的大选与国家政策,连总统都拿它无可奈何。这真是不可思议。     

侵权人不明建筑物坠物致人损害之受害人救济问题探析

侵权人不明建筑物坠物致人损害的案件屡有发生,《中华人民共和国侵权责任法》第87条规定了受害人有向可能加害的建筑物使用人的补偿请求权,但该条规定对于无辜的可能加害人不公平。在对受害人救济的同时,也给其造成了一定的负担,并且往往救济力度不够。在分析现行立法的不足及理论界相关观点的同时,试图对此问题提出相应的解决办法。