LC3真核表达载体构建及其在293T细胞中自噬诱导研究

【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle's盐平衡液(Balanced salt solution,EBSS)饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因,并将其插入pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒。将重组质粒转染至人胚肾细胞293T,显微镜观察、Western blot检测GFP-LC3融合蛋白表达情况。对转染细胞进行Earle's盐平衡液饥饿诱导,通过Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成。【结果】成功构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并在293T细胞中成功表达目的蛋白,在进行Earle's盐平衡液饥饿诱导后观察到自噬泡的形成,Western blot检测到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化。【结论】本实验为研究自噬在癌细胞病理进程中的机制提供了实验素材。     

南宋如何保障饮水卫生

正没有自来水的古代,饮用水多取自河流。当时没有重污染的工业,哪怕有一些染坊,在数量和污染的程度上,也极有限。但就算如此,也不表示饮用水可以高枕无忧。实际上,最大的隐患来自于家用的马桶。古代人的家里,马桶可是必要的配备。如何清洗呢?若是直接在无人处倒掉,一来当时的人口密度不低,你倒,我也倒,最后只能让居住区臭气熏天;二来,倒完后,也应该用水清洗,所以一般倒垃圾的地方并不具备这个     

外星地球,你在何方

美国宇航局网站今年4月18日宣布,借助开普勒空间望远镜,科学家首次发现了一颗地球大小,且位于母恒星宜居带中的行星——开普勒-186f。母恒星开普勒-186位于天鹅座,距地球约500光年,这是一颗红矮星,质量约为太阳之半。也许是地球人自觉太过孤单,渴望找到外星伙伴。要想科学地寻觅外星人,而不是寄托于虚无的科幻大片,必须先找到能使外星智慧生物得以诞生、进化和繁衍的栖居地——外星地球。     

来信

正@多家大小姐:在冰桶挑战这个事上,我倒是很关注美国渐冻人关怀协会,一个民间公益组织有这么大的力量组织一流的名人发起一个这么大的活动。最近写了一篇关于美国控枪的文章,看到"美国步枪协会",同样是民间组织,居然有能量左右美国的大选与国家政策,连总统都拿它无可奈何。这真是不可思议。     

侵权人不明建筑物坠物致人损害之受害人救济问题探析

侵权人不明建筑物坠物致人损害的案件屡有发生,《中华人民共和国侵权责任法》第87条规定了受害人有向可能加害的建筑物使用人的补偿请求权,但该条规定对于无辜的可能加害人不公平。在对受害人救济的同时,也给其造成了一定的负担,并且往往救济力度不够。在分析现行立法的不足及理论界相关观点的同时,试图对此问题提出相应的解决办法。     

林和平 追梦不怕晚

正已过知天命之年的林和平加入直销从零开始,追梦路上不乏嘲笑和质疑。而最终,林和平以亲身经历向直销人证明:追梦不怕晚,只有肯努力,一切美好的愿景都能实现。很难想象,初入直销时已经年过五旬的林和平会成为安然公司为数不多的六钻奖衔获得者之一。在此之前,林和平从未尝试过投入到任何一种自主商业模式中,一直以来,他只熟悉一件事——把握汽车方向盘,并在很长一段时间内,都对直销颇为反感。     

伏特加政治

正伏特加不但在俄罗斯社会扮演着中心角色,也是理解和解开俄罗斯历史和政治的核心线索。俄罗斯每年死于饮酒的人达到了几十万(目前的人口总数约为1.42亿)。约八成的凶杀案件是凶手在酗酒状态中实施的,一半的死者是在酗酒状态中遇害,每年冬季,又有大量醉酒者在严寒中倒毙。可以说酗酒造成了俄罗斯的人口危机、打架斗殴、家庭暴力、孤儿增加、自杀、高犯罪率、交通事故、生产事故等社     

四则运算学习指南

一、知识梳理1.加、减、乘、除法的意义和各部分关系。(1)加法。意义:把两个数合并成一个数的运算。各部分关系:和=加数+加数,加数=和-另一个加数。(2)减法。意义:已知两个加数的和与其中一个加数,求另一个加数的运算。各部分关系:差=被减数-减数,减数=被减数-差,被减数=减数+差。(3)乘法。意义:求几个相同加数的和的简便运算。各部分关系:积=因数×因数,因数=积÷另一个因数。     

新时代中国共产党人的幸福思想研究

为民族谋复兴、为人民谋幸福是近百年来中国共产党人矢志不渝的奋斗目标。伟大时代孕育伟大思想,中国共产党人立足于马克思主义幸福观,结合人民群众对美好生活的向往,形成了独具中国特色、富有时代价值的幸福思想。研究和把握新时代中国共产党人的幸福思想对实现人民的美好生活、民族的伟大复兴以及世界的和谐稳定具有重要的理论和现实意义。     

中产阶级的标配变迁

中产阶级跟具体的收入金额数目关系其实不大,而是更多地取决于一个人处理生活中涉及金钱的方方面面的能力。英国的《经济学人》杂志和舆观调查网曾发起过一项名为＂美国人最想回到20世纪哪个十年＂的调查,结果显示最受调查者欢迎的是上世纪50年代,有18%的人表示愿意回到那个二战后消费主义、保守主义、冷战思维盛行的经济繁荣时代。而也正是这个时代被经济学家认为是现代社会定义的所谓＂中产阶级＂出现了。