老年人 走出饮用纯牛奶的“误区”

牛奶含有丰富的矿物质及微量元素，蛋白质营养价值极高，而且胆固醇含量低，是一种老幼皆宜的营养保健饮料，特别是纯牛奶更是受到老年人青睐。但在日常生活中。一些老年人在饮用纯奶后却出现腹鸣、胀气、腹泻等乳糖不耐受症状。事实上，老年人在饮用牛奶上存在一定的“误区”。     

近临界水中乳糖尿素树脂胶黏剂的合成

以乳糖代替甲醛与尿素在近临界水中反应,合成了一种类似于脲醛树脂的绿色环保型树脂胶黏剂.以产物粘度为指标,首先对催化剂的种类进行了选择,并在单因素实验的基础上采用响应面分析法对其他实验条件进行了优化.通过对粘度与各影响因子之间的回归方程和响应面图的分析,得到了乳糖-尿素树脂胶黏剂合成的最佳工艺条件:催化剂用量1.71 g...     

B→O blood conversion

To maintain a constant supply of “universal blood type”,or group O red blood cells,has benefit in specialized transfusion condition.In this study, α-galactosidase cDNA was cloned from Catimor coffee bean grown in Hainan island,China,by the RT-PCR method.We have constructed a vector for α-galactosidase cDNA expression and transferred α-galactosidase cDNA into Pichia pastoris GS115 cells by electroporation.The recombinant α-galactosidase(r-α-GalE)was purified by cation ion exchange chromatography.After studying the biochemical characters of r-α-GalE we have succeeded in converting human erythrocytes from group B to group O.The animal experiment showed that transfusion of enzymetically converted group O red blood cells(ECORBC)was perfectly safe.     

Paenibacillus sp.K1 乳糖酶基因bga在乳酸乳球菌中的表达

为了提高乳酸乳球菌利用乳糖的能力,缓解乳糖不耐症,以实验室构建的含有乳糖酶基因的质粒pUC-bga为模板,通过PCR扩增得到乳糖酶基因bga,将其分别与载体pSEC和pMG36e连接,获得重组质粒pSEC-bga和pMG36e-bga,重组质粒分别电转Lactococcus lactis NZ9000和Lactococcus lactis MG1614,并在乳酸乳球菌细胞内实现了活性表达。高压液相色谱（HPLC）分析其对培养基中乳糖的利用能力,结果重组菌L.lactis NZ9000-Bga对乳糖的利用能力比对照菌株高一倍,为生产低乳糖的发酵乳制品奠定了基础。     

联合转导人α1,3-半乳糖苷酶和α1,2-岩藻糖转移酶基因清除猪细胞表面异种抗原

猪细胞表面Galα1-3Galβ1-4GluNAc-R 结构(称为αGal 表位)是引起异种器官移植超急性排斥反应的主要原因, 被称为主要异种抗原, 由α1,3-半乳糖转移酶生成. α1,3-半乳糖苷酶特异性地水解αGal表位末端半乳糖, 可清除这种主要异种抗原; α1,2-岩藻糖转移酶与α1,3-半乳糖转移酶竞争底物的作用也可使Galα1,3-Gal 的生成量降低并阻止α1,3-半乳糖苷酶水解的产物重新生成Galα1,3-Gal, 也具有清除主要异种抗原的作用. 以猪胚胎成纤维细胞为靶细胞, 联合转导人α1,3-半乳糖苷酶和α1,2-岩藻糖转移酶基因, 获得的转基因细胞异种抗原清除率达84%, 转基因细胞染色体数目和形态正常, 为进一步获得低αGal 抗原的体细胞克隆猪奠定了基础.     

枸杞多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的基因表达谱的影响

为了探讨枸杞多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的药理作用,利用Illumina基因芯片研究使用枸杞多糖灌胃的衰老模型小鼠的基因差异表达情况．实验表明D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型是可靠的衰老实验动物模型．通过分析找到了枸杞多糖在延缓衰老、抗氧化、降血糖、调节免疫、抗肿瘤、降血脂等方面有影响的相关基因．     

用基因重组α-半乳糖苷酶进行B→O血型改造

α-半乳糖苷酶是进行B→O血型改造的工具酶. 采用RT-PCR方法, 从中国海南Catimor咖啡豆中克隆了全长1.1 kb的α-半乳糖苷酶cDNA, 并构建了其表达载体. 电穿孔法将载体导入毕赤酵母GS115细胞, 筛选出重组α-半乳糖苷酶菌株. 离子交换层析纯化出α-半乳糖苷酶, 酶比活性从15 U/mg 提高到28.14 U/mg. 进一步鉴定了酶的生物化学性质, 其K_m = 0.275, V_max = 0.014 mmol·L^-1·min^-1. 据此确定了B→O血型改造的条件: pH 5.5~5.6, 每毫升红细胞使用100 U α-半乳糖苷酶, 26℃, 4 h. 经动物输血实验初步证明, 酶解反应后的通用O型血(enzymatically converted group O red blood cells, ECORBC)是安全的.     

分子动力学模拟探索乳克鲁维酵母来源的β-半乳糖苷酶热变性条件

为了研究乳克鲁维酵母中β-半乳糖苷酶可能的熔解温度,采用分子动力学模拟的方法,分别对4种不同温度条件下(35、50、65、80 ℃)的β-半乳糖苷酶进行了50 ns的计算模拟,分析了酶的构象变化以及酶活性中心的差异。研究在原子水平揭示了β-半乳糖苷酶的温度耐受等关键信息:35 ℃为最适酶活温度,该温度下的β-半乳糖苷酶的整体构象最稳定;该酶在50 ℃时的原子波动性显著增加,表明此温度可能趋近熔解温度临界值;蛋白在大于65 ℃条件下丧失柔性,说明蛋白已经变性;进一步的构象分析发现80 ℃高温会破坏β-D-半乳吡喃糖(GAL)结合位点微环境。     

N-乙酰基乳糖胺的合成

以氨基葡萄糖盐酸盐和半乳糖为原料,选用半乳糖硫苷作为供体与N-乙酰葡萄糖受体反应,合成了1,4-β-N-乙酰基乳糖胺,偶联后产率达到35.4%.     

微生物谷氨酰胺转胺酶的乳糖诱导表达与纯化

对已构建的工程菌株pET22b-MTG/E.coli BL21（DE3）进行质粒酶切和PCR鉴定,优化诱导温度、时间、pH和乳糖浓度等反应条件,采用乳糖自诱导培养基培养重组菌.并将重组菌上清液经凝胶过滤,离子交换及镍柱亲和层析后,对谷氨酰胺转胺酶纯化和SDS-PAGE电泳分析.结果表明：谷氨酰胺转胺酶在28℃,添加乳糖为1.2g/L诱导18 h,pH为7.0,培养11.5 h时升温至50℃诱导1 h,再放至28℃培养,表达效果较好,超过IPTG诱导效果.纯化后酶活为7.5 U/mL,比活力为10.9 U/mg.