肝癌肿瘤抗原SMP——30融合蛋白的表达及纯化

用两种不同的表达载体构建、表达人肝癌肿瘤抗原——衰老标记蛋白-30(SMP-30),并在体外对其表达产物进行纯化和鉴定。PCR方法扩增经SEREX技术筛选出的人肝细胞癌抗原SMF-30羧基末端165个AA的DNA序列,分别与pMAL-C2和pET16b两种表达载体重组后转入相应的宿主菌中诱导表达,并对表达产物进行分离纯化和鉴定。结果克隆的SMP-30基因经DNA测序与已公布的序列相同。pMAL—C2和pET16b两种重组载体分别表达出带麦芽糖结合蛋白和带10个组氨酸的SMP-30融合蛋白,麦芽糖结合蛋白——SMF-30是以可溶性蛋白形式表达,而带组氨酸的SMP-30则以包涵体的形式存在,对表达蛋白质N-末端15个氨基酸进行测序,结果与预期的完全相同。结果说明pMAL—C2表达载体更为适合于SMP-30蛋白质的表达;实验为肿瘤抗原免疫研究打下了基础。     

苯并芘诱发的人支气管癌细胞系p53基因突变的研究

ＢＴ癌系是用苯并芘称在移植到裸鼠皮下的人胎儿支气管内诱发的肿瘤，为了深入了解苯并芘的致癌机理，我们对该癌系中ｐ５３基因的改变进行了系统的研究。结果表明，ＢＴ细胞核内ｐ５３蛋白异常高表达；ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测到第７外显子有异常改变；Ｄ 列分析证实第２４８密码子发生了ＣＧＧ→ＣＴＴ的颠换，所编码的氨基酸由精氨酸变为亮氨到。本实验提示该害变可能是七产芘引起癌变的重要分子基础。     

核转录因子κB与肿瘤坏死因子-α对子宫内膜异位的影响

目的:检测核转录因子(NF-κB)在子宫内膜异位症(EM)患者异位内膜及在位内膜组织中的表达,以及其血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,探讨NF-κB与TNF-α在EM发病机制中的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定TNF-α的表达,免疫组化SP法检测NF-κB的表达情况。结果:子宫内膜异位症(EM)组血清TNF-α含量显著高于对照组(P<0.01),且表达量随病情加重有上升趋势(P<0.05)。EM患者中异位内膜组NF-κB表达强度显著高于在位组及对照组(P<0.01)。结论:NF-κB与TNF-α在EM患者异位内膜中的异常高表达与EM的发病有密切关系。     

人肝癌HepG2细胞异质性亚系的建立及生物学行为初探

目的：从人肝癌细胞株HepG2母系克隆分离异质性亚系，探讨肝癌异质性机理。方法：应用有限稀释法对培养人肝癌细胞株HepG2进行单细胞克隆分离异质性亚系，并应用细胞计数法、流式细胞仪检测其细胞周期和DNA含量，MTT法检测其对不同抗癌药物敏感性，同时应用裸鼠脾种植肝转移在体实验模型探讨其生物学行为的差异。结果：分离到HepG2—D3及HepG2—F4两个细胞亚系。HepG2—F4亚系细胞呈长梭形，体外增殖能力强，但脾脏内种植后不成瘤，不转移(0／10)；HepG2—D3亚系细胞呈多角形、多突起，脾脏内种植成瘤率高(10／10)，并在肝脏形成广泛转移(10／10)。结论：从人肝癌细胞株HepG2母系成功分离建立了两个异质性细胞亚系，两在形态学、增殖能力及其对不同抗癌药物敏感性、成瘤和转移能力方面均存在差异，该亚系可为进一步研究肝癌异质性尤其是转移的确切机制提供良好的素材。     

一种新的咪唑通过AMPK/mTOR途径诱导肿瘤细胞自噬

自噬与肿瘤的发生有着密切的关系.通过防止受损蛋白质和细胞器的毒性积累,自噬限制氧化应激、慢性组织损伤和致癌信号传导,抑制癌症的发生,这表明了自噬激活在癌症预防和治疗中的作用.研究发现一种新的咪唑,命名为NO.143.利用胰腺癌细胞PANC-1为模型,用MTS检测不同浓度NO.143对细胞活力的影响,共聚焦显微镜观察自噬荧光点,Western blot检测自噬相关蛋白LC3B、ATG13、p62的表达情况,以及AMPK/mTOR信号通路相关蛋白的表达情况.结果表明,NO.143呈现浓度依赖性地抑制肿瘤细胞的增殖. NO.143能够明显增加细胞中自噬荧光斑点、LC3B表达、ATG13的含量和p62的降解,表明NO.143能够显著上调肿瘤细胞的自噬.进一步研究显示,NO.143能够增加AMPKα的磷酸化水平,降低哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和S6的磷酸化水平.相反的,在抑制AMPKα活性后,这种现象发生逆转.这些结果都可能表明NO.143通过AMPK/mTOR信号传导途径诱导肿瘤自噬,抑制肿瘤细胞的增殖.     

来源于上皮的肺肿瘤病理学分类及其形态学特征

最近许多跨国制药公司及研究机构,纷纷到中国大陆开设研究机构,随着中国GLP的实施,一些机构更是直接把临床前实验外包给中国GLP实验室。中国在毒理学、检验学、动物实验技术方面给客户留下深刻的印象,而病理学作为一个重要的临床前研究手段,还存在明显差距。目前很多在FDA申报的新药的病理学评价,主要是委托给欧美的专业的病理实验室进行,或者由委托方自己的病理医生进行,目前中国大陆得到国际上认可的病理专家几乎没有。分析原因如下：     

新疆北疆地区临床型乳房炎病原细菌的分离鉴定

旨在调查新疆北疆地区奶牛乳房炎高发季节细菌性乳房炎病原菌种类,为该病的药物防治及免疫学防治提供科学依据。选择新疆北疆14个规模化牛场共采集623份临床型乳房炎奶样进行了细菌分离鉴定,结果显示,分离得到468株细菌,其中兼性厌氧革兰氏阴性杆菌占25．2％;链球菌占22．6％;葡萄球菌和微球菌52．2％。     

多糖抗肿瘤作用机制研究进展

多糖广泛存在于动植物体内,含量丰富。近年来,其低毒性、高活性的药理作用越来越受到人们关注,尤其在抗肿瘤方面多糖功效特别显著。由于多糖抗肿瘤机制也是目前研究重点,所以就多糖的抗肿瘤机制进行了深入探讨。     

运动疗法对膝骨性关节炎患者关节滑液中细胞因子的影响

目的:观察运动疗法对膝骨性关节炎(KOA)患者关节滑液中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)含量的影响,探讨其治疗骨性关节炎的作用机制。方法:选择KOA患者80例,随机分为治疗组和对照组,各40例,治疗组患者口服双氯芬酸钠,同时进行运动疗法治疗,对照组患者口服双氯芬酸钠治疗,治疗4周。分别于治疗前后检测两组患者膝关节滑液中TNF-α、hs-CRP和MMP-3的含量。结果:治疗后,两组患者膝关节滑液中TNF-α、hs-CRP和MMP-3水平均较治疗前显著下降(P<0.01),治疗组患者膝关节滑液中TNF-α、hs-CRP和MMP-3含量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:运动疗法能够降低KOA患者关节滑液中TNF-α、hs-CRP和MMP-3的水平,抑制炎症因子对关节软骨的破坏,从而延缓关节软骨退变的进程。     

水冷效应对微波热疗有效加热体积影响的仿真分析

根据微波偶极子辐射模型和生物介质热传导方程,运用数值计算方法比较了微波偶极子辐射器在有、无水冷和不同冷却水温条件下生物介质中的有效加热体积（定义为温度在４１～４５℃范围的体积）。仿真研究表明,水冷可改善微波偶极子辐射热区温度分布,使其有效治疗体积比无水冷时增加（约３９％）。降低冷却水温（例如从１２℃降至４℃）,则相应的有效治疗体积进一步增加（约３３％）。若采取先用小功率、无水冷加热,后用大功率有循