烟碱乙酰胆碱受体序列的比较统计分析:受体的分子识别从头法研究

烟碱乙酰胆碱受体(nAChRs)不仅是医药研究领域的重要靶标,也是目前农业领域中广泛使用的新烟碱类杀虫剂(neonicotinoids)的作用靶标.新烟碱杀虫剂能选择性地作用于昆虫,而对脊椎动物毒性较低.这种不同种属     

早期营养不良对SD大鼠海马AchE和ChAT表达的影响

目的探讨生命早期营养不良对21天雄性sD大鼠中枢AchE和ChAT的影响。方法从妊娠晚期到哺乳期末给予母鼠半量饲料,造成子鼠营养不良,取哺乳期末雄性子鼠脑海马组织进行测量。结果免疫组化结果示：实验组海马CA3区ChAT光密度低于对照组（P〈0．05）,在CA!区无差异（P〉0．05）;而两纽间CAl和CA3区AchE光密度均无差异（P〉0．05）;RT—PCR示：实验组海马ChAT、AchEmRNA少于对照组（P〈0．05）。结论早期营养不良能导致子鼠海马及中枢胆碱能系统发育障碍,可能会影响成年后大鼠学习记忆能力。     

介孔二氧化硅薄膜固定乙酰胆碱酯酶生物传感器

酸性条件下, 以表面活性剂 F127为模板剂, 正硅酸乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷为硅源, 在ITO导电玻璃上制备出三维立方结构的氨基功能化介孔二氧化硅薄膜, 然后采用浸渍的方式将乙酰胆碱酯酶和细胞色素c组装固定到介孔薄膜的孔道中, 制备了一种电流型生物传感器. 研究结果表明, 组装后的介孔薄膜具有很好的三维立方结构, 且固定在介孔孔道中的蛋白质和酶分子保持很好的生物活性和电化学活性. 以碘化硫代乙酰胆碱为底物, 细胞色素c为电子传递酶介体, 对该生物传感器的传感性能进行了研究. 当有机磷毒剂敌敌畏浓度在1.0×10^-8 ~ 1.0×10^-3 mol/L范围时, 抑制率与其浓度的对数值呈线性关系, 检测下限可达3.1×10^-9 mol/L.     

Biosensors based on acetylcholinesterase immobilized on mesoporous silica thin films

Using tetraethoxysilane and 3-aminopropyltriethoxysilane as the silica sources, amino-functionalized mesoporous silica thin films with 3-dimensional cubic structure have been deposited on conducting ITO substrate in the presence of surfactant F127 templates under acid conditions. The acetylcholinesterase （AchE） and cytochrome c （Cyt c） were incorporated into the pores of mesoporous thin films, and an amperometric biosensor was obtained. After adsorption of AchE and Cyt c, the ordered cubic structure of mesoporous silica and the bioactivities and electrochemical activities of the immobilized protein and enzyme molecules were retained. The sensor properties of the biosensor were investigated by using acetylthiocholine iodide as the substrate and Cyt c as the electron transfer mediator. The inhibition versus the logarithm of concentration was found to be linear to organophosphorus pesticide dichlorvos over the concentration ranges of 1.0×10-8 mol/L to 1.0×10-3 mol/L with the detection limit of 3.1×10^-9 mol/L.     

绿色荧光蛋白标记的NTE活性域表达载体的构建及表达 

利用含有特定限制性内切酶识别位点的引物，通过聚合酶链式反应扩增出人神经病靶标酯酶活性域的编码序列，经T载体克隆测序正确后，双酶切回收特异片段定向插入到增强型绿色荧光表达载体pEGFPN3中，通过酶切反应鉴定，构建了绿色荧光蛋白标记的神经病靶标酯酶活性域的融合表达载体pNESTEGFP。采用脂质体转染的方法将其转染到人神经瘤母瘤细胞SHSY5Y中，用荧光显微镜观察发现神经病靶标酯酶活性域分布于细胞质中，而且没有导致内质网膜的聚集，表明表达载体成功构建和表达。