孢子诱变菌株CJL990灵芝过氧化物酶和酯酶同工酶的研究

长白山野生灵芝（Gamoderma lucidum)通过组织分离获得的灵芝CL988菌株经60Coγ射线与紫外线交替累积诱变获得菌丝高长速灵芝菌株CJL990（已经中国科学院微生物研究所鉴定）,本文探讨了供试与诱变灵芝菌株的过氧化物酶和酯酶同工酶的电泳分析,进一步确定它们的亲缘关系和差异,结果表明：（1）灵芝CL988菌株和灵芝CJL990菌株,具有灵芝的某些共同的遗传和生物学特性,但他们在酶带条数RF值尚有差异,说明诱变灵芝菌株遗传基因有所改变;(2)两种灵芝的菌丝体的EST和POD同工酶谱比较稳定,完全可以作为鉴定灵芝种类菌属变异的科学依据。     

介孔二氧化硅薄膜固定乙酰胆碱酯酶生物传感器

酸性条件下, 以表面活性剂 F127为模板剂, 正硅酸乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷为硅源, 在ITO导电玻璃上制备出三维立方结构的氨基功能化介孔二氧化硅薄膜, 然后采用浸渍的方式将乙酰胆碱酯酶和细胞色素c组装固定到介孔薄膜的孔道中, 制备了一种电流型生物传感器. 研究结果表明, 组装后的介孔薄膜具有很好的三维立方结构, 且固定在介孔孔道中的蛋白质和酶分子保持很好的生物活性和电化学活性. 以碘化硫代乙酰胆碱为底物, 细胞色素c为电子传递酶介体, 对该生物传感器的传感性能进行了研究. 当有机磷毒剂敌敌畏浓度在1.0×10^-8 ~ 1.0×10^-3 mol/L范围时, 抑制率与其浓度的对数值呈线性关系, 检测下限可达3.1×10^-9 mol/L.     

胆碱抑酯酶制剂用于局部静脉麻醉20例临床分析

目的　研究胆碱抑酯酶制剂用于局部静脉麻醉临床疗效.方法　将临床外科手术患者20例随机分为2组,实验组10例,使用新斯的明和利多卡因复合剂.单纯利多卡因组10例,为对照组.监测患者的心率、血氧饱和度、副作用,观察肢体痛觉、阻滞和恢复运动神经的时间等.结果　胆碱抑酯酶制剂用于局部静脉麻醉显效时间明显缩小(P<0.05),作用时间延长(P<0.05),患者手术期间心率、血氧饱和度无明显变化,也无副作用.结论　胆碱抑酯酶制剂用于局部静脉麻醉可明显缩短麻醉的显效时间,延长麻醉的作用时间,且生命体征平稳,无副作用.     

阿魏酸酯酶产生菌的培养条件优化

通过均匀设计法和二次多项式逐步回归,对产阿魏酸酯酶的培养基配方进行优化,得出优化的培养基配方(质量分数):0.30%KH2PO4,0.60%Na2HPO4.7H2O,0.01%NaCl,0.80%酵母粉,1.33%麦糟.在此基础上,用单因素法考察发酵条件对产酶的影响,确定最佳条件:初始pH值为6.0,培养温度为28℃,摇床转速为210 r.min-1,发酵时间为68 h,装液量为75 mL,接种量为5%,麦糟粒径为0.054 mm.采用优化的培养基组分进行最优发酵培养,优化后的阿魏酸酯酶酶活达到119.36μkat.L-1,比优化前提高了32倍.     

五味子萃取物对去卵巢小鼠行为习得及海马AChE活性的影响

探讨五味子改善去卵巢小鼠学习能力的有效化学部位及相关的作用途径.采用溶剂极性递增法萃取分离五味子的醇提物,小鼠卵巢摘除6周后灌胃同等剂量的五味子萃取物,三等分辐射式迷宫检测小鼠的行为习得能力,并测定小鼠海马乙酰胆碱酯酶的活性.结果显示,去卵巢使小鼠每日的正确反应率和达标率明显降低(P0.05,P0.01),且海马中AChE的活性降低(P0.05);苯甲酸雌二醇、五味子正丁醇萃取物及乙醇萃取物均能明显提高去卵巢小鼠的正确反应率和达标率(P0.05,P0.01),而苯甲酸雌二醇和五味子正丁醇萃取物显著提高去卵巢小鼠海马AChE的活性(P0.05,P0.01),提示五味子正丁醇萃取物及乙醇萃取物均能显著提高去卵巢小鼠的学习能力,其中五味子正丁醇萃取物的功效优于乙醇萃取物,可能是五味子改善学习记忆的主要有效部位,其作用的途径可能与胆碱能神经系统相关.     

蕨类植物丙酮提取物对乙酰胆碱酯酶活性抑制作用的研究

目的 对采自浙江天目山的40 种蕨类植物丙酮提取物进行乙酰胆碱酯酶活性抑制作用的研究.方法 采用乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选模型.结果 在供试质量浓度在1 mg/mL时,40 种植物的丙酮提取物均具有明显的的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中假长尾复叶耳蕨、假蹄盖蕨和延羽卵果蕨等11种蕨类植物表现出较强的抑制活性,抑制率均大于90%,其余大部分植物的抑制率均大于60%.而在供试质量浓度在0.025 mg/mL时,只有少数植物表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中虎尾铁角蕨的抑制率为(65.36 ± 1.65%),蜈松草的抑制率为(53.30 ± 3.32%),其余大部分植物的抑制活性均小于50%,甚至有些植物提取物不仅对乙酰胆碱酯酶没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用.结论 假长尾复叶耳蕨等蕨类植物丙酮提取物的乙酰胆碱酯酶抑制作用值得进一步研究.     

多种形式酯酶总活力的混合底物分光光度测定法

在醋酸－α－萘酯测定酯酶总活力方法的基础上，增加醋酸－β－萘酯，两种底物以２：１混合，以聚乙烯吡咯啉酮为底物乳液的稳定剂，研究了稳定剂用量及底物，产物的稀释稳定性条件，建立了一种用混合底物测多种形式酯酶总活力的新方法。