蝾螺(Turbo cornutus Solander)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究

以蝾螺内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG 200分子筛柱层析和两次DEAE SephadexA 50离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳单一纯的N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为1448U·mg-1.酶的紫外特征吸收峰在275nm处,内源荧光发射峰在340nm处.以对 硝基苯 N 乙酰 β D 氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学,结果表明:酶的最适pH为4.5,最适温度为45℃.该酶在pH3.5～6.0区域较稳定,而在pH>7能很快失活;在40℃以下处理30min,酶活力保持稳定,高于40℃,酶稳定性较差,很快失活.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.13mmol·L-1,最大反应速度Vm为17.68μmol·L-1·min-1.     

转录辅因子CBP/p300提高转录因子C/EBP介导的人白细胞介素5(IL-5)基因启动子活性

IL-5主要由Th2类细胞产生, 在过敏性哮喘等过敏性疾病的发生过程中起着关键的作用. 转录辅因子CBP/p300本身具有组蛋白乙酰转移酶活性, 参与许多基因的转录调控过程. 腺病毒E1A癌蛋白能与CBP/p300蛋白结合并抑制其活性. 我们分析了E1A蛋白在IL-5基因启动子/荧光素酶报告基因表达调控中的作用, 结果表明E1A蛋白能抑制PMA/离子霉素激活和转录因子C/EBPβ介导的IL-5基因启动子/荧光素酶报告基因的活性. 而突变体E1AΔ2-36蛋白因不能与CBP/p300蛋白结合而不能抑制IL-5基因启动子/荧光素酶报告基因的表达. 此结果揭示, 组蛋白乙酰转移酶CBP/p300参与IL-5基因启动子活性的调控. 另外, 转录辅因子CBP/p300和转录因子C/EBPβ可以协同地激活IL-5基因启动子/荧光素酶报告基因的表达. 为进一步研究IL-5基因表达调控的机制奠定了基础.     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在儿科疾病中的临床应用

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）是在临床应用最广泛的诊断肾脏病变的酶之一,NAG主要来自近曲小管的溶酶体,尿中含量相对稳定,其排泄异常提示肾脏损害,因此是肾小管损伤的敏感标志物,在很多儿科疾病中可以判断是否有肾脏损害和（或）严重程度。     

N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响

研究了N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌产素的影响,实验探索了N-乙酰氨基葡萄糖添加工艺,在250mL摇瓶发酵过程中培养48h,60h分别添加0.05%,0.15%N-乙酰氨基葡萄糖可使庆大霉素生测效价达2 030U/mL,较对照1 228U/mL提高了65%以上(三次平均基本一致);5L发酵罐试产三批次发酵终结,生测效价平均为1 727U/mL(厡工艺1 097U/mL)提高了57%,效果十分明显.同时测定了发酵过程中菌体代谢各种参数的变化,证明了N-乙酰氨基葡萄糖在绛红小单孢菌生物合成中的促进作用.本方法操作简单,基本不改变原工艺,生产成本低廉,对提高庆大霉素产量效果非常明显.     

有机染料中间体对乙酰氨基苯磺酰氯的合成工艺改进

在乙酰苯胺氯磺酰化合成对乙酰氨基苯磺酰氯的反应工艺中,反应后期加入硫酸钠.探讨了反应物摩尔比、反应温度、时间、溶剂和硫酸钠等因素对产率的影响,确定了最佳原料摩尔比:乙酰苯胺∶氯磺酸=1∶4.3.改进后,氯磺化的收率明显提高,废弃物排放量减小.     

一步法合成多取代2-氨基噻酚衍生物

在碳酸钾作用下, 采用乙酰乙酰胺类化合物与苯硫代异氰酸酯、 溴代乙酸乙酯在N,N-二甲基甲酰胺中反应, 合成了多取代2-氨基噻酚衍生物, 通过核磁共振、 红外光谱及元素分析方法对产物进行表征, 并对该反应机理进行初步探讨.     

负载型硫酸锆催化剂催化合成乙二醇单乙醚乙酸酯

以活性炭为载体,采用浸渍法制备了系列负载型硫酸锆催化剂ZS/AC,用FT-IR、XRD、N2吸附-脱附、EDS等技术对催化剂进行了表征.结果表明,负载量较低时,硫酸锆能很好地分散在载体上;负载量≥40%时,有四水硫酸锆晶相出现.该系列催化剂对乙二醇单乙醚与乙酸的酯化反应有很高的催化活性,且对目标产物乙二醇单乙醚乙酸酯的选择性为100%.在最佳的负载量和反应条件下,乙二醇单乙醚的转化率高达97%,极具工业应用价值.     

相转移催化合成α－三氯代甲基苄原醇乙酸酯

阐述在合成α－三氯代甲基苄原醇乙酸酯及其主要原料α－三氯代甲基苄原醇中，采用相转移催化的基本原理和方法．考察反应时间、原料配比和催化剂用量对α－三氯代甲基苄原醇乙酸酯的影响．在反应时间为５ｈ，原料α－三氯代甲基苄原醇和乙酸酐的摩尔配比为１：１．２，无水醋酸钠催化剂和相转移催化剂（ＰＴＣ４＃）为α－三氯代甲基苄原醇摩尔数１０％时，其α－三氯代甲基苄原醇乙酸酯产率为７６％～８０％．     

脱乙酰几丁质的制备及其对细胞透性和脱乙酰几丁酶活性…

虾壳经盐酸和氢氧化钠处理，高锰酸钾漂白，制得几丁质，几丁质经５０％ＮａＯＨ处理，获得脱乙酰几丁质，制得的脱乙酰几丁质能溶于３％醋酸中。植物离体叶片经不同浓度脱乙酰几个质处理，用电导法和染料结合法，分别测定细胞中电解质和蛋白质的外渗量，用分光光度法测定脱乙酰几丁酶的活性。结果表明，脱乙酰几丁质能使多种植物电解质的外渗量增加，脱乙酰几丁质的浓度愈大，处理的时间愈长，则外渗量增加愈显著。易染赤霉病的小麦     

聚合物相转移催化反应的研究 Ⅳ对氯苯氧基乙酰芳胺的合成

应用聚合物相转移催化法,以对氟苯氧基乙酰氯与芳胺为反应试剂,合成了10个对氯苯氧基乙酰芳胺.研究结果表明,聚合物相转移催化法与文献报道的相比较,有产半高、反应条件温和、分离提纯简便等优点.