乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达

乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用．拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶．通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性．这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义．     

乙肝表面抗原在分泌型毕赤酵母中的表达及纯化

目的对分泌型毕赤酵母中表达乙肝表面抗原并进行亲和层析纯化。方法从已确诊的乙肝患者阳性血清中提取乙肝病毒DNA,PCR扩增乙肝病毒表面抗原编码基因S,将其插入含有仅分泌信号肽序列和6个组氨酸纯化标签的毕赤酵母表达载体pPICZα,成功构建了重组表达载体pPICZα—HBVs。电转化酵母菌株GS115,得到重组乙肝表面抗原S的酵母表达菌株。结果诱导培养基BMMY中甲醇终浓度为1％,诱导表达48h重组蛋白表达量及抗原性达到最高。非变性条件下亲和层析纯化后,薄层扫描分析得到纯度超过95％,表达量约为2mg／L的重组蛋白。结论Western-blot和ELISA分析表明,所得产物为乙肝表面抗原S蛋白,其纯度和产量足以免疫小鼠制备单克隆抗体。     

乙型肝为病毒（HBV）DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游,重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达,用纯化后的重组质粒直接注射用ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼细内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体,ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合。     

乙型肝炎病毒促进肝细胞PD-L1蛋白表达机理

为了研究乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)能否借助肿瘤细胞的抗免疫机制来逃逸机体免疫,利用HBV感染去肝细胞,研究受感染后的肝细胞对宿主免疫应答的变化.通过实时荧光定量PCR的方法分析HBV感染后的肝细胞内Axin和PD-L1的转录水平,发现HBV不影响Axin和PD-L1的转录水平,采用蛋白免疫印迹技术发现HBV能下调肝细胞内Axin蛋白水平,同时上调PD-L1蛋白水平.进一步在细胞内转染表达HBV的组成蛋白的质粒,通过蛋白免疫印迹技术发现HBV的组成蛋白HBx能下调细胞内Axin蛋白的表达.通过数据相关性分析以及泛素化实验发现,Axin能通过增加PD-L1的E3泛素连接酶SPOP的表达,促进PD-L1泛素蛋白酶体降解.进一步对PD-L1的泛素化方式进行探讨,发现Axin促进PD-L1的K48依赖的泛素化降解作用.结果表明,HBV可能通过HBx下调Axin和SPOP蛋白水平,抑制PD-L1泛素化降解,进而逃逸宿主免疫应答.本研究揭示了HBV免疫逃逸新机制,为治疗HBV奠定了新的基础,在一定程度上推动了抗HBV药物开发.     

大学新生乙肝表面抗原携带情况分析

通过对大学新生进行肝功和乙肝表面抗原的检测，掌握大学生中乙肝病毒的感染状况，以便采取切实可行的预防措施和保护未受感染的人，从而促进大学生顺利成才和健康水平的提高。     

应用PCR法检测庚型肝炎病毒感染

应用逆转录套式ＰＣＲ法检测了４８例丙型肝炎、２６例乙型肝炎及１２例甲乙丙丁戊型肝炎病毒感染标志均阴性的肝炎患者血清中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ，结果表明我国肝炎患者中存在ＨＧＶ感染；ＨＧＶ可单独感染或与其它肝炎病毒混合感染，丙型肝炎患者中，ＨＧＶＲＮＡ的检出率为１０．４％，乙型肝炎患者中的检出率为３．８％，而在甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性的肝炎患者中的检出率为３３．３％，ＨＧＶ与其他肝炎病毒的混合感染可加重肝脏的损害，ＨＧＶ感染是甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性肝炎的重要病因之一     

4955名献血者抗-HCV阳性调查

本文对吉林省辽源地区所属市、县4955名献血者进行抗-HCV检测。调查结果表明辽源地区抗-HCV阳性率1.59％。其中ALT正常献血者阳性率1.29％,ALT升高(30～200单位)献血者阳性率为15.97％。因此人们要对HCV引起重视,加强对HCV的防治工作,切断传播途径,管理好传染源,做好易感人群的保护,以减少疾病的发生,控制HCV传播。     

武威地区乙型病毒性肝炎抗原抗体与ABO血型关系的探讨

探讨武威地区乙型病毒型肝炎抗原抗体与ABO血型的相关性。统计分析武威市凉州医院2013年3月~2014年5月住院病人HBsAg阳性患者446例和HBsAb阳性人群487例,按A、B、O、AB血型分组,并以健康体检人群531例作为对照组进行统计学分析。HBsAg组和对照组相比,χ~2=8.79,P0.05,说明两组之间比较差异有统计学意义;HBsAb组和对照组相比,χ~2=1.02,P0.05,说明两组之间相比差异无统计学意义;威武地区HBsAg阳性与ABO血型有相关性,O型血和A型血人患乙型肝炎几率较大;HBsAb的获得与ABO血型无相关性;HBsAg组和HBsAb组的ABO血型分布特点为:OABAB。