CpG ODN增强rHBsAg免疫小鼠抗体产生及淋巴细胞增殖效应

目的：探讨合成含CpG基序的寡核苷酸（CpG ODN）对重组乙型肝炎表面抗原（rHBsAg ）增强小鼠特异性抗体产生及淋巴细胞增殖反应的效应.方法：采用BaIb/c小鼠作为免疫实验动物,经后腿胫骨前肌免疫2次,ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）效价;3H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖反应.结果：加CpG ODN组的抗-HBs效价较rHBsAg组明显增高,且维持时间长;淋巴细胞增殖反应显著增强.结论：CpG ODN对小鼠抗-HBs产生具有明显的增强作用,且可以有效刺激小鼠淋巴细胞的增殖反应.     

高免蛋黄抗体中和雏鸭肝炎病毒(DHV)的效价测定

用鸭胚测定半数致死量并进行中和试验，测定了用雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)免疫蛋鸭收获的鸭蛋所制成的蛋黄抗体的滴度．结果表明，雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)的半数致死量为3．50，该毒株的高免蛋黄抗体以1：532稀释可保护50％的鸭胚免于死亡；病毒对照组全部死亡；空白对照组全部存活．该雏鸭病毒性肝炎高免蛋黄抗体滴度较高，可用于预防和治疗雏鸭病毒性肝炎。     

各种病毒性肝炎患者中庚型肝炎病毒感染状况探讨

目的：探讨各种病毒性肝炎中庚型肝炎（HGV）感染状况及其致病性．方法：采用ELISA方法对111名不同年龄、不同性别的病毒性肝炎患者进行血清中抗-HGV、抗～HAVIGM、HBV—M、抗-HCV、抗-HEV检测．结果：庚型肝炎病毒多以重叠感染为主．结论：HGV可持续存在，重叠感染不加重病情，反而减轻．     

人类乙型肝炎样病毒核心蛋白中第7位疏水性氨基酸重复肚段区域的突变可以抑制病毒核衣壳的组装

人类乙型肝炎病毒的核衣壳由核心蛋白的二聚体所组成．但是,核心蛋白亚单位与亚单位之间相互作用的机制至今尚不清楚．研究发现,在人类乙型肝炎样病毒──土拨鼠肝炎病毒（WHV）核心蛋白的氨基端,存在着4个保守的疏水氨基酸残基（氨基酸位置101～102）．它们分别是亮氨酸101,亮氨酸108,缬氨酸115和苯丙氨酸122．这4个疏水氨基酸残基以每隔6个氨基酸残基而重复出现1次．它们被称为“第7位疏水性氨基酸重复肽段（hhr）”．由于蛋白质中的疏水键往往在蛋白质的相互作用中起重要作用,因此就在培养细胞系统中研究WHV核心蛋白的hhr区域在…     

水芹提取物抗鸭乙型肝炎病毒机理的研究

水芹(SQ;拉丁名为Oenanthe javanica)为传统的中草药,属于伞型科植物,全草入药.其水煎剂具有明显的退黄降酶作用.将水芹全草以水醇法提取物用于抗鸭乙型肝炎病毒(Duck hepatitis B virus DHBV)的研究,体内外实验对 DHBV均有明显的抑制作用,为了进一步阐明SQ抗DHBV的作用机理,本文采用 DHBV-DNA聚合酶(DNA polymerase DNAP)活性的体内外测定方法进行了实验研究.现总结报道如下:     

丙肝病毒全基因组cDNA克隆侵染细胞培养体系的建立

以含有丙肝病毒全基因组cDNA的重组质粒(pHCV)为材料, 通过基因转染、重组痘病毒辅助使之在HeLa细胞中表达HCV病毒体, 建立了一种新的HCV体外细胞培养系统. 采用RT-PCR, 荧光定量RT-PCR, 链特异性RT-PCR, 免疫印迹, 免疫电子显微镜和电子显微镜负染技术跟踪检测HCV的增殖效率, 结果显示, 该培养体系中有HCV正链RNA的合成和HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达, 并组装成直径约47 nm的HCV病毒体, 病毒体可被偶联有胶体金的抗HCV结构蛋白E2的单抗标记; 该体系产生的HCV病毒体滴度达107基因拷贝/mL, 远远高于病人血清中的HCV基因拷贝数, 也高于迄今报道的任何一种HCV细胞培养体系的病毒滴度. 检测结果证明, 转染细胞裂解上清中的HCV病毒体可以感染肝癌细胞系Huh7, 并在感染细胞中增殖和合成负链RNA中间体, 病毒滴度达106基因拷贝/mL.     

普通棉耳狨猴中乙型流感病毒的分离和鉴定

乙型流感病毒是引起人类局部流行性感冒的重要病原体，其起源和自然储存宿主目前仍不清楚。1999年夏季在某动物中心饲养的普通棉耳绒猴（Callithrix jacchus）群体中爆发了以呼吸道症状为主的急性传染病，死亡比率高达1／3。通过对死亡狨猴肺组织匀浆接种鸡胚和MDCK细胞的分离培养，分离出病毒。双份血清的红细胞凝集抑制试验证实，此分离株为此次狨猴群体感染流行的病原体。通过甲型和乙型流感病毒标准血清鉴定，证实该分离株为乙型流感病毒，命名为B/marmoset/China/1/99。     

微小隐孢子虫表面抗原CP23DNA疫苗免疫山羊诱导免疫应答及保护性研究

观察微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum)子孢子表面抗原CP 23 DNA疫苗免疫山羊诱导其产生免疫应答和保护性作用。将重组质粒pCR3.1-23经鼻粘免疫怀孕山羊，用ELISA测定IgG和IgA抗体滴度，用C.parvum卵囊经口对其后代攻虫感染。抗CP23抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中，且抗体滴度随免疫时间延长而增高。C.parvum卵囊经口感染后代，试验组山羊后代与对照组相比，卵囊排出数量减少，排出时间缩短，微小隐孢子虫表面蛋白CP 23 DNA疫苗能诱导山羊产生特异性免疫应答并对其后代有一定免疫保护作用。     

乙型肝炎病毒相关肾炎1例

乙肝病毒感染引起的肾炎称为乙型肝炎病毒相关肾炎(hepatitisBvirusassociatedglomer alonephritis,HBV -GN) ,临床上可表现为无症状蛋白尿和(或)血尿、急性肾炎综合征、肾病综合征或肾衰。现将收治确诊的一例表现为肾病综合征的乙型肝炎病毒相关肾炎报告如下 :临床资料患者 ,男 ,35岁 ,因颜面及双下肢浮肿1月余于2001年5月14日入院。患者于1月前因颜面浮肿 ,腰部隐痛 ,尿量减少 ,诊断为肾炎 ,曾用过青霉素及激素等治疗 ,效果不佳 ,为进一步诊治 ,住入我院。既往于1992年因皮肤黄染、恶心、呕吐、腹胀及双下肢水肿 ,诊为“乙型肝炎 ,腹水…     

HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在大肠杆菌中表达、纯化

在大肠杆菌中HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶获得表达并进行纯化.根据NS3与NS4A两者形成异源二聚体的结构要求,并参照文献,通过基因拼接的方法设计了单链NS3/4A丝氨酸蛋白酶的基因.合成相应引物,利用反转录PCR从HCV患者血液中扩增出该蛋白酶的编码基因,克隆入原核表达载体pRSET-A,将重组表达质粒pRSET-A-ns3/4a转化BL211(DE3)大肠杆菌,并诱导表达与纯化.成功地构建了重组表达质粒pRSET-A-ns3/4a;重组质粒转化的BL21工程菌经IPTG诱导表达后,表达产物经SDS-PAGE和western-h1ot证实为NS3/4A丝氨酸蛋白酶,并用镍离子亲和层析方法获得纯化蛋白酶.获得的纯化NS3/4A丝氨酸蛋白酶为建立其酶活性测定系统奠定了基础.