瑞替普酶在乳酸乳球菌中的表达

为建立溶栓药物瑞替普酶(r PA)的乳酸菌表达系统,从实验室前期构建的大肠杆菌表达质粒p ET22b-rpa上扩增出目的基因rpa,将该基因与乳酸菌表达质粒pCYT连接,构建了pCYT-rpa质粒.此外,为提高r PA在乳酸乳球菌NZ9000中的稳定性,同时构建了rpa位于葡萄球菌(Staphylococcal)耐热核酸酶基因nuc下游融合表达的重组质粒pCYT-nuc-rpa.将质粒p CYT-rpa和p CYT-nuc-rpa分别电转化至乳酸乳球菌NZ9000中,经Nisin诱导表达,Western blot结果显示Nuc可提高r PA在乳酸乳球菌中的稳定性,从而增加了rPA在乳酸菌中的表达量.重组r PA及Nuc-rPA在复性后均具有溶栓活性,活性分别为800,U/L和1,000,U/L.     

基于FP1-C24型松下PLC四层电梯的设计

随着科学技术和社会经济的发展,高层建筑已成为现代城市的标志.电梯成为输送人流和物流的交通工具.目前,电梯控制系统主要有3种:继电器控制系统、微机控制系统、PLC控制系统.国内20世纪七八十年代的电梯采用继电器控制系统,可靠性和安全性低,线路复杂.微机控制系统虽然在智能控制方面功能强,但抗干扰性差,设计复杂,维修难.自从80年代后期,PLC控制系统在电梯中得到广泛应用,PLC又称可编程控制器,是以微处理器为基础,综合了计算机技术与自动化技术而开发的新一代工业控制器.它可靠性高,线路简化,维修简单,成为电梯控制中常用的控制方式.该文以松下FP1-C24型PLC为例,对四层电梯控制系统的硬件和软件系统进行了设计,并编制了PLC控制程序,实现了对电梯的上行、下行、呼梯等功能.     

基于nRF24L01的无线温度报警系统设计

【目的】随着社会经济发展,温度检测系统在日常生产和生活中变得越来越重要。为准确检测温度及实现快速报警功能,本研究设计一种基于nRF24L01无线传输模块的温度检测报警系统。【方法】系统通过无线传输方式来实现温度检测和报警功能,整个测温报警系统由主机和从机两部分组成。主机和从机均采用STC89C52RC单片机,从机将DS18B20温度传感器检测到的温度数据通过无线传输方式发送给主机。当检测到的温度超过设定值时,主机部分的单片机就会及时报警。【结果】在单片机电路板上连接好各个模块的接线,烧录完程序后对系统进行测试。系统能快速准确地检测温度,当检测到的温度超过设定值时可迅速报警。【结论】系统具有硬件结构简单、功耗较低、成本低廉等优点,在家居、农业、工业等领域有很好的应用价值。     

水稻碱性几丁质酶基因表达载体pCAMBIA1301-RC24的构建

用限制性内切酶Kpn1从质粒pYA024中切出大小约2．75kb的片段,此片段包含Actin1启动子、NOS终止子、水稻几丁质酶基因．将其插入到表达载体pCAMBIA1301-imp的多克隆位点内,构建成了水稻碱性几丁质酶基因的表达载体．利用液氮冻融法将构建好的表达载体导入发根农杆菌LBA4404中,以用于生物工程下游技术研究．     

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定

刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性,因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析.利用化学合成及聚合酶链式反应(PCR)的方法获得ETI的编码基因,然后用NdeI/SacI酶切并插入载体pET25b ( )中构建重组表达质粒pET25b ( )/ETI .重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG诱导使重组ETI(rETI)过量表达形成包涵体.包涵体经过洗涤、复性及CM离子交换柱纯化,每升培养液可获得14 mgrETI ,其纯度超过92 %.活性测定表明,rETI对凝血酶及尿激酶的活性没有抑制作用,但能显著抑制胰蛋白酶、瑞替普酶及纤溶酶的活性,抑制常数Ki分别为5 .14×10-9,9 .4×10-8和2 .08×10-8mol/L.     

对体育教育专业篮球普修课教学现状的思考

通过对体育教育专业篮球普修课教学目标、教学内容、教学模式以及对学生的成绩评价进行思考和令尊，结合《全国普通高校学校体育教育本科专业课程方案》对培养目标的规定，提出了对体育教育专业篮球普修课的培养目标进行重新定位，优化教学内容、优化教学模式、优化教学手段、优化评价体系，培养出合格的21世纪体育教师。     

指导发现式教学在篮球普修课教学中运用的实验研究

通过实验的方法,将"发现"式的学习理论应用于教学实践。实验表明:实验班的学生在篮球专项技术、操作思维能力、身体素质及运用篮球知识和技术解决问题的能力等方面明显高于对照班。"指导式发现教学"可使初学者尽快地掌握正确的技术动作,缩短技能形成所需要的时间;可使学生在学习技术动作的同时,深入系统地掌握理论知识;可培养学生运用知识进行观察、分析、判断能力,养成主动的学习习惯。     

高效液相色谱法测定复方盐酸普莫卡因乳膏含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方盐酸普莫卡因乳膏含量的方法。方法选用CLC-ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(55∶45,体积比)调节pH值为7.5,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,检测波长为224 nm。结果盐酸普莫卡因在0.212 0~0.903 5 mg/mL范围内浓度与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.63%,RSD为0.53%。结论该法简便、快速、可靠,可用于复方盐酸普莫卡因乳膏的质量控制。     

改良性柑橘果胶通过下调Galectin-3抑制膀胱癌细胞生长

目的 检测改良性柑橘(MCP)对人膀胱癌增殖和生长的抑制作用。方法 MTT检测膀胱癌细胞T24和J82细胞的活性。Western blot 检测T24和J82细胞中凋亡蛋白cv Caspase-3和cv PARP以及Galectin-3蛋白的表达水平。建立膀胱癌T24细胞皮下移植瘤裸鼠模型,灌胃MCP后,比较各组肿瘤重量和体积大小,免疫组化的方法检测各组别的增殖蛋白Ki67和凋亡蛋白cv Caspase-3以及Galectin-3蛋白表达水平的差异性。显微镜观察分析结果。结果 MTT结果证实MCP对人膀胱癌细胞T24和J82细胞活力有抑制作用(P<0.05)。Western blot证实浓度为2.0% 的MCP组别中膀胱癌细胞凋亡蛋白表达明显增高。灌胃MCP对 T24移植瘤荷瘤裸鼠的肿瘤体积和重量均有明显的抑制(P<0.05), 免疫组织化学染色定量分析表示700mg/kg组荷瘤鼠组织内Ki67和Caspase-3证实增殖指数降低(P<0.05), 其潜在靶点Galectin-3表达降低。结论 本课题研究显示MCP对膀胱癌细胞的增殖和存活的显著抑制作用,且Galectin-3表达降低。故MCP作为一种天然的膳食纤维,同样可以作为药物预防和治疗膀胱癌。