固定化酶流动注射化学发光法测定葡萄糖

本文制备了高活性长寿命的固定葡萄氧化酶，并用于流动流射化学发光分析法测定人血清中葡萄糖的含量，结果令人满意，方法的线性范围为０．４－１００μｍ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，在测量条件下血清中的共存物质均不产生干扰，取样量数微升，一分钟内就可得出结果。     

pH值对应用mATP酶法进行梭外肌纤维分型的影响

目的 探讨酸性和碱性预孵育处理，对应用mATP酶法进行梭外肌纤维分型的影响。方法 mATP酶法。结果 ①用pH4．3的预孵育液孵育后，梭外肌纤维可分为Ⅰ，ⅡA，ⅡAB及ⅡB型；pH4．6预孵育后，梭外肌纤维可分为Ⅰ，ⅡA和ⅡB型；pH9．4和pH10．4预孵育液条件下，梭外肌纤维均可分为Ⅰ型和Ⅱ型肌纤维，且Ⅰ型肌纤维的比例略低于酸法。②预孵育液和作用液的pH值随时间的延长均有下降的趋势。结论 用mATP酶法研究梭外肌纤维的分型时应当说明并严格把握预孵育液的pH值。     

金属离子对棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

研究了金属离子对棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（EC3．2,1．52）活力的影响．结果表明：Na^＋、K^＋和Li^＋等金属离子对酶活力没有任何影响；在指定范围内，Mg^2＋和Ca^2＋对酶活力影响不显著；Zn^2＋、Cu^2＋和Al^3＋对该酶有不同程度的抑制作用．进一步研究Cu^2＋和Al^3＋的抑制作用动力学，结果表明：Cu^2＋对该酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为混合型，抑制常数Kt为0．23mmol／L，K1s为1．49mmol／L．Al^3＋对该酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为竞争性类型，抑制常数Kt为6．42mmol／L．     

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定

刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性,因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析.利用化学合成及聚合酶链式反应(PCR)的方法获得ETI的编码基因,然后用NdeI/SacI酶切并插入载体pET25b ( )中构建重组表达质粒pET25b ( )/ETI .重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG诱导使重组ETI(rETI)过量表达形成包涵体.包涵体经过洗涤、复性及CM离子交换柱纯化,每升培养液可获得14 mgrETI ,其纯度超过92 %.活性测定表明,rETI对凝血酶及尿激酶的活性没有抑制作用,但能显著抑制胰蛋白酶、瑞替普酶及纤溶酶的活性,抑制常数Ki分别为5 .14×10-9,9 .4×10-8和2 .08×10-8mol/L.     

绿色木霉纤维素酶酶活力的研究

探讨不同碳源、氮源、无机盐等因素对绿色木零纤维素酶活力的影响，利用滤纸酶活测定法和DNS比色法测定样品中的葡萄糖含量，间接求出酶总活力．得到的最终优化结果为：磷酸二氢钾789．65mg、氯化钴0．80mg、硫酸镁68．25mg、硫酸亚铁0．80mg、硫酸锰0．80mg、麦麸0．58g、稻草粉0．56g、尿素0．57g、硫酸铵0．23g，所测酶活比原培养基提高8％．     

三丁基锡对文蛤消化腺脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响

在实验生态条件下,观察浓度分别为0.1、11、0 ng/L的三丁基锡(TBT)分别对文蛤暴露2、8、20 d以及恢复7 d和20 d后对文蛤消化腺过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)含量的影响.结果显示:TBT对CAT的作用为早期抑制而后没有影响,TBT对超氧化物歧化酶(SOD)以及脂质过氧化的产物丙二醛(MDA)的影响,在暴露后均为显著诱导作用.在恢复实验20 d后,各指标均恢复到对照组相当的水平.该研究结果为文蛤消化腺的SOD活性与MDA含量作为海洋环境有机锡污染监测的潜在生物标志物提供了依据.     

不同生长期凡纳滨对虾肝胰腺NAGase的基本性质变化

凡纳滨对虾[Lifopenaeus vannamei(Boune 1931)]N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl-D-glucosaminidase,简称NAGase,EC3.2.1.52)与周期性蜕壳和生长密切相关.我们研究了凡纳滨对虾肝胰腺中该酶的活力与部分性质在不同生长期的变化,结果表明:在不同生长期该酶活力有较大的变化,幼体虾的酶活力为每mg蛋白40 U,随着虾的生长,酶活力迅速下降,当养殖到第6周时,酶活力下降到每mg蛋白18 U,达到最低点.随后,酶活力随着虾的长大快速增大,当养殖到成虾时,酶活力达到最高值,为每mg蛋白58 U.不同生长期的酶,其最适pH均在5.5～6.0之间,最适温度由原来的34℃改变为37℃,同时测定不同生长期酶的动力学参数(Km、Vm)、酶促反应活化能(Ea)及对Cu2 、Zn2 和Hg2 的敏感性并进行了相应的比较.     

南瓜粉的酶法制备及营养成分分析

用菠萝蛋白酶对南瓜进行酶解,研制生产南瓜粉,实验结果表明: 0.04%菠萝蛋白酶pH 6.35条件下,50℃酶解5 h为最佳酶解条件.并对南瓜粉进行成分分析,其水分、灰分、脂肪、糖类物质、蛋白质、果胶含量分别为8.34%,5.61%,0.41%,58.46%,13.24%,1.82%.另外比较了南瓜粉与灵芝粉和莲子粉中的一些金素元素含量.研究结果为南瓜中有效营养成分的提取和开发利用提供了科学依据.     

几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响

研究了几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响。结果表明：变性剂脲与SDS对果胶酶活力的抑制作用呈现出浓度效应，0．5mmol／L SDS能使酶活力下降95．9％，5mol／L的脲能使果胶酶活力下降95．6％；三种伯醇和丙酮对果胶酶活力具有抑制作用，15％的甲醇、乙醇、正丙醇和丙酮可分别使果胶酶活力下降18．8％、25．5％、36．1％和84．4％；而乙二醇和丙三醇对酶活力的影响表现为激活效应，15％的乙二醇和丙三醇可分别使酶活性提高22．9％和6．9％；Cu^2＋和Fe^3＋对果胶酶活力的抑制作用呈浓度梯度效应，EDTA对酶活力没有影响，说明果胶酶为非金属酶类。     

离子交换色谱流动相组成对核糖核酸酶的折叠影响

用离子交换色谱法（IEC）研究了还原变性核糖核酸酶（RNase A）折叠过程中，复性缓冲液种类及pH值、流动相中脲浓度及盐种类对还原变性核糖核酸酶复性的影响。发现pH为弱碱性，用PBS作为缓冲液能提高复性效率；当流动相中含有2．0mol／L脲时复性产率较高；洗脱剂用NaCl时活性回收率较高。