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目的:进行丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因真核表达载体的构建,并分析其在体外培养的人肝细胞中的表达。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011表达载体中PCR扩增出HCVNS3基因片段,将其与表达载体pcDNA3.1(-)重组,得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3。然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701,以免疫组织化学SP法及Western Blotting检测HCVNS3蛋白的表达。结果:所得到的NS3片段正确,序列正确,所构建的真核质粒成功转染QSG7701细胞并表达蛋白,表达的NS3蛋白相对分子质量为70000。结论:成功构建了丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3,并且该载体在体外培养的人肝细胞中能有效表达特异性HCVNS3蛋白。 相似文献
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通过室内模拟实验,以高压汞灯为光源,研究了γ-六六六(γ-HCH)在雪中的光转化规律,建立了γ-HCH光转化的一级反应动力学方程,考查了γ-HCH光转化的影响因素及反应机理。结果表明,在紫外光作用下,雪中γ-HCH可以发生光转化反应,光转化反应符合一级动力学方程。酸性条件抑制光转化,随酸性的增强抑制作用增强;碱性条件促进光转化。H2O2抑制γ-HCH的光转化,随H2O2浓度增加,抑制作用先减弱后增强。NO-3和Fe3+抑制光转化,抑制作用随浓度增大而增强。HCO-3对光转化的作用不明显。γ-HCH降解产物为四氯环己烯、五氯环己烯、一氯酚、三氯酚,其机理为氯化氢或氯原子的脱除以及羟基自由基的取代。 相似文献
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