甘蔗糖蜜发酵高麦角固醇酵母

采用麦角固醇产量高、生长周期短、有应用潜力的酵母为菌株,以甘蔗糖蜜为培养基,通过正交实验优化发酵条件,并在500 L发酵罐进行中试放大试验.结果表明,培养48 h,麦角固醇含量可达2.39 g/1OOg菌体干重,生物量为1.79 g/lOOmL发酵液.     

酵母双杂交筛选与脱落酸受体相互作用的蛋白质及其重转酵母的验证

脱落酸（abscisic acid,ABA）是一种重要的植物激素,它能使植物适应逆境胁迫,从而调节植物的生长发育状况.现今ABA受体已被公认为RCARs/PYR/PYLs家族蛋白.本实验通过拟南芥为模式植物,利用酵母双杂交系统共转化方法从拟南芥cDNA文库中筛选与RCAR3相互作用的蛋白质,获得多个阳性克隆,从中选取一个与生长素调节相关的基因NIT1的全长cDNA重新转化酵母验证,发现与RCAR3仍然有相互作用,排除了假阳性的可能.从而为下一步研究该基因与RCAR3的相互关系做好了准备.     

酿酒酵母蛋白激酶Sch9的PDK1位点调控C末端磷酸化状态

利用酿酒酵母蛋白激酶Sch9(哺乳动物p70S6k1的同源物)PDK1和PDK2位点点突变的两种突变体,分别进行生长、寿命表型检测及免疫印迹分析实验,发现PDK1位点的磷酸化水平对于Sch9活性起着主导性作用,并且PDK1位点发生去磷酸化会促进C末端高度磷酸化,而PDK1发生磷酸化会抑制C末端的磷酸化.由此说明Sch9上PDK1和PDK2位点是否发生磷酸化除了受到各自上游激酶的调节外,两者之间还存在着一种负调控机制.     

硒酵母中三种含硒馏分的生物活性研究

本文采用超声粉碎硒酵母,将其超速离心所得上清液通过Sephadex—G25分子筛色谱柱,分离得到三个含硒馏分(P_1;P_2;P_3)。用T_3菌生物发光和电子自旋共振(ESR)技术研究了它们对As(Ⅲ)毒性的拮抗作用和对脂质过氧自由基的清除作用。实验结果表明其生物活性大小为P_3>P_1>P_2>Na_2SeO_3,并对三个含硒馏分的结构进行了讨论。     

视网膜母细胞瘤结合蛋白4基因酵母双杂交诱饵载体的构建

视网膜母细胞瘤结合蛋白4(RBBP4)是WD-40蛋白家族的成员之一,其在组蛋白乙酰化、细胞周期进展及肿瘤干细胞的分化等方面具有重要功能,研究与RBBP4互作的新蛋白质和认识RBBP4在疾病包括肿瘤的发生发展过程中的分子机制有重要意义。通过RT-PCR扩增获得了RBBP4基因的CDS序列,经双酶切后与pGBKT7酵母诱饵载体连接构建了pGBKT7-RBBP4载体,再通过双酶切鉴定和测序验证,结果表明此酵母双杂交诱饵载体被成功构建,为后续利用酵母双杂交技术筛选与RBBP4蛋白相互作用的新蛋白提供了参考。     

Cloning， expression and characterization of a nucleoside diphosphate kinase (NDPK) gene from tobacco

Nucleoside diphosphate kinase (NDPK) is a housekeeping enzyme that maintains the intracellular levels of all (d)NTPs used in biosynthesis except ATP. Here we report that a full-length cDNA encoding nucleoside diphosphate kinase (NDPK) was cloned using yeast two-hybrid approach. A tobacco NDPK gene was obtained and designated as NtNDPK1. NtNDPK1 is 704 bp in length and encodes a putative 16.2 kD protein of 148 amino acids. Phylogenic analysis showed that NtNDPK1 is highly homologous to other plant NDPK genes and identified as type I (NDPK1). RNA-gel blot analysis showed that there was no significant difference of NtNDPK1 expression in roots, stems, leaves and buds. And expression of NtNDPK1 was induced by ABA and PEG and repressed by NaCl, but not significantly affected by Paraquat, wounding and low temperature (4℃) treatments, indicating that NtNDPK1 may play a certain role in response to abiotic stress. In vitro phosphorylation assay demonstrated that NtNDPK1 had autophosphorylation activity.     

啤酒酵母废菌吸附处理含铜废水的实验研究

用啤酒酵母废菌吸附水溶液中Cu2+,研究了不同时间、pH值,以及Cu2+浓度和酵母菌浓度条件下,啤酒酵母对Cu2+ 的吸附能力.初步确定了啤酒酵母对Cu2+吸附的最佳组合,即吸附温度为25℃,吸附时间为60 min,起始pH值为5,啤酒酵母的质量浓度为2 g·L-1,Cu2+初始质量浓度为35 mg·L-1,在此条件下啤酒酵母对Cu2+吸附率可达90%,吸附等温曲线符合Langmuir模式.该工艺简单,以废治废,成本低廉,具有良好的应用前景.     

脲引起反相胶束酵母醇脱氢酶的紫外与荧光变化

比较了ＡＯＴ－异辛烷及水相两种体系中脲引起的酵母醇脱氢酶（ＹＡＤＨ）紫外和荧光变化。在水相反应系统中随着脲浓度增加（至３．０ｍｏｌ／Ｌ），酶活性迅速下降并全部失活，构象发生重大改变，２２０ｎｍ处的紫外吸收增加，荧光强度减小，３３６ｎｍ处的荧光峰红移１２ｎｍ至３４８ｎｍ，在Ｒ＝１５的反相胶束体系中，酶浓度相同时ＹＡＤＨ活力相当于水相ＹＡＤＨ的６３％左右，但脲浓度增至３．０ｍｏｌ／Ｌ时ＹＡＤＨ的活力基本无变化，２４０ｎｍ和２７０ｎｍ处的紫外吸收峰、３５７ｎｍ处的荧光发射峰均随着脲浓度的增加有所升高。上述结果表明脲对两种体系中ＹＡＤＨ的分子构象和活力的影响是不同的     

用微生物方法将木糖转化为酒精的研究

用酶异构和酵母发酵法从木糖生产酒精,是阔叶木和草类纤维原料半纤维素利用的一条可行途径。木糖溶液在异构酶的作用下,部分转化为木酮糖。JⅠ和JⅡ这两个酵母菌种利用木酮糖生产酒精较有前途,其中JⅡ的酒精产率可达理论产率的85%以上。甘蔗渣预水解液通过净化、酶异构之后,用JⅠ、JⅡ、Rasse XⅡ和古巴Ⅱ酵母进行发酵,四个菌种都能产生酒精,JⅠ和JⅡ的酒精产量比Rasse XⅡ和古巴Ⅱ高一倍左右。     

啤酒酵母水解提取混合氨基酸及稀土氨基酸配合物的制备

用酸解法(盐酸和硫酸)在有回流装置的反应器置恒温甘油浴装置的条件下水解啤酒酵母,制取混合氨基酸,与稀土化合物反应后,得到稀土氨基酸配合物,盐酸酸解法的特点是向水解液中加入稀土氧化物,中和大部分酸并用赶酸法除去余酸,硫酸酸解法的特点是直接用石灰乳中和水解液中的酸.