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31.
Cytosine deaminase gene ofEscherichia coli strain H-30 was cloned, and its initiation codon of ‘GTG’ was mutated to ‘ATG’ by PCR. Prokaryotic recombinant expression
vector pBV220-CD was constructed. Clone with high enzyme activity were selected by detecting their specific activity of cytosine
deaminase. 5-FC(5-FC, 5-fluorocytosine) could induce the lethal toxicity to cells containing active CD gene. DNA sequence
analysis indicated that there were 16 altered bases and 5 of them resulted in the alteration of amino acids in predicted peptide
by comparing DNA sequence of the clone H-30-CD-11 with high enzyme activity with CD gene reported in Gene Bank. 相似文献
32.
33.
The nuclear capsid protein gene (vp39) ofBombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) was amplified successfully by PCR technique and inserted into pGEM 3zf(+). The 5′ and
3′ terminal area of the amplified vp39 gene were sequenced with silver-staining dideoxy method. Bmvp39 gene was sub-cloned
into the expression vector pRSET-A, and transformed intoE. coli BL21. This gene was highly expressed by IPTG induction. SDS-PAGE analysis showed that the expressed protein is about 38 kd,
and the expressed amount reached maxium in 4 h with IPTG induction.
Supported by the National Natural science Foundation of China and the Doctoral Foundation of Edn carto Committee
Liu Deli: born in 1954, Doctoral Candidate from Huazhong Normal University To whom correspondence should be addressed: (027-7882712-2938) 相似文献
34.
35.
钟劲 《北京大学学报(自然科学版)》1998,34(4):549-553
有限稀释法筛选重组AcNPV病毒钟劲胡美浩1)(北京大学生命科学学院,北京,100871)关键词重组病毒;梯度稀释;筛选;测活中图分类号Q3320引言昆虫杆状病毒表达系统是一高效表达外源基因的表达系统。用于基因工程表达外源基因的AcNPV(autog... 相似文献
36.
莲子叶蛋白体的类型,来源与发育 总被引:2,自引:1,他引:1
莲子叶于发育的10 ̄28d,以不同速率在叶肉细胞中大量积累贮存蛋白,并以不同方式组装许多形态各异、结构不同的蛋白体。按其来源与发育的特点可分4种类型:①粗面球状蛋白体;②光面球状蛋白体;③杯状蛋白体;④淀粉蛋白体。发育顺序是①,②类先形成,③,④类后发生;②类的发育贯穿整个贮存蛋白的积累期,比较了莲与其他植物蛋白体的异同。 相似文献
37.
建立缺陷型重组腺病毒载体介导的胸苷激酶基因治疗系统(Adtk/ACV),进行离休和活体治疗大鼠C6脑胶质瘤研究.将质粒pAdtk与pJM17共转染腺病毒包装细胞──293细胞,同源重组后制备纯化的Adtk并以PCR证实;Adtk对离休C6细胞的杀伤作用随着Adtk滴度和ACV剂量增加而增强,并有旁观者效应,而未转染C6细胞和AdLacZ转染C6细胞均未被杀伤;扫描电镜下见Adtk/ACV处理的细胞呈明显病理改变;ACV可有效杀伤Adtk/C6细胞.在大鼠脑立体定向仪引导下于右额叶接种2×106个C6细胞,分别于第3,6,8和10天原位注射Adtk,同时腹腔注射ACV(100mg/(kg·d-1)),3d组、6d组、8d组大鼠成活期在90d以上,组织学检查未发现肿瘤细胞.10d组成活期(28.5±4.6)d,而C6未治疗组和AdLacZ/ACV治疗组成活期分别为(1.8±3.1)d和(14.0±2.2)d.本文建立的Adtk/ACV在离体和活体水平对大鼠C6脑胶质瘤有强烈的杀伤作用,效果确实,应用方便,ACV价格便宜,有潜在临床应用价值. 相似文献
38.
万士梅 《复旦学报(自然科学版)》1998,37(4):450-454
通过微弹轰击获得的含有bar基因的转基因燕麦植株自交产生转基因后代。利用PCR方法检测bar基因在后代中的传递情况。 相似文献
39.
耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据耐热碱磷酸酯酶基因的酶切图谱和DNA序列,分别在基因的起始密友子和终止密码子设计2个突变引物。引物的5‘端分别带有NdeⅠ和BamHⅠ酶切全点。通过PCR从质粒pTAP118B中扩增获得了FD-TAP基因的全序列。经过酶切将基因亚克隆于高达载体pJLA503。 相似文献
40.
对已筛选出的小麦耐盐细胞系的耐盐稳定性进行有关生理、生化分析。结果表明:耐盐细胞系脯氨酸含量不仅稳定,而且高于对照;SOD活性在耐盐系增加,耐盐系对一定的盐浓度损伤DNA修复能力大于对照系,耐盐系RNA和蛋白质合成量分别是对照的5.4和4.5倍,并对小麦耐盐性的有关问题进行了讨论。 相似文献