大豆分离蛋白水解多肽聚集物的组成及相互作用

研究了大豆分离蛋白（SPI）的枯草杆菌蛋白酶水解产物的聚集作用，以及参与聚集组分的氨基酸组成及其相互作用．十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和SE—HPLC分析显示，SPI的枯草杆菌蛋白酶降解产物大部分为分子质量小于6．5ku的小分子组分，聚集物主要由这些小分子组分组成．聚集物可溶于脲素、盐酸胍或SDS，而难溶于β-巯基乙醇．氨基酸分析显示聚集物中的疏水性氨基酸含量高于SPI．说明疏水相互作用是聚集物形成的主要推动力，氢键、静电引力参与稳定聚集物的结构，而二硫键很少参与聚集物的形成．文中还从蛋白质分子结构的角度，探讨了SPI的枯草杆菌蛋白酶水解多肽的聚集机理．     

不同pH 条件下鳜鱼消化道蛋白酶活性研究

初步研究了不同pH条件下鳜鱼(Sinipercachuatsi)消化道不同部位蛋白酶活性的差异.结果表明鳜鱼消化道不同部位蛋白酶的活性存在较大差异,最适pH也不相同.消化道不同部位蛋白酶的活性强弱顺序为:幽门盲囊>胃>肠前段>肠后段.幽门盲囊的蛋白酶活性最强,明显高于胃、肠前段和肠后段.蛋白酶活性在幽门盲囊的最适pH为8 0～10 4,且在偏碱性条件下有较强的活性;在胃部的最适pH约为2 8,且在偏酸性的条件下活性较高;在肠前段和肠后段的最适pH为9 8.     

南极产低温蛋白酶菌株Marinobacter sp.R2的发酵条件及酶学性质研究

从南极海域沉积物中筛选到一产蛋白酶的菌株R2，经细菌学形态特征鉴定及16S rDNA序列分析鉴定，该菌株属于海杆菌属(Marinobacter)．生长特性研究表明该菌株属于兼性嗜冷菌，其最适生长温度为10～15℃．R2菌株能利用多种碳源产酶，最适产酶温度为20℃．粗酶液经硫酸铵盐析、DEAE cellulose-52柱层析进行初步分离纯化后进行酶学性质的研究．该菌株所分泌蛋白酶的最适作用温度为20℃，最适pH值为9～10，对热敏感．是典型的低温碱性蛋白酶．Ca^2 、Mn^2 、Cu^2 对该蛋白酶有较为明显的激活作用，而Cd^2 、Co^2 则能抑制酶活．高浓度的变性剂、PMSF、AEBSF和EDTA都能抑制该蛋白酶，表明该酶属于丝氨酸蛋白酶，且金属离子对酶活性中心构象有关键性的影响．     

pH对真鲷蛋白酶和淀粉酶活力的影响

应用酶学分析研究不同pH度条件下真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊4个部位蛋白酶和淀粉酶活力的变化.结果表明,真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊蛋白酶的最适pH分别为6.4,7.2,7.6和8.4,淀粉酶的最适pH分别为6.4,8.0,8.0和7.6.     

Effect of NCO-700, an inhibitor of thiol protease,on reactive oxygen production by chemotactic peptide-stimulated rabbit peripheral granulocytes

Summary The specific thiol protease inhibitor, NCO-700, which is related to L-trans-epoxysuccinylpeptides, inhibited oxidant production by chemoattractant-stimulated rabbit polymorphonuclear leukocytes. NCO-700 could also scavenge active oxygen generated from sodium hypochlorite-hydrogen peroxide and hypoxanthine-xanthine oxidase systems.     

细菌和酵母混合培养对细菌蛋白酶活性的影响

本文研究了枯草芽孢杆菌(B.subtilis)分别与3种酵母(Saccharomycescerevisiae,Pichia farinosa,Candida lipolitica)混合培养时对细菌蛋白酶活性的影响。结果表明,在接入的菌种中,当B.subtilis和酵母的细胞数量比为100:1时,啤酒酵母的存在使细菌蛋白酶活性提高1倍;粉状毕赤氏酵母的存在对细菌蛋白酶活性的提高有较小的作用(约25%);而解脂假丝酵母则无影响。当B.sub-tilis和酵母细胞的数量比为10:1时,3种酵母对细菌蛋白酶的活性均有强烈抑制作用。     

Genetic and molecular approaches to synthesis and action of the yeast killer toxin

Summary The K1 killer toxin ofSaccharomyces cerevisiae is a secreted, virally-coded protein lethal to sensitive yeasts. Killer yeasts are immune to the toxin they produce. This killer system has been extensively examined from genetic and molecular perspectives. Here we review the biology of killer yeasts, and examine the synthesis and action of the protein toxin and the immunity component. We summarise the structure of the toxin precursor gene and its protein products, outline the proteolytic processing of the toxin subunits from the precursor, and their passage through the yeast secretory pathway. We then discuss the mode of action of the toxin, its lectin-like interaction with a cell wall glucan, and its probable role in forming channels in the yeast plasma membrane. In addition we describe models of how a toxin precursor species functions as the immunity component, probably by interfering with channel formation. We conclude with a review of the functional domains of the toxin structural gene as determined by site-directed mutagenesis. This work has identified regions associated with glucan binding, toxin activity, and immunity.     

培养基成分对海洋假单胞菌7-11产蛋白酶的影响

对海洋假单胞菌7-11(pseudomonas sp.7-11)产蛋白酶进行了培养基的优化,初步确定了促使蛋白酶产率提高的培养基的配方.经过26℃、140r/min、12 h培养,蛋白酶的相对产量可达201.7 IU/mL,比培养基优化前的26.8 IU/mL提高了646%.     

碱性蛋白酶Alcalase水解WGP制备ISWGPH的研究

本文采用ｐＨ－ｓｔａｔ法测定ＷＧＰ的水解度。正交实验确定了Ａｌｃａｌａｓｅ水解ＷＧＰ的最佳工艺条件为：Ｔ＝５０℃；ｐＨ－８．５；「Ｓ」＝１０％；「Ｅ／Ｓ」＝２４ＡＵ／ｋｇ蛋白质；ｔ＝３００ｍｉｎ。将ＷＧＰ水解物的Ｐ 到４．０，离 离后上清液，经活性碳处理处理和干燥后得到了等电点可溶性ＷＧＰ水解－ＩＳＧＰＨ。     

小分子蛋白酶抑制剂及多肽毒素的研究回顾

对以往小分子蛋白酶抑制剂及多肽毒素的研究成果作一历史性回顾, 重点介绍了Bowman-Birk家族的绿豆胰蛋白酶抑制剂, 对此抑制剂的Lys活性功能区作了解析. 它是双头抑制剂, 有两个功能区, 用蛋白与基因测序、基因表达、突变、肽段合成等手段证实, 其核心结构是一个由两个相连九元环组成的16肽, 与天然14环肽的向日葵抑制剂极类似. 另一深入研究的抑制剂是27肽的天花粉胰蛋白酶抑制剂, 属于南瓜族, 介绍了该家族的基因序列. 多肽毒素的研究包括蝎毒毒素及芋螺毒素. 本文介绍了多种东亚马氏钳蝎新的钾通道毒素, 有的是钙离子依赖的BK或SK钾通道毒素, 有的是电压门控毒素, 有的具有两个不同的功能区, 阐明了它们的构效关系. 表达的重组蝎氯毒素有望用于恶性胶质瘤的治疗. 芋螺毒素分子量小、序列多变、功能广泛, 有更好的应用前景. 从中国南海16种芋螺中纯化了50个结构新的芋螺毒素, 克隆了134个新基因; 确定了3个新超家族, 命名为V, Y, K超家族; 研究发现, 在某些芋螺毒素一级结构中有新的二硫键骨架和二硫键配对、独特的模板(motif)、氨基酸的D型化等; 分析了A超家族的基因组结构, 在内含子的3′端有一非常保守的序列, 可用作引物克隆更多新的芋螺毒素基因; 阐明了个别芋螺毒素的生理功能.