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301.
采用常规方法制备抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的多克隆抗体(Polyc lonal antibody,PcAb)。制备的抗溶藻弧菌(Va)及其外膜蛋白的多克隆抗体(Va-PcAb和Va-OMP-PcAb)的效价达到1∶3200以上,特异性较好,只与Va菌不同菌株反应,与其他弧菌及不同属的菌株没有交叉。同时建立的ELISA、IFIA等免疫学检测方法可应用于生产实践,适应不同的需要。 相似文献
302.
303.
在酸性溶液中,比布列西猩红与蛋白质作用,产生共振光散射(RLS)增强光谱,最大散射峰位于286.0nm,且增强RLS强度在一定范围内与蛋白质浓度呈线性关系.研究了pH、比布列西猩红的浓度及离子强度对RLS强度的影响.人血清白蛋白(HSA)的线性范围为0.02~4.0μg/mL,牛血清白蛋(BSA)0.02-4.5μg/mL,溶菌酶(Lys)为0.02-2.0μg/mL,γ-球蛋白(γ-IgG)为0.0l-7.5μg/mL.测定的检测限(3σ)分别为:16.6ng/mL(HSA),15.7ng/mL(BSA),16.7ng/mL(Lys)和7.5ng/mL(γ-IgG).此方法用于人血清样品测定,结果满意. 相似文献
304.
通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi/o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi/o不能活化,继而抑制Gαi/o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2 )通道.Ca(L)2 通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标.本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响, 以期从Ca(L)2 通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制.急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞.实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组.400 ng/mL PTX加入培养基中.采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L).结果显示:(1)各组 Ca(L)2 通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52.06 %和44.81%(P<0.01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2 通道电导可能增大.Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压向超极化方向移动5.1 mV (P<0.05),半数失活电压向超极化方向移动5.93 mV(P<0.05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2 通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2.42 mV(P>0.05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异.结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi/o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2 通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi/o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2 通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机理可能与其Ca(L)2 通道对Gαi/o-AC-cAMP-PKA-Ca(L)2 通道调控不敏感有关. 相似文献
305.
酶法制取棉籽水解蛋白研究 总被引:2,自引:0,他引:2
酶籽蛋白是一种优质植物蛋白,对棉籽蛋白采用酶法水解,能改善功能特性,研究得出,酶处理的最适参数范围为温度40~45℃,时间5-7h,pH7~8,加酶量2-3%,棉籽水解蛋白DH为17-18时乳化性能较好,DH为13-14时起泡能力较强。 相似文献
306.
采用异硫氰酸胍酚氯仿法分离铁胁迫玉米根总RNA,然后采用寡聚dT 纤维素层析柱法纯化Poly(A) + RNA.用含有XhoI位点的linkerprimer 锚定合成cDNA 第一条链后,采用替代法合成第二条链,接着连接上EcoRIAdapter 以便定向重组到载体上.cDNA 经过XhoI消化和分级分离后,带有XhoI和EcoRI粘性末端的cDNA 定向重组到λZAP表达载体的XhoI和EcoRI位点上.经体外包装,重组的噬菌体转导宿主菌XL1Blue MRF,最终获得滴度为4-5 ×105 pfu/ug 的λZAP 表达cDNA 文库.通过差异筛选法和质膜双向电泳验证了缺铁和加铁条件下cDNA 和质膜蛋白的差异 相似文献
307.
308.
Gerdes HH 《Cellular and molecular life sciences : CMLS》2008,65(18):2777-2780
Vesicular transport is the basic communication mechanism between different compartments in a cell and with the environment.
In this review I discuss the principles of vesicle generation and consumption with particular emphasis on the different types
of coat proteins and the timing of the shedding of the coat proteins from transport containers. In recent years it has become
clear that there are more coat complexes than the classical COPI, COPII and clathrin coats. These additional coats may generate
vesicles that transport cargo in a temporally and/or spatially controlled manner. Work over the last years suggests that GTP
hydrolysis occurs early during vesicle biogenesis, destabilizing the coat perhaps before fission of the vesicle from the donor
membrane occurs. Recent findings imply, however, that tethers at the receiving compartment specifically detect the coat on
vesicle. (Part of a Multi-author Review) 相似文献
309.
高尔基体蛋白是一类定位在高尔基体表面上的螺旋卷曲蛋白家族.目前研究最为广泛的有11种高尔基体蛋白,它们分别定位在高尔基体堆栈不同的部位上.其中有3种定位在高尔基体正面膜囊表面上,高尔基体的反面膜囊表面和高尔基体膜囊边缘表面各定位4种高尔基体蛋白,它们以各自肽链羧基端或以跨膜结构域或与小的GTPase结合锚定到高尔基体膜... 相似文献
310.
在pH2.96的氯乙酸-乙酸纳缓冲溶液中,新水溶性显色剂2-(2,3,5-三氮唑偶氮)-1,8-二羟基-3,6萘二磺酸与蛋白质结合形成复合物,其最大吸收波长位于505.80nm。用光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了一个测定蛋白质的新方法。在505.80nm处,牛蛋白与人蛋白在(0~80)mg/L范围内服从比尔定律。表观摩尔吸光系数为2.15×105L·mol^-1·cm^-1。该方法不仅具有高灵敏度和良好的选择性,而且简便快速。用于人血清样品中总蛋白质的测定,结果满意。 相似文献