CXCR7对HeLa细胞增殖、粘附和侵袭能力的影响

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在肿瘤侵袭、转移过程中起着重要的调控作用.此前认为SDF-1是通过其唯一受体CXCR4来起作用.近年来发现SDF-1还有另一作用受体——CXCR7,SDF-1/CXCR7在部分肿瘤侵袭转移过程中起重要作用,但其在宫颈癌HeLa细胞中的作用目前尚未明确.通过Western blotting检测HeLa细胞中CXCR4和CXCR7的表达,阻断CXCR4或CXCR7后,通过MTT法评价细胞增殖能力,细胞粘附实验评价细胞粘附能力,Transwell实验评价细胞侵袭能力.结果表明,CXCR4和CXCR7在HeLa细胞中表达.阻断CXCR4或CXCR7后,SDF-1诱导的HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附能力均被阻断.结果提示CXCR7在SDF-1诱导HeLa细胞增殖、侵袭和与内皮细胞的粘附过程中起着重要作用,将有望成为治疗宫颈癌转移的新靶点.     

沉默白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染的影响

为了研究藏猪免疫细胞中IL-10基因表达抑制后对RNA病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10基因表达的shRNA干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N-PEI-PEG)通过离子交联法进行分子包装,制备DNA-壳聚糖纳米分子,体外转染藏猪免疫细胞,观察猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)诱导免疫细胞IL-10基因的表达及其增殖感染水平.实验结果表明:与未转染纳米分子或者纳米分子不表达shRNA的空白对照组相比较,shRNA实验组的IL-10基因表达在24～72h内明显抑制(P<0.05),免疫细胞中PRRSV的增殖水平显著下降(P<0.05);同时IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ基因的mRNA水平明显升高(P<0.05).这些提示IL-10的shRNA转染能使免疫细胞的抗感染能力显著增强,甚至可完全抑制PRRSV的复制.     

虫草素和虫草素/双层氢氧化物纳米复合物对HeLa细胞生长抑制

为解决虫草素在体内被腺苷脱氢酶(ADA)快速降解的问题,制备虫草素/LDH复合物,研究其在体内外对虫草素的缓释以及对HeLa细胞的生长抑制作用.结果表明:当虫草素/LDH复合物中虫草素质量浓度为30,60,90μg·mL-1时,复合物对HeLa细胞的生长抑制率分别为52.4%、61.3%、79.6%,与虫草素对照组比较,P<0.01.显微镜观察发现,当虫草素质量浓度60μg·mL-1时,虫草素/LDH复合物使大部分HeLa细胞死亡;虫草素的对照组HeLa细胞死亡较少,但细胞内部明显出现空泡.虫草素/LDH复合物体外释放表明,虫草素插入LDH双层结构之后,使虫草素释放速度明显被降低.对SD大鼠腹腔给药后,虫草素/LDH复合物血药最高质量浓度为82.1μg·mL-1,在药后1.5h出现,虫草素对照组的血药最高质量浓度为75.3μg·mL-1,在给药后1h出现.     

Knockdown of <Emphasis Type="Italic">MRP4</Emphasis> by lentivirus-mediated siRNA improves sensitivity to adriamycin in adriamycin-resistant acute myeloid leukemia cells

Chemotherapy remains the standard treatment for acute myeloid leukemia;however,the emergence of drug resistance is a major hurdle in the successful treatment of leukemia.The expression of multidrug resistance-associated protein 4(MRP4)induces re- sistance in the adriamycin-resistant acute myeloid leukemia cell line,K562/ADR.The aim of this study was to investigate whether knockdown of MRP4 by lentivirus-mediated siRNA could improve the sensitivity of K562/ADR cells to adriamycin.Five lenti- virus-mediated short hairpin RNAs(lv-shRNAs-MRP4)were designed to trigger the gene silencing RNA interference(RNAi) pathway.The efficiency of lentivirus-mediated siRNA infection into K562/ADR cells was determined using fluorescence mi- croscopy to observe lentivirus-mediated GFP expression.MRP4 expression in infected K562/ADR cells was evaluated by real- time PCR and Western blot analysis.The MTS assay was used to measure cell viability and flow cytometry was used to measure apoptosis.The transfection efficiency of K562/ADR cells was over 80 percent.The gene silencing efficacy of lv-shRNA1-MRP4 was superior to the other constructs.Infection of K562/ADR cells with lv-shRNA1-MRP4 led to strong inhibition of MRP4 mRNA and protein expression.Combined treatment with lv-shRNA1-MRP4 and adriamycin decreased cell growth and increased apoptosis compared to treatment with lv-shRNA1-MRP4 or adriamycin alone.These data indicate that in K562/ADR cells MRP4 is involved in drug resistance mechanisms and that lentivirus-mediated knockdown of MRP4 may enhance sensitivity to adriamycin.     

羟基喜树碱联合丝裂霉素诱导人白血病K562细胞凋亡

观察羟基喜树碱与丝裂霉索联合应用对人白血病细胞K562的作用效果,并探讨其机制。不同浓度羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合作用于人白血病细胞K562后,应用台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,计算合用指数（CI）,流式细胞仪（FCM）检测K562细胞凋亡率,吖啶橙（AO）荧光染色和透射电镜观察凋亡形态学变化。结果表明：单独应用时羟基喜树碱和丝裂霉素的IC50分别是8μ/mL和12．5μg/mL,联合应用时IC50下降为4μg/mL（HCPT）和3．6μg/mL（MMC）,CI=0．78,为协同效应。羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合应用均可诱导K562细胞凋亡。2种药物联合应用时的凋亡率高于各自单独用药。羟基喜树碱与丝裂霉素联合应用可以通过共同诱导细胞凋亡。协同抑制人白血病细胞生长。     

环境中有机磷酸酯阻燃剂（TDCP、TECP、TCPP）对人胚肾细胞（HEK293）的影响(英)

水环境中的微污染物有机磷酸酯如三(2-氯乙基)磷酸酯(TCEP)、三(2-氯-异丙基)磷酸酯(TCPP)和三(1,3-二氯丙基)磷酸酯(TDCP)主要用作聚氨酯泡沫塑料的阻燃剂。物理、化学和生物处理很难完全消除这些污染物。本研究的目的是研究阻燃剂在环境水平和较高浓度下对人细胞系的细胞毒性和细胞周期效应。结果表明,在浓度为0.001 mg/L和0.01mg/L时,只有TDCP具有轻微的细胞毒性,而当这三种化学物质浓度100 mg/L以上时对细胞毒性有显著的诱导作用。TCEP和TCPP的EC50分别为276.8 mg/L和58.4mg/L。三种药物均能抑制CDK 4的表达,TDCP能增加CDK 2和cyclin E的表达,而TCEP和TCPP在CDK 2和cyclin E的表达上表现出自差现象。TDCP和TCEP使细胞数量减少,细胞形态发生改变。可见三种化学物质对HEK 293细胞的杀伤作用可能是通过抑制CDK 4调节蛋白而产生的。     

白细胞介素-10与支气管哮喘之间关系的研究

白细胞介素-10(IL-10)主要由ThO和Th2细胞在激活状态下分泌的一种细胞因子,是具有多向性生物活性的强力免疫抑制因子,可阻断多种炎性细胞因子的合成,具有抗炎作用,文章就其与支气管哮喘之间关系的研究进展作一报道.     

SRB法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长的影响

目的检测亚硒酸钠对胃上皮细胞系SGC-7901细胞生长的影响.方法采用SRB实验法.结果5,10,20μmol/L的亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24,48,72,96 h后,吸光度A值分别为:0.22,0.65,0.85,0.70;0.28,0.62,0.66,0.50;0.24,0.40,0.36,0.20.对照组为:0.36,0.72,1.25,1.30.结论亚硒酸钠对SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用,该抑制作用与亚硒酸钠的浓度和作用时间呈正相关.     

大鼠骨髓基质细胞培养的实验研究

目的探讨体外培养大鼠骨髓基质细胞的可行性,为细胞移植治疗疾病奠定基础.方法采用淋巴细胞分离液(1.077 g/L)离心分离MSCs.加入碱性成纤维生长因子(bFGF)进行培养,并用流式细胞仪进行荧光三标检测鉴定.结果分离后的MSCs在生长因子的作用下出现增殖性生长,经流式细胞仪检测显示CD90,CD106阳性,CD45阴性.结论可在体外培养出较大密度大鼠骨髓基质细胞.     

基于物理性质捕获循环肿瘤细胞的微流控芯片

为满足利用微流控技术实现芯片上循环肿瘤细胞捕获日益增长的需求,研制出基于肿瘤细胞尺寸和变形性进行分离的微流控芯片。基于细胞尺寸和变形性差异原理设计芯片,利用半导体加工技术制备出以玻璃和聚二甲基硅氧烷(PDMS)为材料的微流控芯片,使用8μm间隔的微柱作为捕获单元,应用于乳腺癌细胞系MCF-7肿瘤细胞的捕获;并以MCF-7细胞为模型,考查了芯片的分选条件和分选效果。在1 mL/h流速下,MCF-7细胞捕获率可达到68%;多次实验结果表明该芯片捕获的最佳流速为1 mL/h。Calcein-AM和Hoechst对MCF-7细胞进行染色,可方便对捕获后细胞进行识别和拍照。结果基于细胞尺寸和变形性原理所设计的捕获循环肿瘤细胞微流控芯片操作简单、成本低、通量高,有望逐步用于临床循环肿瘤细胞检测。