小鼠孤雌生殖胚胎干细胞的分离及分化潜能研究

用免疫外科法从小鼠孤雌生殖胚胎分离胚胎干细胞,并研究了其在体内、体外的分化潜能．结果发现:从小鼠孤雌生殖的胚胎中可分离出胚胎干细胞(pES),可以传代培养25代,能表达很强的碱性磷酸酶,核型稳定呈40XX．培养至第18代的pES在体内可诱导肿瘤形成,并可分化为三个胚层的组织细胞．免疫组化结果显示:神经细胞特异性烯醇化酶（NSE）、肌肉特异性肌动蛋白?-actin均呈阳性,表明分离培养的pES在体内可至少分化为来自外胚层和中胚层的组织细胞．传至第20～24代的pES细胞,经体外定向诱导分化,可定向分化为节律性收缩的心肌细胞及神经细胞．免疫组化检测显示节律性收缩的心肌细胞表达?-actin,而神经细胞表达NSE．结果表明:利用免疫外科法可从孤雌生殖的小鼠胚胎建立pES,这些pES在体内、体外都具有分化为多种类型细胞的潜能．     

应用人脸姿态估计实现人机信息交互

针对残疾人士不用手实现计算机操作的问题,提出了一种通过面部姿态的视觉分析手段控制鼠标操作的新方法。首先,由CCD摄像头获得人脸视频图像,采用Haar特征和基于AdaBoost算法的目标检测手段确定人脸区域,再通过图像分析手段提取2个眼角、2个嘴角和鼻尖共5个特征点;然后,以一幅正面图像的特征点位置为参考,对实时图像中人脸的空间姿态进行估计;最后,根据人脸的3个偏转角定义并生成人机交互信息,用于计算机人机界面中鼠标位置的移动和操作控制。实验表明,在良好的光照条件下,该方法可以快速准确完成人脸姿态估计并获得鼠标控制信息,帮助伤残人士实现人机信息交互。     

高能要素膳食对荷人乳腺癌裸鼠营养支持的观察

目的研究高能要素膳对裸鼠肿瘤生长的作用和给予抗癌药物后的营养支持.方法将40只BALB/C裸鼠右腋下荷人乳腺癌MCF-7细胞,随机分成4组:对照组,要素膳组(ED),化疗组(Cye)和要素膳加化疗组.给药15 d后处死.结果 ED组动物的体质量明显高于其余各组,Cye组的体质量最低.与对照组相比,ED组的抑瘤率22.90%,Cye组为52.34%,ED加Cye组为40.65%.对照组的瘤体比为5.77,ED组仅为4.19,两组之间的差异有显著性(P《0.05).要素膳还具有升高荷瘤小鼠血清总蛋白和白蛋白的作用.结论要素膳可改善荷瘤小鼠的一般营养状况,可减轻抗癌药物对机体的毒副作用,并可能有一定的抑瘤作用.     

小白鼠部分器官中乳酸脱氢酶（LDH）分布特异性的探讨

本文证实了乳酸脱氢酶（LDH）在小白鼠部分器官中的分布特异性.指出了乳酸脱氢酶五种同工酶在小白鼠的心肌、骨骼肌、肾脏、脑和肝脏中均存在，并且在心肌、脑和肾脏中LDH-1（H4）占优势;而在骨骼肌和肝脏中以LDH-5（M4）占优势;分别与各自的生理功能相适应.     

抽取小鼠脑脊液简便易行的新方法

目的 建立抽取小鼠脑脊液的一种简单易行,材料低廉,生存率与成功率高的方法,为小鼠脑脊液的相关研究提供参考。方法 自制微量吸管。将小鼠头部固定与身体大约成120°角,对小鼠皮下组织和肌肉用镊子进行钝性分离,找到小鼠白色硬脊膜,进管抵达小脑延髓池,缓慢抽取小鼠脑脊液并将管退出,最后缝合小鼠伤口。结果成功获得小鼠脑脊液2～5 μL,小鼠存活。讨论 目前,大多文献记载的是大鼠脑脊液的抽取方法或较为复杂的小鼠脑脊液抽取方法,而此种针对小鼠的脑脊液抽取方法不但简单易行,对仪器要求低,成功率高而且小鼠生存率高,可以反复抽取。     

北沙参免疫活性多糖制备方法研究

为了确定北沙参免疫活性多糖的最佳制备方法,采用4种方法制备北沙参多糖样品,并进行体外小鼠脾淋巴细胞增殖实验,对各样品进行免疫活性比较。以提取率及体外小鼠脾淋巴细胞增殖率为指标,分析95%乙醇回流除去小分子、除蛋白及不同浓度醇沉等步骤的必要性,确定北沙参免疫活性多糖最佳制备方法。通过提取率及体外小鼠脾淋巴细胞增殖率比较,经沸水提取、浓缩和干燥后获得的北沙参免疫活性多糖样品提取率最高,达33.15%;且该样品对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用最强,在62.5 μg/mL浓度下增殖率达到33.93%。结果显示北沙参免疫活性多糖的最佳制备方法为沸水提取、浓缩并干燥即可,无需进行95%乙醇回流除去小分子、除蛋白及不同浓度醇沉等步骤。     

利用CRISPR-Cas9 构建syncytinA 条件敲除小鼠

摘要: 目的构建syncytinA( 合胞素A) 条件敲除小鼠,为进一步研究syncytinA 在胎盘形成过程中发挥的融合及非融合作用及研究子痫前期病理模型提供基础。方法在用ES 细胞打靶完成syncytinA 外显子上游loxp 同源重组基础上,利用CRISPR-Cas9 得到syncytinA-loxp 小鼠。构建syncytinA-loxp 转基因载体及sgRNA,通过原核显微注射方法将构建好的doner、Cas9 及sgRNA 一并注射到C57 小鼠受精卵中,并移植入同期受孕代孕受体ICR 输卵管中获得子代小鼠。用PCR 方法检测子代鼠尾基因型, loxp 阳性小鼠与WT 交配获得syncytinA-loxp 小鼠。为了检测syncytinA-loxp 能否被敲除,通过与prime1cre 及zp3cre 交配获得syncytinA － / － ,PCR 及q-PCR 检测syncytinA 是否被敲掉。结果经PCR 及q-PCR 方法检测,我们成功得到syncytinA － / － 胚胎。结论syncytinA 条件敲除小鼠构建成功,为更好的研究它在胎盘及子痫前期中的功能提供了基础。     

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响

通过比较几种常用的化学激活方法对小鼠卵母细胞的孤雌激活和孤雌生殖胚胎体外发育的影响,从而筛选出小鼠卵母细胞孤雌激活的适宜方法.选取成熟小鼠卵母细胞,随机分为以下9组进行激活处理:①离子霉素(I)+6-二甲氨基嘌呤(D);②I+D+细胞松弛素B(CB);③I+放线菌酮(C);④I+C+CB;⑤φ(乙醇)=7%的乙醇(E)+D;⑥E+D+CB;⑦E+C;⑧E+C+CB;⑨Sr2++CB.比较了这9种化学激活方法以及SrCl2的作用时间和卵龄对小鼠卵母细胞激活效果的影响.实验结果表明:小鼠卵母细胞孤雌激活率与激活措施和卵龄有关;小鼠卵母细胞可以被I+D+CB或SrCl2+CB有效激活,激活率及孵化囊胚发育率均高于其他激活方法(P0.05),且以SrCl2+CB最为有效.hCG注射后20h为小鼠卵母细胞进行SrCl2激活的最适卵龄,其最佳处理时间为4h.对小鼠卵母细胞而言,6-DMAP比放线菌酮的激活效果好.     

正确认识鼠在传播人狂犬病中的流行病学意义

本文在穷尽式检索国内外狂犬病文献的基础上,分析了鼠在传播人狂犬病中的疫源作用,综述了国内外鼠狂犬病测毒研究,介绍了有关国家与世卫组织对鼠传狂犬病的防治建议,探讨了我国应采取的防治意见,调查了国内对鼠传狂犬病的某些夸张宣传及认识偏差,并试图究其根源,加以拨正。     

UPLC-Orbitrap HRMS法测定小鼠血液中香豆素及其代谢物

以香豆素为探针底物,建立了测定小鼠血液中香豆素及其代谢物的超高效液相色谱-轨道阱高分辨质谱(UPLC-Orbitrap HRMS)法.以4-甲基伞形酮为内标,样品用乙腈沉淀蛋白后,直接进入XDB-C_(18)色谱柱分离并采用一级全扫描和数据依赖二级扫描(Full MS/dd MS~2)模式进行质谱分析.通过测定7-羟基香豆素的生成量评估5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)对小鼠CYP2A5酶活性的影响.结果表明:各目标物的检出限为0.011~0.016 ng/m L,回收率和日内精密度分别为90.2%~110.4%和1.86%~7.08%.方法选择性好,分析效率高,适合于小鼠血液中香豆素及其代谢物的测定.5-MOP组小鼠香豆素的最大血药浓度Cmax为对照组的1.42倍(P0.01),药时曲线下面积AUC0-∞为1.59倍(P0.05),半衰期t_(1/2)为1.05倍(P0.01),5-MOP能够显著抑制小鼠CYP2A5酶活性.