全文获取类型
收费全文 | 3067篇 |
免费 | 125篇 |
国内免费 | 307篇 |
专业分类
系统科学 | 29篇 |
丛书文集 | 77篇 |
教育与普及 | 40篇 |
理论与方法论 | 7篇 |
现状及发展 | 196篇 |
研究方法 | 1篇 |
综合类 | 3142篇 |
自然研究 | 7篇 |
出版年
2024年 | 2篇 |
2023年 | 11篇 |
2022年 | 47篇 |
2021年 | 34篇 |
2020年 | 45篇 |
2019年 | 35篇 |
2018年 | 41篇 |
2017年 | 55篇 |
2016年 | 40篇 |
2015年 | 80篇 |
2014年 | 97篇 |
2013年 | 85篇 |
2012年 | 146篇 |
2011年 | 121篇 |
2010年 | 122篇 |
2009年 | 169篇 |
2008年 | 175篇 |
2007年 | 232篇 |
2006年 | 246篇 |
2005年 | 220篇 |
2004年 | 224篇 |
2003年 | 214篇 |
2002年 | 226篇 |
2001年 | 166篇 |
2000年 | 142篇 |
1999年 | 108篇 |
1998年 | 93篇 |
1997年 | 52篇 |
1996年 | 61篇 |
1995年 | 43篇 |
1994年 | 48篇 |
1993年 | 22篇 |
1992年 | 26篇 |
1991年 | 23篇 |
1990年 | 22篇 |
1989年 | 10篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 2篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 4篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有3499条查询结果,搜索用时 8 毫秒
71.
72.
张宏杰 《陕西师范大学学报(自然科学版)》2006,34(Z1):30-36
利用蝗虫线粒体DNA(mtDNA)基因组中细胞色素b(cyt b)基因部分序列,研究其系统进化关系,所测序列与黑尾果蝇的同源序列一起经Clustal X1.8软件比对,选定46条片段均为432 位点的cyt b基因序列,其中变异位点共有137个;选定13条片段均为258个位点的cyt b基因序列,其中变异位点共有72个;选定27条片段均为640位点的cyt b基因序列,其中变异位点有235 个.利用MEGA 2.1软件,以黑尾果蝇为外群,用p-distance及k-2参数模型、N-J法和ME法构建系统进化树.对蝗虫的系统进化关系进行了研究,确定其分类地位,并对蝗虫进化关系进行初步探讨. 相似文献
73.
目的克隆并在大肠杆菌中表达编码炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,简称ATR)的胞外区基因。方法收集CHO-K1细胞,提取其总RNA,经反转录成单链cDNA,以此为模板PCR扩增出编码ATR胞外区基因,将该基因克隆入载体pUC19中,测序正确后,亚克隆入表达载体pMal-c2x中进行表达。结果利用所设计的引物扩增出完整的编码ATR胞外区基因。以大肠杆菌为宿主在IPTG的诱导下获得表达,激光薄层扫描显示表达蛋白占总蛋白的39%。结论获得了编码ATR胞外区基因cDNA及其原核表达产物,为进一步研究炭疽毒素致病机理和炭疽病的防治奠定了基础。 相似文献
74.
利用高通量测序技术对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序。通过差异分析得到沙田柚S-RNase基因序列。该基因全长为1 238bp(GenBank登录号为KP172529),开放阅读框(ORF)全长为834bp,共编码278个氨基酸,编码的蛋白质的相对分子质量为31.402kDa,理论等电点为5.30。S-RNase蛋白为亲水性蛋白,共有17个可能的磷酸化位点。氨基酸序列分析表明,其编码的氨基酸与柚Citrus maxima、沙糖桔Citrus reticulata和甜橙Citrus sinensis的同源性分别为99%、98%和96%。系统进化树显示沙田柚S-RNase基因与柚、沙糖桔和甜橙亲缘关系很近,属于同一进化分支。 相似文献
75.
将野油菜黄单胞菌(Xanthomonascampestris)NRRL-B-1459菌株的缩酮丙酮酸转移酶基因,在pRK2073辅助质粒的协助下,经三亲本接合法,导入野油菜黄单胞菌NK01小菌落的抗性突变株(NK01·S·1)中,测定各接合子的产胶率、黄原胶粘度及丙酮酸含量,得到一系列优于原始菌株的接合子,其中四株的产胶率、丙酮酸含量及黄原胶粘度分别较出发菌株提高7.28~10.60%、40.24~41.42%和10.79~22.30%. 相似文献
76.
将人纤溶酶原kringle5功能区基因插入融合基因表达载体pET17bBamHⅠ位点,构建成重组质粒pETK23,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,纤溶酶原kringle5功能区基因在重组转化菌株BL21(DE3,pETK23)中获得高效表达,表达产物以可溶性蛋白形式存在,表达量占菌体总蛋白的528%. 相似文献
77.
PJ综合症相关抑癌基因LKB1/STK11的逆转录PCR法克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从正常人胎盘组织中克隆出人野生型PJ综合症相关抑癌基因LKB1/STK11cDNA片段.以提取的总RNA为模板,采用逆转录法获得cDNA第一条链,采用94℃变性、72℃退火及延伸的特殊条件,经PCR扩增出抑癌基因LKB1/STK11cDNA片段,克隆到T载体,在国内首次报道了LKB1/STK11基因的克隆.序列分析表明,该cDNA全长1299bp,与GenBank中人野生型LKB1cDNA编码序列完全相同,证实获得了人野生型抑癌基因LKB1/STK11的cDNA克隆.LKB1/STK11cDNA的成功克隆为其原核表达载体的构建和LKB1/STK11蛋白在细胞内的作用及其抑癌效果、抑癌机理的研究打下了基础. 相似文献
78.
随着经济的发展,有毒有害难降解污染物引起的环境问题变得越来越严重。对于这类污染物的处理多采用生化处理方法,其中生物强化技术是目前较好的方法,但是它也存在强化效果差、处理效率低等问题。国外研究人员发现:遗传物质可在不同的生物个体之间或单个细胞的内部细胞器之间自发进行交流,称为水平基因转移。在污染体系中,降解基因的转移能够使土著菌获得降解新功能,从而强化对难降解污染物的处理,这就为现有的生物强化技术提供了一种解决难降解污染问题的新思路。介绍了水平基因转移的概念以及将其应用于污染治理中的研究进展,并分析了技术发展前景。 相似文献
79.
马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆和结构分析 总被引:3,自引:0,他引:3
以马铃薯基因组DNA为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的cDNA序列所设计的两个引物,通过PCR扩增得到666bp的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区,并将此片段克隆到pUC18的SmaI位点.序列分析结果表明该基因除去末端一终止密码子外其可译框架编码221个氨基酸残基,前导肽包括32个氨基酸残基,故该抑制剂的成熟蛋白由189个氨基酸组成,第67位的精氨酸为抑制胰蛋白酶的活性中心.与cDNA相比核苷酸的同源性为94.3%,氨基酸的同源性为90%.基因DNA无内含子. 相似文献
80.
利用lat基因突变的重组质粒pKCLHS对紫外诱变的克拉维酸(Clavulanic acid)高产菌株Streptomyces clavuligerusB71—14的胁基因进行了插入失活,对获得的基因突变子进行了PCR验证、菌体生长测定、发酵特征测定,并对发酵液申的克拉维酸进行了初步提取和含量测定.结果表明,突变菌株的lat基因申插入了含有阿泊拉抗性的基因片段,突变菌株的生长速度与原始菌株无明显变化,甜突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的1,11~1.29倍,产头霉素C的能力显著降低. 相似文献