增强UV-B辐射对诸葛菜POD和CYT同工酶基因表达的影响

在室内人工条件下短期内增强UV B辐射(0 028～0 029J/(m2·s)),利用不连续非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳技术对3个不同地理种源的诸葛菜叶片过氧化物酶(POD)和细胞色素氧化酶(CYT)同工酶基因表达变化进行了研究.发现各个种源材料的POD和CYT酶Pod 2,Pod 3,Pod 4(重庆种源处理组除外)和Cyt-2位点基因表达与对照组相比均有明显增强,Pod 1和Cyt-1位点酶基因被激活而表达.并由于UV B辐射诱导产生许多新的同工酶带,这表明,短期内一定程度增强UV B辐射可以加强诸葛菜叶片POD和CYT同工酶的基因表达.     

家蚕基因组P450基因家族的分析

利用家蚕基因组mRNA和氨基酸数据库对P450基因进行搜索．结果显示：在家蚕基因组中发现77个P450基因．分别归于18个P450家族和26个亚家族,其中有9个多基因家族。3个基因家族的成员超过10个,CYP4有20个成员。是一个典型的多基因家族。对P450基因进行正选择、基因转换和基序分析。结果表明：1个组（包含3个P450s基因）中检测出了显著的正选择替换位点,在这1个组中．转换事件的次数为3次。     

西藏胡黄连根状茎差异表达基因的筛选及分析

 西藏胡黄连是著名的濒危西藏药材, 其粗壮的根茎部是重要的合成和储存药用萜类物质器官,萜类含量显著高于叶部。为克隆西藏胡黄连根状茎和叶的差异表达基因,利用抑制消减杂交技术,构建了根状茎特定的抑制消减文库。从该SSH文库中随机挑取片段不一的阳性克隆测序,采用Blastx进行同源比对,获得了27个表达序列标签（EST）,并获登录号。序列统计分析结果表明,其中有11个EST在GenBank中无同源性序列,推测可能是新基因片断。蛋白质功能分类结果表明,这些蛋白质与翻译、能量代谢、转运与结合、细胞膜合成、氨基酸生物合成及中间代谢6大类蛋白功能有关。为深入研究与萜类生物合成直接或间接相关基因,选择了长595 bp的差异表达EST序列EX172715进行了同源比对和蛋白系统进化分析。结果表明,EX172715具有细胞色素P450单加氧酶的特征结构,与拟南芥的细胞色素P450单加氧酶蛋白的同源性高于水稻和小麦。提供了一组与西藏胡黄连次生代谢相关的新基因库。     

Phylogenetic relationship and morphological evolution in the subfamily Limenitidinae （Lepidoptera： Nymphalidae）

The mitochondrial cytochrome oxidase subunit I （CO1） gene and the nuclear elongation factor 1 α（EF-1α） gene were sequenced from 29 species of Nymphalidae （Nymphalidae, Lepidoptera）. Phylogenetic trees were constructed based on the sequences determined from the 29 species and sequences of other 36 species deposited in GenBank using the neighbor-joining （NJ）, maximum likelihood （ML） and Bayesian methods with Libythea celtis （Libytheinae） as the outgroup. Our phylogenetic trees indicated four major clades. Clade A includes three subfamilies： Apaturinae, Nymphalinae, and Limenitidinae, excluding the tribe Limenitidini; Clade B includes the subfamilies Heliconiinae and the tribe Limenitidini; Clade C includes Satyrinae, Calinaginae, Charaxinae and Morphinae; and Clade D includes subfamily Danainae. Our study suggested that the tribes Pseudergolini, Biblidini, Limenitidini and Cyrestidini should be considered as subfamilies and confirmed the interspecific relationships within the subfamily Pseudergolinae, namely Amnosia ＋（Pseudergolis ＋ （Stibochiona ＋ Dichorragia））. We then mapped three morphological characters （spot of anal angle, eyespots, and process from outer margin of hind wing） onto the phylogenetic tree constructed by ML analysis using the combined sequence data. Based on this the evolutionary patterns of these morphological characters were identified, they indicated that the three characters evolved repeatedly in the family Nymphalidae.     

乙醇对细胞色素c和脱辅基细胞色素c的结构转换影响

用紫外－可见吸收光谱,荧光光谱和圆二色谱对细胞色素c和脱辅基细胞色素c在不同的φ（乙醇）溶液中的结构进行了表征。结果表明,乙醇对细胞色素c的α－螺旋二级结构影响很小,而对血红素配位的影响十分明显,可导致血红素Fe-Met80配位键断裂,另一方面,乙醇对脱辅基细胞色素c有明显的结构转换诱导作用,在φ（C2H5OH）＝0．55（乙醇／水）溶液中,脱辅基细胞色素c的α－螺旋结构含量可以达到全蛋白的89％,研究结果表明：负电荷微环境的诱导对脱辅基细胞色素c的结构转换并不是必要的,改变溶剂与脱辅基细胞色素c之间的疏水和氢键相互作用力也可以诱导脱辅基细胞色素cα-螺旋的形成。     

细胞色素C在电沉积PAMAM—HA修饰电极上的电化学行为

采用双电位阶跃法在铂电极上电沉积制备聚酰胺胺一羟基磷灰石复合涂层，研究了细胞色素C在复合涂层修饰的铂电极上的电化学行为，循环伏安测量结果表明，细胞色素C在修饰电极上呈现一对氧化还原电流峰，表现为扩散控制的准可逆的电子转移过程、重点探讨了涂层的厚度对促进细胞色素C电子传递的影响．对电化学交流阻抗谱的测试结果进行了相关的电化学参数的拟合，讨论了该修饰电极促进细胞色素C电子传递可能的机制．     

尖镰胞菌细胞色素P450 55a1基因超表达载体的构建和水稻日本晴遗传转化

要将细胞色素P450 55a1基因克隆到镰刀菌素植物超表达载体pCAMBIA1302中,构建了pCAMBIA1302-cyp55a1-gfp1植物超表达载体,以水稻日本晴为遗传转化的受体对象,通过农杆菌介导侵染方法进行了遗传转化.结果表明：成功构建了细胞色素P450 55a1基因超表达载体,获得了多个细胞色素P450 55a1基因超表达的阳性植株,并以RT-PCR技术分析了阳性植株中细胞色素P450 55a1基因的表达水平.     

2，4-二氯苯酚与肌红蛋白相互作用研究

用琼脂糖水凝胶在玻碳电极表面固定肌红蛋白（Mb）,研究了Mb与有毒且难降解的有机污染物2,4-二氯苯酚（2,4-DCP）的相互作用．在无氧的溶液中,2,4-DCP与Mb中的血红素形成了配合物,但没有催化反应发生;在氧气饱和的溶液中,Mb催化2,4-DCP羟基化,表明Mb具有细胞色素P450单加氧酶的活性．2,4-DCP的浓度在12．5—208μmol·L^-1。范围内与催化电流呈线性关系,检测限为2．06μmol·L^-1．紫外可见光谱证实2,4-DCP与Mb氨基酸残基之间存在强烈的作用,409nm处峰吸收减小,表明血红素Fe（Ⅲ）／Fe（Ⅱ）的价态发生改变,进一步证明Mb与2．4-DCP发生了氧化还原反应．     

Herbivory in holometabolous and hemimetabolous insects: contrasts between Orthoptera and Lepidoptera

Summary Adaptation to a phytophagous diet involves physiological compromises that may be influenced by developmental constraints. In this review, we compare patterns of hostplant utilization with respect to nutrition and allelochemistry in representative holometabolous (lepidopteran) and hemimetabolous (orthopteran) species in order to identify those potential constraints. Overall in Lepidoptera greater molting efficiency and gut permeability, which enhance nutritional efficiency, result in higher exposure to allelochemicals and are associated with greater activity and inducibility of cytochrome P450 monoxygenase detoxication enzymes. In contrast, in Orthoptera, relative impermeability to allelochemicals due to the peritrophic membrane and cuticular sclerotization is associated with reduced nutritional efficiency and lower detoxication enzyme activity.