Spectroscopic studies on interaction of hemoglobin and serum albumin with nicotine

The interactions of nicotine and Hb/SA were studied in vitro by UV/Vis, fluorescence, 1H NMR and FT-IR spectroscopies. The UV/Vis absorbance of Hb/SA (200 nm)shifted to red and decreased gradually with the addition of nicotine, indicating that the protein conformational change resulted from the chemical interaction. With increasing nicotine concentration, incubation of SA with nicotine caused the quenching of fluorescence typical of protein tryptophan residues, which meant that the vicinity of the tryptophan residues of SA was changed because of nicotine. FT-IR spectra showed that α-helix component of Hb/SA decreased, turn and β-structure components of Hb/SA increased in the presence of nicotine. In the 1H NMR spectra of nicotine, all proton peaks on pyrrolidinyl ring moved to downfield and the resonance emanating from nicotine was preferentially broadened while the concentration of Hb/SA increased. All these results indicate that nicotine and Hb/SA in vitro interact on each other, forming a new complex and inducing the protein conformational change.     

3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-（4-对甲氧基）苯基-1-苯基-1，4-二氢吡喃并[2，3-c]吡唑与牛血清白蛋白相互作用的研究

采用荧光光谱法研究了人体生理pH值条件下,3-甲基-6-氨基-5-氰基-4-(4-对甲氧基)苯基-1-苯基-1,4-二氢吡喃并[2,3-c]吡唑(Ⅰ)与牛血清白蛋白(BSA)分子间的相互结合反应;获得了不同温度下Ⅰ与BSA作用的结合常数K和结合位点数n;并根据Forster非辐射能量转移机理,计算出其与BSA相互作用时给体-受体间距离r为5.01 nm及能量转移效率E为0.280.证实了Ⅰ与BSA的相互结合作用为单一的静态猝灭过程,确定了其与BSA分子间有较强的结合作用,且结合力以疏水作用力为主.     

Interaction of aloe-emodin with human serum albumin

The presence of several high affinity binding sites on human serum albumin (HSA) makes it a possible target for many drugs. This study is designed to examine the effect of aloe-emodin on HSA by fluo-rescence, CD spectroscopy and molecular modeling. The results of fluorescence measurements sug-gested that the hydrophobic interaction was the predominant intermolecular force stabilizing the AE-HSA complex, which was in good agreement with the result of molecular modeling study. And the enthalpy change ΔH0 and the entropy change ΔS0 were calculated to be -7.041 kJ·mol-1 and 76.619 J·mol-1·K-1 according to the Van't Hoff equation. The alterations of protein secondary structure in the presence of AE in aqueous solution were quantitatively calculated from CD spectra, and the content of α-helices obviously increased.     

甲基红与牛血清白蛋白结合的光谱研究

牛血清白蛋白在不同pH的溶液中存在N(Native,pH～7.0),B(Basic,pH～9.0),E(Expanded,pH3.5以下)等几种结构形态.用光谱技术研究了染料甲基红(Methyl red,MR)和BSA的结合机理,研究了MR和BSA在不同pH的三酸缓冲溶液中的结构和构象变化,荧光猝灭方法测得两者在pH3.0,4.9,7.0,9.0溶液中结合常数分别为7.544×105 L/mol,7.594×105 L/mol,4.728×105 L/mol,4.880×105 L/mol;结合位点数分别为17.89,0.978 3,3.079,8.865.同步荧光显示MR加入对Tyr残基微环境没有影响,但对Trp残基产生微扰,使其最大发射波长发生蓝移.图5,表1,参20.     

碱性介质中茜素黄R与牛血清蛋白相互作用研究

在碱性条件下,采用紫外—可见分光光度法研究了茜素黄R(Alizarin Yellow R)与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应。研究表明,AYR—BSA二元配合物的最大吸收波长为386 nm,比AYR紫移约108 nm;建立了碱性条件下以AYR测定蛋白质的光谱分析法,对样品分析表明,回收率为96.4%~106.6%,相对标准偏差为0.28%~1.13%;采用双波长法、平衡透析法和单波长法对AYR与BSA的相互作用的研究结果基本一致,在386 nm处,AYR—BSA配合物的结合比为nAYR:nBSA=5 1,摩尔吸光系数ε=9.12×103L.mol-1.cm-1,相互作用的条件平衡常数K=8.13×105。     

荧光法研究氟罗沙星与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光法研究了氟罗沙星对血清白蛋白的荧光猝灭现象，根据荧光猝灭双倒数图读物计算了氟罗沙星与牛血清白蛋白之间的结合常数，根据Foester能量传递原理计算出氟罗沙星在牛血清白蛋白上的结合位置，并根据热力学参数研究了氟罗沙星与牛血清白蛋白之间的作用力类型。     

荒漠沙蜥血清蛋白含量的年周期变动

对荒漠沙蜥（Phrynocphalus przewalskii)血清蛋白仿及血清蛋白组分的周期变化进行了测定，测定时间为4－10月的每月中旬及1月中旬（进行人工冬眠的蜥蜴），血清总蛋白含量采用紫外分光光度法测定，血清蛋白组合组分采用醋酸纤维素薄膜电泳分离，然后用双波长色谱扫描仪扫描，计算相对含量，测定结果表明，荒漠沙蜥的血清总蛋白含量在深冬眠期的1月最高，为81．45g/L，4月出 一进入繁殖季节，其含量开始下降，夏季（6－8月）降为43．81g/L，其中7月最低，为38．07g／L，秋季的含量略低于春季的含量，但差异不显著（P＞0．05），在冬 眠前（10月下旬）及冬眠期（1月中旬），雌性的含量高于雄性，且差异显著（P＜0．05），在出眠后的繁殖季节雄性的含量高于雌性，在冬眠季节清蛋白的比例相对增加，而球蛋白的比例相对减少。     

超滤质谱法研究人血清白蛋白与甘草提取物的相互作用

为研究和筛选甘草提取物中的活性成分,采用超滤质谱法(UF-MS)研究了人血清白蛋白和5种甘草提取物(甘草苷、甘草酸、甘草素、甘草呋喃酮和甘草利酮)的相互作用.结果表明:这5种甘草提取物均与人血清白蛋白有不同程度的结合,其中甘草酸的结合能力最强,其次是甘草苷、甘草素、甘草呋喃酮和甘草利酮.说明超滤质谱法可准确识别与受体蛋白质结合的活性小分子配体,实现天然产物活性成分的快速筛选.     

糖尿病早期预警肽类生物标志物的初步筛选

基于蛋白质组学策略结合¹⁸O标记技术,分析人血清白蛋白糖基化程度的糖尿病生物标志物筛选模型.基于HPLC-ESI/TOF MS的检测方法,筛选对葡萄糖敏感的人血清白蛋白酶切肽段.建立糖尿病监测及早期预警肽类生物标志物筛选模型,初步筛选出11个潜在的糖尿病早期诊断生物标志物.