乌鳢（Channa argus）干扰素刺激基因Viperin和ISG15及其启动子的克隆与特征分析

应用抑制差减杂交、末端快速扩增和基因步移技术,克隆并鉴定了乌鳢干扰素刺激基因Viperin和ISG15及其启动子序列.Viperin cDNA全长1474nt,包含1059nt的开放阅读框,编码352个氨基酸.除N末端70个氨基酸外,Viperin蛋白氨基酸序列在鱼类和哺乳类具有高度的保守性.ISG15 cDNA全长758nt,包含468nt的开放阅读框,编码155个氨基酸,含有两个泛素样(UBL)结构域,C末端具有保守的UB偶联结构(LRGG).Viperin和ISG15启动子区存在保守的干扰素刺激反应元件(ISRE)和γ-干扰素激活序列(GAS).ISRE是干扰素刺激基因启动子区的重要特征,并与干扰素调控因子(IRF)1和IRF2的识别序列(IRF-E)部分重复;GAS参与介导II型干扰素激活基因的诱导转录.Viperin启动子区还包含保守的NF-κB结合位点,这是保守的NF-κB结合位点以一致的序列模式(GGGRNNYYCC)出现在鱼类干扰素刺激基因启动子区的首次报道.此外,Viperin和ISG15启动子尚存在TATA,CAAT,Sp1等转录因子结合位点.乌鳢ISG15基因5′非编码区含有单一的内含子,而Viperin基因5′非编码区未发现内含子.Viperin和ISG15mRNA主要表达在头肾、后肾、脾脏和鳃,肝脏中也有少量表达.体内干扰素诱导剂polyI:C刺激后,Viperin和ISG15基因在肝脏的表达水平明显增加.     

干扰素及其研究进展

主要介绍了干扰素的发现和分类，以及近年来干扰素在医学中的应用和基因工程中的研究、开发进展情况，最后简要介绍和讨论了干扰素的使用安全性问题。     

用酶联免疫吸附试验检测人滋养层干扰素

<正> 虽然人们已熟知人绒毛促性腺激素(hCG)是维持妊娠黄体的主要激素,但是也有资料表明在早期妊娠过程中可能还有其他蛋白质的参与维持,特别是类似于反刍类滋养层蛋白-1的干扰素类物质。人羊水、胎     

人αB干扰素基因在PGK1启动子和α因子前导序列控制下在酵母中的表达和分泌

借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.     

单克隆抗体亲和层析纯化基因工程人γ-干扰素研究

用抗基因工程人γ－干扰素单克隆抗体（２Ａ１２）细胞株亲和层析从表达人γ－干扰素的大肠杆菌抽提液中纯化经稀释复性后的γ－干扰素。一步纯化后的γ－干扰素含量达９５％以上，蛋白质的比活性达 １．２×１０ｕ／ｇ，收率为７８％。洗脱液用 ０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣＩ的 ＰＢＳ溶液，洗脱率达９２．８％。     

Study on peptide-peptide interaction using high-performance affinity chromatography and quartz crystal microbalance biosensor

The specific interaction between sense and antisense peptides was studied by high-performance affinity chromatography （HPAC） and quartz crystal microbalance （QCM） biosensor. Fragment 1-14 of human interferon-β （hlFN-βwas chosen as sense peptide and its three antisense peptides （AS-IFN 1, AS-IFN 2, and AS-IFN 3） were designed according to the degeneracy of genetic codes. The affinity column was prepared with sense peptide as ligand and the affinity chromatographic behavior was evaluated. Glu-substituted antisense peptide （AS-IFN 3） showed the strongest binding to immobilized sense peptide at pH 7.5. A quartz crystal microbalance-flow injection analysis （QCM-FIA） system was introduced to investigate the recognition process in real-time. The equilibrium dissociation constants between sense peptide and AS-IFN 1, AS-IFN 2 and AS-IFN 3 measured 2.08×10^-4, 1.31×10^-4 and 2.22×10^-5 mol/L, respectively. The mechanism study indicated that the specific recognition between sense peptide and AS-IFN 3 was due to sequence-dependent and multi-modal affinity interaction.     

干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎38例

目的观察干扰素(IFNα-1b)联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎临床疗效。方法干扰素(IFNα-1b)5Mu,肌注,隔日1次,疗程6个月,胸腺肽100mg稀释后静脉滴注,1次/d,疗程1个月。以甘草酸,五味子制剂作对照,疗程3～6个月。疗程中定期监测ALT、HBeAg和HBV-DNA。结果治疗组HBeAg和HBV-DNA的转阴率分别为71%、76.3%,而对照组的转阴率分别为15.8%、21.1%,治疗组与对照组相比差异显著(P<0.01),在ALT复常率方面,治疗组为81.6%,对照组为76.3%,两组相似。结论干扰素联合胸腺肽对乙型肝炎病毒有明显抑制作用。     

α—干扰素治疗慢性宫颈炎106例疗效观察

目的:探讨治疗慢性宫颈炎的新方法。方法:采用武汉天奥制药有限公司生产的奥平栓(α—干扰素)流疗宫颈糜烂,嘱患者临睡前将该栓一粒置于阴道深处,隔日一次,6粒为一疗程,使用二个疗程。结果:共观察106例,有效率达94.3％,治愈率为66.03％,仅5.66％无效。轻度糜烂治愈率显著高于中、重度糜烂治愈率,但三者有效率之间无显著性差异;单纯型糜烂治愈率显著高于颗粒型和乳头型。结论:α—干扰素冶疗慢性宫颈炎疗效肯定,较电烙、冷冻、激光等治疗方式安全、简便。     

人IFN—γ免疫——PCR检测方法的建立及其灵敏性的比较

γ－干扰素（得称ＩＦＮ－γ）首次被描述和提纯是基于它能干扰成纤维细胞中病毒的复制，干扰素阻止病毒复制的能力是很多种生物学检测ＩＦＮ－γ方法的依据，在外周血清里的天然ＩＦＮ－γ含量可能低于目前免疫学检测方法的极限，因此，我们建立了一种改良的免疫ＰＣＲ检测方法。即将抗原体反应的专一性同ＰＣＲ技术的高敏感性的结合，构建一种集ＡＢＣ及ＰＣＲ于一体的双得放大系统，用兔抗ＩＦＮ－γ多抗包被酶联板，加ＩＦＮ－γ     

干扰素α—2b与5—氯代尿嘧啶相互作用的荧光光谱

通过加入５－氯代尿嘧啶后干扰素α－２ｂ荧光发射谱和发射光谱的变化，说明干扰素α－２ｂ与５－氯代尿嘧啶存在分子间结合作用，这种作用对酪氨酸空间位形的影响，改变了干扰素分子内酪氨酸向色氨酸的能量转移。