全文获取类型
收费全文 | 6584篇 |
免费 | 138篇 |
国内免费 | 353篇 |
专业分类
系统科学 | 105篇 |
丛书文集 | 220篇 |
教育与普及 | 241篇 |
理论与方法论 | 348篇 |
现状及发展 | 11篇 |
研究方法 | 1篇 |
综合类 | 6149篇 |
出版年
2024年 | 21篇 |
2023年 | 66篇 |
2022年 | 90篇 |
2021年 | 83篇 |
2020年 | 107篇 |
2019年 | 85篇 |
2018年 | 42篇 |
2017年 | 67篇 |
2016年 | 105篇 |
2015年 | 168篇 |
2014年 | 349篇 |
2013年 | 315篇 |
2012年 | 403篇 |
2011年 | 438篇 |
2010年 | 441篇 |
2009年 | 545篇 |
2008年 | 595篇 |
2007年 | 507篇 |
2006年 | 398篇 |
2005年 | 345篇 |
2004年 | 301篇 |
2003年 | 229篇 |
2002年 | 252篇 |
2001年 | 231篇 |
2000年 | 204篇 |
1999年 | 122篇 |
1998年 | 109篇 |
1997年 | 74篇 |
1996年 | 60篇 |
1995年 | 62篇 |
1994年 | 42篇 |
1993年 | 27篇 |
1992年 | 46篇 |
1991年 | 45篇 |
1990年 | 36篇 |
1989年 | 34篇 |
1988年 | 15篇 |
1987年 | 13篇 |
1986年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1962年 | 1篇 |
排序方式: 共有7075条查询结果,搜索用时 15 毫秒
221.
作为中国现代史上最伟大的文学家之一,鲁迅之所以能够创作出大量深刻且典型的文学作品,塑造出不朽的文学艺术形象,和其独特的表达机制具有很大关系。特别是在《故事新编》当中,鲁迅引用了一些中国古老的神话故事和历史传说,体现了大量的中国传统文化元素。但在表达方面,整体上却十分隐晦,很难从字面意思上直接了解其创作情感和意图,必须经过深入分析研究之后,才能得到深刻的感悟和理解。为此,以《故事新编》为例,从现实与文本关系、叙事方法等方面着手,对其表达机制进行分析,以此获得鲁迅文学作品中的特色内涵,明确传统文化在新历史时期的重要价值和发展方向。 相似文献
222.
利用生物信息学筛选差异表达基因(Differentially Expressed Genes, DEGs),构建前列腺癌(Prostate Cancer, PCa)单细胞层面lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,在分子水平上研究前列腺癌的发生发展过程及预后指标。首先从基因表达综合数据库(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库分别下载单细胞RNA测序数据GSE157703和转录组测序数据TCGA-PRAD,通过R语言筛选差异表达信使RNA(DEmRNA)和差异表达长非编码RNA(DElncRNA),利用相关软件预测并构建lncRNA-miRNA-mRNA调控网络;然后使用R语言进行基因本体论(Gene Ontology, GO)和京都基因与基因百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)分析,运用STRING数据库、Cytoscape软件建立蛋白相互作用网络,同时对单细胞RNA测序数据进行质控、降维、聚类和分群,构建单细胞层面的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络;最后进行生存分析,通过人类蛋白质图谱进行验证。结果... 相似文献
223.
根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因(appA)全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因(appA-P),并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM905A-appA-P,通过PEG1000转化法将线性化的重组质粒转化毕赤酵母GS115菌株,筛选得到一个高效表达植酸酶的重组菌株GS115-appA-P,在25℃摇瓶培养168 h后酶活力达到422 U/mL,该植酸酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在20~50℃、pH1.0~6.0范围内较稳定. 相似文献
224.
叶立周 《河北经贸大学学报(综合版)》2007,7(2):82-85
如果从方法论的角度来考察,黄宗智先生的《中国经济史中的悖论现象与当前的规范认识危机》一文无论是对于当代中国的历史学研究还是整个社会科学研究都具有十分重要的参考意义。这和他的学术经历和学术反思是紧密相关的。 相似文献
225.
226.
227.
抑制消减杂交及反Northern结合高通量筛选食管癌中差异表达基因 总被引:6,自引:1,他引:5
为了解食管癌发生的分子遗传学机理,分离食管癌中差异表达的基因,应用抑制消减杂交(SSH)并与PCR合成双链cDNA,反Northern克隆相结合,成功地自微克级总RNA中分离出8个食管癌中差异表达的基因,其中已知基因5个、新基因片段3个,表达下调的6个、表达上调的2个,中-高丰度基因6个、低丰度基因2个,结果显示多个基因的表达改变参与了食管癌的发生发展,其中新发现的lipocortin I,cystatin A,cystatin B,cytoderatin等13个可能与食管癌的去分化、恶性增殖转化有关,SSH与PCR合成双链cDNA,反Northern筛选SSH克隆相结合,是一种高特异性、高通量的自微量RNA中检出差异表达基因的有效方法。 相似文献
228.
历经百年的探索,生命科学家们终于—— 掌握了基因的真谛 位于人体细胞核23对染色体上的约3~12万个基因可分为4种。 ●结构蛋白基因(即发育遗传基因) 是可以表达出细胞结构的蛋白质。20世纪50年代初,美国人路易斯研究果蝇双胸畸型,发现了同源异形基因控制着体节的发育。20世纪 相似文献
229.
230.
目的建立表达、纯化结构完整的全长人PPAR-γ的方法。方法构建pReceiver-B01-PPAR-γ质粒并转化E.coliBL21(DE3)细胞,诱导表达重组蛋白,优化细胞生长条件;利用亲和色谱和尺寸排阻色谱纯化重组蛋白;胶内酶解重组蛋白,用离子阱质谱仪分析二维AgilentHPLC-Chip纯化的酶解片段;基于MS/MS搜索IPI、Swiss.Prot、NCBInr和MSDB数据库,鉴定重组蛋白。结果在优化的细胞生长条件(TB介质、37℃、0.8mMIPTG、诱导3h),从每升TB中可获得280mg重组蛋白;两步纯化后,获得176mg、纯度为95%的均质重组PPAR-γ蛋白;经质谱分析和搜索蛋白质数据库,获得均匀地分布在整个PPAR-γ多肽链中的33个阳性肽段,覆盖率为60%,表明重组蛋白为结构完整的全长人PPAR-γ。配体结合活性位点S289、H323、H449和Y473无突变,保证全长人PPAR-γ与配体结合的生物学活性。结论本文所建立的方法能成功用于大量表达结构完整的全长人PPAR-γ,有利于进一步的结构、功能研究和活性配体的筛选。 相似文献