胚胎干细胞的培养体系综述

综述胚胎干细胞培养基，有饲养层培养体系和无饲养层培养体系的主要成分，以及无血清胚胎干细胞培养基。     

Regulation of BMP4 on the proliferation and differentiation in SVZa neural stem cells

The neural stem cells in the anterior subventricular zone (SVZa) mainly generate the progenitors that will differentiate into neurons, and along a highly circumscribed migratory access Rostral migratory stream (RMS), they migrate to the olfactory bulbs (OB). To understand the effects of BMPs on SVZa neural stem cells, in this study BMP4 at various concentrations was used to induce SVZa neural stem cells, and the living cell labeling using BMP4 promotor conjugated with red fluorescence protein showed the expression of BMP4 dynamically. The results demonstrated that low BMP4 doses (1-5 ng/mL) promoted while high doses (10-100 ng/mL) inhibited the proliferation of SVZa neural stem cells, and BMP4 promotedneuron differentiation in the early stage (1-3 d), howeverm, it inhibited the neuron commitment after 4 d. Noggin, the antagonist of BMP4, blocked the physiological effects of BMP4. In OB, BMP4 is mainly to accelerate the progenitors to withdraw from the cell cycle and trigger the differentiation, and in RMS, it promotes the proliferation of committed progenitors and not differentiation, further in SVZa, BMP4 enhances astrocyte commitment.     

GFP标记的GDNF重组腺病毒载体的构建和体内外表达

通过构建绿色荧光蛋白(GFP)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)共表达的腺病毒载体,讨论其在治疗脊髓和脑有关神经系统疾病的潜在应用价值,了解腺病毒载体在大鼠体内的分布及在体外分泌外源基因产物能力,并对其生物安全性作了初步考察,为GDNF重组腺病毒载体在临床和基础研究中的应用作了一定准备．     

抗坏血酸定向诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经细胞及其机理研究

神经干细胞(NSCs)是神经系统发生的始祖细胞,具有自我更新和多向分化潜能.NSCs的研究不仅对阐明神经系统发育有重要意义,对神经系统疾病的治疗也提出了新的思路.研究NSCs定向分化的诱导因素和机制对NSCs的应用具有重要意义.本实验在体外神经干细胞培养鉴定和扩增的基础上,观察了抗坏血酸(AA)对NSCs定向诱导分化作用,并探讨了分化过程中相关基因表达的变化和可能的信号传递途径.结果表明AA诱导能明显促进多巴胺能神经细胞特异性酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运子(DAT)mRNA和蛋白表达;NSCs表达Ptx3和较弱的Nurr1,不表达TH,DAT和Shh;诱导后Ptx3表达无变化,Nurr1,Shh,TH和DAT表达增强.Erk阻断剂PD98059能阻断AA对Nurr1,TH,DAT mRNA的作用.提示Nurr1参与AA定向诱导,AA可能通过Erk1/2信号转导途径起作用.研究为获得足够的治疗帕金森氏病的多巴胺能神经元提供了新的思路,并对AA定向诱导的机制进行了初步研究,对更好地发挥NSCs移植治疗帕金森氏病具有重要意义.     

血管内皮生长因子在小鼠胚胎植入"窗口"的表达和功能

血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ,VEGF)是一种特异作用于血管内皮细胞,与血管生成密切相关的生长因子,目前已知VEGF参与胚胎植入及胚胎的血管发生,但是仍不清楚VEGF在植入窗口期的表达情况和具体功能,实验应用离体和间接免疫荧光－激光共聚焦扫描等方法对VEGF在胚胎植入窗口的表达和功能进行了研究,研究发现,VEGF的分布在体外培养的处于植入“窗口”期的小鼠胚泡及其扩展的滋养层细胞和子宫上皮细胞单层上;VEGF抗体能够显著降低在体小鼠胚胎的着床数,在共培养体系中,VEGF抗体能够显著降低小鼠胚泡在子宫上皮细胞单层上的黏附率和扩展率,此作用具有剂量依赖关系,实验表明,VEGF是一种在胚胎植入过程中起重要作用的细胞因子,VEGF可能作为植入胚胎及接受性子宫内膜之间的“局部介导者”（local mediator),参与母胎间的信息传递,促进胚胎植入。     

骨髓基质干细胞分化的神经组织细胞促进周围神经选择性再生的临床前研究

国家863计划重点项目“骨髓基质干细胞分化的神经组织细胞促进周围神经选择性再生的临床前研究”，属干细胞研究及其在组织（器官）工程中的作用研究领域。干细胞的多向分化潜能一直是生物与现代农业技术领域的研究热点，本研究主要对骨髓基质干细胞有可能对周围神经再生的作用做了探索，特点是针对干细胞的多向分化潜能，探讨了干细胞在周围神经再生领域内的可能应用前景。主要研究内容包括以下三大方面：     

带角膜缘干细胞结膜瓣移植治疗翼状胬肉

翼状胬肉是眼科较为常见的眼表疾病之一,翼状胬肉组织向角膜中央生长,发展到一定程度可引起散光、视力下降、眼部不适感及影响美容等,严重影响患者的身心健康,手术是治疗翼状胬肉的主要方法,但传统的翼状胬肉手术复发率较高,高达30～69%,2003年10月至2005年10我院采用带角膜缘干细胞结膜瓣移植治疗翼状胬肉获得了较好的效果,现报道如下：     

扬子鳄胚胎胃PAS反应观察

选取２３例扬子鳄胚胎，对其胃进行ＰＡＳ反应观察．胃表面上皮：第３０天时，上皮细胞表面出现薄层的ＰＡＳ反应阳性物质；第３４～６０天，阳性反应逐渐增强，并出现粘液保护层．胃腺：胃底腺，第４０天腺芽上皮出现ＰＡＳ反应阴性细胞，第４６～６０天胃底腺腺管基部上皮细胞呈阴性反应；幽门腺及贲门腺，第４０天时出现腺芽，腺芽细胞呈阳性反应；第４６～６０天幽门腺及贲门腺腺管基部出现阴性反应细胞．     

初始化之谜尚未解开

与山中教授研究同一课题，同时制成人体iPS细胞的美国威斯康星大学的汤姆森教授。在采访中，汤姆森教授告诉了我们他制造iPS的动机，以及作为首先制成人体干细胞的科学家，他认为万能细胞能够给人类带来的好处。