(6,5)手性单壁碳纳米管的双水相分离及其对紫杉醇的载药研究

采用聚乙二醇/葡聚糖组成的双水相系统(ATP),结合盐酸辅助调节分配的方法,实现了单一(6,5)手性单壁碳纳米管((6,5)SWCNT)的分离。将分离所得的(6,5)SWCNT分散于牛血清白蛋白(BSA)中,并添加紫杉醇(PTX)制备得到(6,5)SWCNT-BSA-PTX三元复合物。采用HeLa细胞对三元复合物进行细胞毒性评价,结果表明,(6,5)SWCNT作为药物载体能够显著降低PTX的半抑制剂浓度(IC_(50 ))至7.1×10~(-9) mol/L。     

紫杉醇对体外大鼠肝细胞影响的实验研究

目的:在通过观察紫杉醇对体外培养大鼠肝细胞的影响来探讨紫杉醇自身毒副作用.方法:采用四唑盐(MTT)比色法及形态学方法观察紫杉醇在不同质量浓度下作用不同时间对肝细胞的影响;采用Hoechst 33258荧光染色法观察紫杉醇作用后,肝细胞的形态变化.结果:质量浓度分别为5、10、20、40、80μg/L的紫杉醇分别作用24、48、72 h后,随着质量浓度的增加、作用时间的延长对体外培养的肝细胞损伤加大、抑制率增加;相同质量浓度的紫杉醇不同作用时间的抑制率无时间效应关系;24 h的IC50质量浓度为28.5μg/L,并能诱导肝细胞发生凋亡.结论:紫杉醇在一定的质量浓度和长时间作用下对肝细胞有细胞毒作用.     

紫杉醇类似物抗癌活性构效关系的神经网络模式识别研究

经对MM3、MM＋、MNDO、PM3几何优化结果进行比较，选用速度最快且精确度较好的MM3分子力学方法计算43个紫杉醇类似物的优势构型，应用MNDO法计算了化合物的电子结构，并用回归分析和BP神经网络模式识别方法寻找其电子结构与抗癌活性的关系．结果表明：（1）紫杉醇类似物及C13侧链的油水分配系数与活性参数问呈抛物线关系，最适油水分配系数Popt=3．14；（2）2-OBz中Bz基团的负电荷密度越大，C1、C3原子的正电荷密度越大对活性越有利；（3）R1、R2、1-OH和2-OBz基团可能是药物与受体作用的重要部位．四参数的定量构效关系显著性较好，神经网络模式识别总识别率为98％，可较精确地预测化合物的抗癌活性．     

紫杉醇与异长春花碱联合顺铂两方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床对比观察

目的:评价紫杉醇联合顺铂方案与异长春花碱联合顺铂方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及毒副反应.方法:经病理组织学及细胞学确诊的58例晚期非小细胞肺癌患者,随机分为两组,紫杉醇联合顺铂组(A组)28例,紫杉醇150mg/m2静滴第1天,顺铂80mg/m2第1天;异长春花碱联合顺铂组(B组)30例,异长春花碱25mg/m2第1、8天,顺铂80mg/m2第1天,两方案每3周重复,3周期以上评价疗效.结果:A、B两组的有效率分别是50.0%(14/28),46.7%(14/30),组间无显著性差异(P>0.05);中位疾病进展时间分别是4.8个月和4.1个月,组间有显著性差异(P<0.05);中位生存期分别是12个月和11.5个月,无显著性差异(P>0.05);一年生存率A组为45.6%,B组为43.5%,组间无显著性差异(P>0.05).两组的主要毒副反应为骨髓抑制,A组Ⅲ-Ⅳ度血小板的减少高于B组;Ⅲ-Ⅳ度白细胞减少低于B组,A组静脉炎低于B组.结论:A、B两组有效率在中位生存期、一年生存率方面较接近,但中位疾病进展时间紫杉醇组占优势.     

紫杉醇产生菌的筛选与发酵条件的调控

采用稀释倒平板法分别从云南红豆杉和南方红豆杉中分离出230余株内生真菌,经薄层层析、紫外及HPLC分析初步筛选,确定有5株表现出产紫杉醇的特性,其中1株真菌产率较高,约为1 mg/L.产紫杉醇的内生真菌菌丝体生长和紫杉醇积累之间存在相反的关系.低浓度乙酸铵(＜0.01 mmol/L)有利于菌丝体生长,不利于紫杉醇积累;较高浓度的乙酸铵不利于菌丝体生长而有利于紫杉醇积累.较高浓度的苯丙氨酸和酒石酸铵(＞0.05 mmol/L)有利于菌丝体生长,不利于紫杉醇积累;较低浓度的苯丙氨酸和酒石酸铵不利于菌丝体生长而有利于紫杉醇积累.亮氨酸对菌丝体生长和紫杉醇积累的影响很小;苯甲酸钠抑制菌丝体的生长和紫杉醇的积累.     

高效液相色谱法测定样品中紫杉醇的含量

建立了反相高效液相色谱法测定样品中紫杉醇含量的方法。色谱柱采用中国科学院大连化学物理研究所生产的YWQC18柱（4．6X250mm,5μm）,流动相为乙腈：水：三氟乙酸（40：60：0．1）,检测波长227um,紫杉醇浓度在40μg／ml～1400μg／ml内呈解性关系。回收率98．2～99．3％,变异系数0．75～3．39％。     

紫杉醇诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇抑制HeLa细胞生长的机制。方法：经荧光染色、电镜观察细胞形态,DNALadder及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果：紫杉醇作用24h经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色,作用48h细胞被染成红色,电镜观察可见细胞变小,染色质浓缩并产生凋亡小体,DNALadder未见明显的梯形条带,流式细胞仪检测紫杉醇作用24h细胞凋亡。结论：紫杉醇可诱导细胞凋亡,也可直接杀伤HeLa细胞,而且以后者为主。     

紫杉醇产生菌HU1353分类地位的探讨

研究了从东北红豆杉(Taxus cuspidarta)树皮中分离到的一株内生真菌HU1353,经微生物发酵法证明可产生紫杉醇后,进一步对其群体形态和个体形态进行了观察,并探讨其分类地位为链格孢属(Alternaria)一新种。模式菌株保存于黑龙江大学微生物重点实验室。     

非洲爪蟾卵非细胞体系中星体的组装及其在核膜重建中的作用

报道了由微管组成的星体在爪蟾卵细胞提取物中的组装过程、动态变化及其在核膜装配过程中的作用. 用精子染色质在爪蟾卵非细胞体系中诱导细胞核重建. 在初期阶段, 总是在精子染色质基部的中心体周围通过微管装配而形成星体. 随着星体的形成, 具有DNA复制功能的细胞核逐步装配. 当完整的细胞核形成后, 星体开始去组装直至消失. 在实验体系中加入微管装配特异抑制剂秋水仙素, 可以有效地抑制星体的组装, 核膜的组装同时受到严重的影响. 高浓度的秋水仙素还抑制核膜膜泡的融合. 若加入微管稳定剂紫杉醇, 微管可以装配, 并在染色质周围形成大而稳定的星体. 在此情况下, 核膜的装配也受到严重影响. 观察发现, 在此被稳定的星体中, 有转运受阻的膜泡存在. 基于以上实验结果, 认为由微管组成的星体在核膜重建中具有重要的作用, 其机制可能是微管参与核膜前体物质向染色质表面的输运.